目的:對膽石六號顆粒(DSLHG)中3種特征成分進行含量測定,以期進一步有效地控制其質(zhì)量;基于DSLHG抗肝纖維化作用,應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測其可能的作用途徑,并探究其對主要信號通路的影響,闡釋DSLHG抗肝纖維化的機制。方法:1.采用高效液相色譜(HPLC)法測定DSLHG中梔子苷、虎杖苷和柚皮苷的含量。2.采用四氯化碳(CCl₄)誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,檢測大鼠血清肝功能及肝纖維化指標(biāo)水平;HE和Masson染色觀察肝組織炎性反應(yīng)及纖維化程度。3.利用公共數(shù)據(jù)庫篩選DSLHG活性成分,并通過PharmMapper數(shù)據(jù)庫搜索其潛在的作用靶點,建立活性成分與相關(guān)靶點基因相互作用的網(wǎng)絡(luò),并對DSLHG作用于目標(biāo)疾病的核心靶點進行GO分析和相關(guān)通路富集分析,從分子水平上預(yù)測DSLHG抗肝纖維化的可能信號途徑。4.采用蛋白免疫印跡法檢測PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Caspase-3、cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表達(dá);免疫組織化學(xué)法檢測大鼠肝臟TGF-β1、α-SMA的表達(dá)。結(jié)果:1.方法學(xué)考察表明,建立的含量測定方法專屬性強、簡...

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1高效液相色譜圖(1.梔子苷2.虎杖苷3.柚皮苷)

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文陶月英13件下，供試品溶液梔子苷、虎杖苷及柚皮苷色譜峰能夠與其他成分明顯的分離開，且陰性對照品溶液在相應(yīng)的保留時間處無出峰干擾，說明該方法的專屬性良好。圖1高效液相色譜圖(1.梔子苷2.虎杖苷3.柚皮苷)Fig.1TheHPLCchromatograms(....

圖2各對照品標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文陶月英14表13種特征成分對照品濃度(C)與峰面積(PA)的對應(yīng)關(guān)系Tab.1CorrespondencebetweentheconcentrationandPAofthethreecharacteristiccomponentsGeniposidePol....

圖3DSLHG3種成分在48h內(nèi)的穩(wěn)定性

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文陶月英15表2DSLHG3種組分精密度測定結(jié)果Tab.2Precisiondeterminationresultsof3analytesinDSLHGComponentsPA(mAU*s)RSD/%123456Geniposide6199.406201.5....

圖4DSLHG對大鼠肝組織HE染色的影響(×200,n=6,比例尺=10μm)

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文陶月英25狀排列，肝竇未見明顯擴張及炎細(xì)胞浸潤；門管區(qū)結(jié)構(gòu)完整，未見明顯的纖維組織增生及炎細(xì)胞浸潤。模型組肝組織被膜增厚，肝小葉結(jié)構(gòu)消失，大量纖維組織增生形成“假小葉”，即纖維組織將肝組織分割成含有數(shù)量不等肝細(xì)胞的區(qū)域，中央靜脈位于假小葉邊緣；部分肝細(xì)胞氣....

本文編號：3953679