目的:研究蒿本內(nèi)酯對前列腺癌相關(guān)成纖維細胞(Cancer Associated Fibroblasts,CAFs)的選擇性促凋亡效應(yīng)、對CAFs作用于T細胞的免疫抑制效應(yīng)的抑制及上述兩方面效應(yīng)的相關(guān)分子機制。方法:在蒿本內(nèi)酯的促凋亡效應(yīng)研究中,選用人前列腺癌相關(guān)成纖維細胞作為研究對象,采用人前列腺正常成纖維細胞(Normal Fibroblasts,NFs)作為對照組,采用MTT法檢測細胞增殖情況;采用流式細胞術(shù)和免疫組化檢測蒿本內(nèi)酯作用于CAFs后的細胞凋亡及細胞周期的改變;采用Western blot及qPCR檢測蒿本內(nèi)酯作用于CAFs后凋亡相關(guān)蛋白的表達變化。構(gòu)建C57BL/6小鼠皮下前列腺癌移植瘤模型,每組8只小鼠,前列腺癌細胞系為RM-1,接種密度為5×10⁵/只小鼠,荷瘤第2天后腹腔注射蒿本內(nèi)酯,劑量為5mg/kg體重,隔日記錄腫瘤體積,第18天終止實驗,并取腫瘤組織拍照。在蒿本內(nèi)酯抑制CAFs對T細胞的免疫抑制效應(yīng)的研究中,采用MTT法測定蒿本內(nèi)酯對CAFs及脾細胞生長情況的影響;采用流式細胞術(shù)檢測蒿本內(nèi)酯是否恢復(fù)T細胞的增殖;采用Western B...

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖0-1CAFs的來源[13]

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文13圖0-1CAFs的來源[13]與正常組織中的正常成纖維細胞相比，腫瘤微環(huán)境中的激活成纖維細胞在表型和功能上有顯著性改變[14]。圖0-2成纖維細胞和激活成纖維細胞的區(qū)別[14]

圖0-2成纖維細胞和激活成纖維細胞的區(qū)別[14]

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文13圖0-1CAFs的來源[13]與正常組織中的正常成纖維細胞相比，腫瘤微環(huán)境中的激活成纖維細胞在表型和功能上有顯著性改變[14]。圖0-2成纖維細胞和激活成纖維細胞的區(qū)別[14]

圖1.1蒿本內(nèi)酯顯著抑制CAFs和PC-3卻不抑制NFs（A）蒿本內(nèi)酯對前列腺癌CAFs（***：0.08、0.16、0.24、0.32mM和0.38mM5-Fuvs0）、（B）

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文32結(jié)果1蒿本內(nèi)酯抑制前列腺癌CAFs的增殖1.1一定劑量范圍內(nèi)蒿本內(nèi)酯顯著抑制CAFs和PC-3卻不抑制NFsMTT細胞活性實驗的結(jié)果顯示，一定劑量范圍內(nèi)，蒿本內(nèi)酯對前列腺癌CAFs和前列腺癌細胞PC-3均有明顯的抑制效應(yīng)(圖1.1A-B)。然而，該劑量....

圖1.2蒿本內(nèi)酯誘導(dǎo)前列腺癌CAFs凋亡

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文34圖1.2蒿本內(nèi)酯誘導(dǎo)前列腺癌CAFs凋亡。用不同濃度（0，0.05，0.1和0.15mM）的蒿本內(nèi)酯處理前列腺癌CAFs24h，然后用AnnexinV-FITC和PI進行染色，上機進行流式細胞學(xué)檢測，數(shù)據(jù)采用Flowjo7.6進行分析，流式分析結(jié)果（A....

本文編號：3934662