目的:骨質疏松藥物在發(fā)揮抗骨質疏松作用的同時往往會帶來一系列的不良反應,而靶向藥物的使用可以很好的降低不良反應的發(fā)生率。為此我們構建了一種具有靶向作用的依諾沙星緩釋體(下文統(tǒng)一簡稱緩釋體),并設計了一系列的實驗來驗證緩釋體對小鼠骨質丟失的影響。方法:1、通過將依諾沙星搭載在介孔二氧化硅納米顆粒,并嫁接ASP-8骨靶向基團,構建靶向依諾沙星緩釋體;然后測算緩釋體的依諾沙星釋放性能;2、通過CCK-8試驗驗證緩釋體的細胞毒性范圍;然后用不同濃度的緩釋體培養(yǎng)細胞,驗證緩釋體對破骨細胞增殖和分化的影響;3、通過構建小鼠骨質疏松模型,注射不同濃度緩釋體和依諾沙星粉末,并與對照組對比,驗證緩釋體對小鼠骨骼骨質丟失的作用;結果:1、緩釋體的依諾沙星釋放速率隨時間的推移逐漸減慢;2、緩釋體在濃度低于10ug/ml不產(chǎn)生細胞毒性,且能夠明顯的抑制破骨細胞增殖和分化;3、高劑量(8mg/kg)的緩釋體能夠明顯的抑制骨骼中骨質的丟失,并且不會對肝臟和腎臟產(chǎn)生毒性;結論:我們構建的緩釋體能夠顯著的抑制破骨細胞生成、分化,并且可以抑制小鼠骨骼骨質丟失。

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1：緩釋體的一般性能.A.原始二氧化硅納米顆粒電鏡下觀；B.緩釋體電鏡下觀；C.依諾沙星溶液的吸光度隨濃度變化；D.緩釋體依諾沙星釋放曲線；

第3章結果8第3章結果3.1依諾沙星緩釋性能圖1：緩釋體的一般性能.A.原始二氧化硅納米顆粒電鏡下觀；B.緩釋體電鏡下觀；C.依諾沙星溶液的吸光度隨濃度變化；D.緩釋體依諾沙星釋放曲線；二氧化硅納米顆粒在搭載PEG、依諾沙星后出現(xiàn)了徑粒減小，這可能是由于依諾沙星為疏水性藥物，在搭....

圖2：緩釋體抑制破骨細胞的增殖分化

第3章結果9為了排除緩釋體對破骨細胞前體細胞的毒性作用，我們進行了細胞毒性檢測。實驗統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明，在緩釋體濃度在10ug/ml或更高時，細胞吸光度出現(xiàn)了明顯的下降，而在濃度小于10ug/ml時吸光度沒有明顯的下降，證明在緩釋體濃度在10ug/ml及以上時會產(chǎn)生細胞毒性。所以在緩釋....

圖3:對小鼠股骨進行三維Micro-CT掃描，并分析骨質疏松有關參數(shù)

第3章結果103.3緩釋體對破骨細胞分化的影響我們的實驗驗證了緩釋體對破骨細胞分化影響（圖2）。在以8×103/孔的細胞密度在96孔板上培養(yǎng)骨髓巨噬細胞(BMMs)。以M-R培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，并加入不同濃度的緩釋體。在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6天，觀察到成熟的破骨細胞形成后進行TRAP染色。在....

圖4:對每個樣本的Micro-CT掃描結果進行三維重建

第3章結果12圖4:對每個樣本的Micro-CT掃描結果進行三維重建。（A）股骨矢狀面三維CT重建。（B）股骨下端骨小梁三維CT重建。（C）測量骨皮質骨礦物質密度（BMD）（**P<0.05）。（D）測量骨小梁骨礦物質密度（BMD）（**P<0.05）然后我們對所有小鼠的骨礦物質....

本文編號：3926028