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靶向提高FBP1表達對骨肉瘤惡性生物學行為及成骨分化的作用研究

發(fā)布時間:2024-05-13 03:09
  第一部分在細胞水平研究靶向提高FBP1表達對骨肉瘤細胞相關(guān)生物學行為及成骨分化的影響目的:探討果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)對人骨肉瘤細胞惡性生物學行為即增殖、凋亡、遷移及成骨分化的調(diào)控作用。方法:(1)運用q RT-PCR法檢測人骨肉瘤細胞MG63、143B及人成骨細胞h FOB1.19中FBP1基因的m RNA表達水平;(2)人骨肉瘤MG63與143B細胞中轉(zhuǎn)染FBP1過表達重組質(zhì)粒,陰性對照組細胞僅做脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染處理,未經(jīng)任何處理的MG63與143B作為空白對照組;(3)通過q RT-PCR和western blot法檢測FBP1基因的m RNA和蛋白表達水平,以驗證FBP1基因過表達效果;(4)通過CCK-8、結(jié)晶紫染色、活細胞計數(shù)法檢測細胞增殖;(5)Annexin V-FITC雙染法和DAPI染色法檢測細胞凋亡,并通過western blot技術(shù)檢測凋亡相關(guān)蛋白的表達;并運用FCM法檢測對細胞周期分布的影響;(6)應(yīng)用細胞劃痕實驗、Transwell實驗檢測細胞的遷移能力;(7)堿性磷酸酶(ALP)染色和茜素紅S染色檢測細胞的早期及晚期成骨分化作用。并通過western...

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 在細胞水平研究靶向提高FBP1表達對骨肉瘤細胞相關(guān)生物學行為及成骨分化影響
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
    4 討論
第二部分 在動物水平研究靶向提高FBP1表達對骨肉瘤作用及其作用機制
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
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本文編號:3972288

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