阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是最常見的一種腦中樞系統(tǒng)的退行性疾病。研究表明,除了斑塊蛋白沉積、神經原纖維纏結的病理特征外,許多AD患者腦部呈現(xiàn)出不同程度的神經元丟失,這與腦部特定的基因表達障礙,如microRNAs等有著密切聯(lián)系。此外,AD的這些病理改變也與胞內的凋亡和自噬水平的失調息息相關。因此,對阿爾茨海默病從遺傳物質變化及胞內分子機制角度進行病理解析十分重要。本論文就以上兩個方面的問題,展開了深入的探究。首先,在第一章中,一種雙光子熒光探針被成功設計出來,成功用于AD模型小鼠(APP/PS1)神經元和鼠腦組織中的miR-9的檢測�；诩t色熒光發(fā)射的碳點和光學異構性的偶氮苯的無酶信號放大設計,使得探針對miR-9的檢測表現(xiàn)出較高的靈敏度,檢測限低至0.57 fM。結果發(fā)現(xiàn),在AD早期,miR-9水平被上調,而在AD晚期,miR-9被下調至低于正常水平,為了解AD的遺傳物質變化提供了新依據(jù)。其次,在第二章中,一種基于碳點(carbon dots,CDs)和嵌段聚合物的新穎的FLIM(Fluorescence Lifetime Imaging)納米傳感器...

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 阿爾茨海默病及其相關功能分子
        1.1.1 阿爾茨海默病簡介
        1.1.2 MicroRNAs的失調對阿爾茨海默病的影響
        1.1.3 阿爾茨海默病中的細胞自噬與凋亡
    1.2 熒光與熒光壽命成像技術
        1.2.1 熒光分析
        1.2.2 熒光壽命成像
        1.2.3 熒光納米材料
    1.3 本論文研究工作
        1.3.1 基于雙光子紅色熒光碳點的信號放大策略用于阿爾茨海默病相關miR-9 的分析
        1.3.2 細胞自噬與凋亡在阿爾茨海默病中的相互作用研究
        1.3.3 研究的創(chuàng)新點
第二章 基于雙光子紅色熒光碳點的無酶信號放大策略用于阿爾茨海默病相關miR-9 的分析研究
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗中所用的DNA、microRNA序列
        2.2.3 實驗儀器
        2.2.4 雙光子紅色熒光碳點的合成
        2.2.5 碳點-DNA-偶氮苯的合成及miR-9 探針的構建
        2.2.6 體外miR-9 的檢測
        2.2.7 神經元及鼠腦切片的培養(yǎng)與孵育
        2.2.8 神經元及鼠腦切片中miR-9 的熒光成像
    2.3 結果與討論
        2.3.1 雙光子紅色熒光碳點的表征
        2.3.2 碳點-DNA-偶氮苯的結構及光響應性能表征
        2.3.3 miR-9 探針的表征及miR-9 體外檢測的熒光可行性分析
        2.3.4 miR-9 的體外檢測性能評估
        2.3.5 神經元細胞內miR-9 熒光檢測與分析
        2.3.6 正常與阿爾茨海默病模型鼠腦切片中miR-9 檢測與分析
    2.4 本章小結
第三章 基于碳點的雙光子熒光壽命探針用于阿爾茨海默病中細胞自噬與凋亡相互作用研究
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 碳量子點的合成與ATG4B、Caspase3 探針的構建
        3.2.4 過氧化氫響應型聚合物的包載
        3.2.5 體外ATG4B、Caspase3 的檢測
        3.2.6 神經元、鼠腦切片的培養(yǎng)與孵育
        3.2.7 神經元及切片中ATG4B、Caspase3 雙光子熒光壽命成像
    3.3 結果與討論
        3.3.1 碳量子點的表征
        3.3.2 ATG4B、Caspase3 探針及復合納米傳感器的表征
        3.3.3 ATG4B、Caspase3 體外檢測的熒光壽命可行性分析
        3.3.4 雙光子熒光壽命用于ATG4B、Caspase3 的體外檢測
        3.3.5 ATG4B、Caspase3 體外檢測性能評估
        3.3.6 神經元中ATG4B、Caspase3 雙光子熒光壽命成像及相互作用分析
        3.3.7 不同時期阿爾茨海默病鼠腦切片中ATG4B、Caspase3 雙光子熒光壽命成像及相互作用分析
    3.4 本章小結
第四章 總結與展望
    4.1 總結
    4.2 展望
參考文獻
致謝
個人簡歷及在學期間取得的科研成果
附件



本文編號：3936414