第一部分在細(xì)胞水平研究靶向提高FBP1表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞相關(guān)生物學(xué)行為及成骨分化的影響目的:探討果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為即增殖、凋亡、遷移及成骨分化的調(diào)控作用。方法:(1)運(yùn)用q RT-PCR法檢測(cè)人骨肉瘤細(xì)胞MG63、143B及人成骨細(xì)胞h FOB1.19中FBP1基因的m RNA表達(dá)水平;(2)人骨肉瘤MG63與143B細(xì)胞中轉(zhuǎn)染FBP1過表達(dá)重組質(zhì)粒,陰性對(duì)照組細(xì)胞僅做脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染處理,未經(jīng)任何處理的MG63與143B作為空白對(duì)照組;(3)通過q RT-PCR和western blot法檢測(cè)FBP1基因的m RNA和蛋白表達(dá)水平,以驗(yàn)證FBP1基因過表達(dá)效果;(4)通過CCK-8、結(jié)晶紫染色、活細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞增殖;(5)Annexin V-FITC雙染法和DAPI染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,并通過western blot技術(shù)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá);并運(yùn)用FCM法檢測(cè)對(duì)細(xì)胞周期分布的影響;(6)應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力;(7)堿性磷酸酶(ALP)染色和茜素紅S染色檢測(cè)細(xì)胞的早期及晚期成骨分化作用。并通過western...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 在細(xì)胞水平研究靶向提高FBP1表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞相關(guān)生物學(xué)行為及成骨分化影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
第二部分 在動(dòng)物水平研究靶向提高FBP1表達(dá)對(duì)骨肉瘤作用及其作用機(jī)制
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3972288