程序性細(xì)胞死亡配體-1(PD-L1/B7-H1)是存在于多種腫瘤細(xì)胞細(xì)胞膜上高表達(dá)的一種跨膜蛋白。它可以與效應(yīng)T細(xì)胞上的PD-1(程序性細(xì)胞死亡因子1)蛋白結(jié)合,傳導(dǎo)免疫抑制信號(hào),抑制免疫效應(yīng)T細(xì)胞的活性,有利于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和逃逸。已有的研究表明PD-L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑能特異性地與PD-L1結(jié)合,阻斷PD-1/PD-L1通路,解除對(duì)T細(xì)胞活性的抑制,從而增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤免疫力(提高T細(xì)胞殺傷腫瘤的能力),進(jìn)而達(dá)到抗腫瘤的效果。然而臨床研究發(fā)現(xiàn)免疫檢查點(diǎn)抑制劑也存在一些臨床局限性。PD-L1在細(xì)胞中的表達(dá)受一些內(nèi)在機(jī)制的調(diào)控,如:FOXO、NF-κB、HIF-1、STAT3、SRF以及STAT1等信號(hào)通路的調(diào)控。腫瘤細(xì)胞內(nèi)組成型致癌因素會(huì)通過(guò)這些信號(hào)通路促進(jìn)PD-L1的過(guò)度表達(dá)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?鑒于免疫檢查點(diǎn)抑制劑在臨床應(yīng)用過(guò)程中存在一些局限性,本研究擬從調(diào)控PD-L1表達(dá)的信號(hào)通路著手,嘗試降低腫瘤細(xì)胞細(xì)胞膜表面PD-L1的表達(dá)水平。整個(gè)課題分為以下六個(gè)部分:1)利用各信號(hào)通路抑制劑檢測(cè)各信號(hào)通路對(duì)PD-L1表達(dá)的調(diào)節(jié)作用;2)信號(hào)通路報(bào)告基因篩選體系的構(gòu)建;3)利用構(gòu)建的報(bào)告基因體系對(duì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：119 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. PD-1/PD-L1與T細(xì)胞腫瘤抑制的關(guān)系
        1.1 腫瘤的形成及危害
        1.2 T細(xì)胞及NK細(xì)胞對(duì)腫瘤的抑制作用
        1.3 PD-L1免疫檢查點(diǎn)
    2. 中醫(yī)藥抗癌研究
    3. 中藥與PD-L1的相關(guān)研究
第二章 前言
第三章 材料和方法
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 質(zhì)粒、菌株和細(xì)胞株
        1.2 試劑
        1.3 耗材
        1.4 儀器
        1.5 溶液配制
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 下調(diào)腫瘤細(xì)胞PD-L1表達(dá)的信號(hào)通路的篩選
        2.3 信號(hào)通路報(bào)告基因篩選體系的構(gòu)建
        2.4 篩選下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子STAT3的中藥單體
        2.5 流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞PD-L1的下調(diào)作用
        2.6 T細(xì)胞-腫瘤細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)
        2.7 中藥單體輔助裸鼠尾靜脈回輸CTL殺傷腫瘤
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1. 下調(diào)腫瘤細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞PD-L1表達(dá)的信號(hào)通路的篩選
        1.1 腫瘤細(xì)胞MDA-MB-231表面PD-L1表達(dá)量檢測(cè)
        1.2 下調(diào)腫瘤細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞PD-L1表達(dá)的信號(hào)通路的篩選
    2. 信號(hào)通路報(bào)告基因篩選體系的構(gòu)建
        2.1 STAT3轉(zhuǎn)錄因子報(bào)告基因篩選體系的構(gòu)建
        2.2 STAT1轉(zhuǎn)錄因子報(bào)告基因篩選體系的構(gòu)建
        2.3 ISRE(STAT1/2)轉(zhuǎn)錄因子報(bào)告基因篩選體系的構(gòu)建
        2.4 下調(diào)STAT3轉(zhuǎn)錄活性的中藥單體化合物的篩選
    3. 流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞PD-L1的下調(diào)作用
    4. T細(xì)胞-腫瘤細(xì)胞殺傷
        4.1 T細(xì)胞擴(kuò)增及驗(yàn)證
        4.2 雙功能抗體構(gòu)建
        4.3 T細(xì)胞-腫瘤細(xì)胞殺傷
    5. 中藥單體輔助裸鼠尾靜脈回輸CTL殺傷腫瘤
第五章 討論
第六章 結(jié)論
第七章 創(chuàng)新點(diǎn)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3930024