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RNA-seq揭示骨髓間充質(zhì)干細胞調(diào)控蛛網(wǎng)膜下腔出血后小膠質(zhì)細胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥的潛在機制

發(fā)布時間:2024-02-07 03:35
  蛛網(wǎng)膜下腔出血(Subarachnoid Hemorrhage,SAH)是一種具有高致死率和高致殘率特點的腦血管疾病。小膠質(zhì)細胞作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的(Central Nervous System,CNS)固有免疫細胞,在SAH后通過釋放多種炎癥因子參與炎癥反應(yīng),因此,調(diào)節(jié)活化小膠質(zhì)細胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥成為SAH的潛在治療策略。最新研究表明,骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells,BM-MSCs)在SAH后可以調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細胞活化、抑制炎癥因子的產(chǎn)生,因此對SAH具有潛在治療作用。然而,BM-MSCs在SAH后調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細胞活化的具體機制尚不明確。因此,本研究采用氧合血紅蛋白(Oxyhemoglobin,OxyHb)刺激小鼠來源的BV2小膠質(zhì)細胞模擬SAH體外模型。第一部分研究BM-MSCs對OxyHb誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細胞活化的影響;第二部分探索BM-MSCs調(diào)節(jié)OxyHb誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細胞活化的具體機制。為BM-MSCs在將來SAH治療的臨床轉(zhuǎn)化提供實驗依據(jù)。一.BM-MSCs對OxyHb誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細胞活化的影響研...

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1BM-MSCs培養(yǎng)和鑒定Fig.1IsolationandCharacterizationofBM-MSCs

圖1BM-MSCs培養(yǎng)和鑒定Fig.1IsolationandCharacterizationofBM-MSCs

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文-20-結(jié)果1BM-MSCs培養(yǎng)和鑒定BM-MSCs從C57BL/6J小鼠骨髓中分離培養(yǎng)后,鏡下觀察可見第四代的BM-MSCs為貼壁狀態(tài)、外觀呈成纖維細胞樣(圖1A)。采用流式細胞術(shù)通過細胞表面抗原鑒定BM-MSCs純度,結(jié)果顯示,BM-MSCs陽性標記物....


圖2BM-MSCs共培養(yǎng)對OxyHb誘導(dǎo)的BV2細胞NO產(chǎn)生的影響

圖2BM-MSCs共培養(yǎng)對OxyHb誘導(dǎo)的BV2細胞NO產(chǎn)生的影響

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文-21-狀態(tài)[22-24]。結(jié)果表明,NO的釋放量同OxyHb對BV2細胞的刺激呈現(xiàn)時間依賴性的關(guān)系,且于24h時達到頂峰(圖2A),重要的是,相較于OxyHb組,OxyHb+BM-MSCs組可降低約30%的NO釋放量(圖2B)。此外,細胞形態(tài)觀察可見,c....


圖3BM-MSCs共培養(yǎng)調(diào)節(jié)OxyHb誘導(dǎo)的炎癥因子基因表達以及小膠質(zhì)細胞的極化

圖3BM-MSCs共培養(yǎng)調(diào)節(jié)OxyHb誘導(dǎo)的炎癥因子基因表達以及小膠質(zhì)細胞的極化

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文細胞M1型標記物CD16/32及M2型標記物CD206免疫熒光共染得到驗證。以上結(jié)果表明,BM-MSCs主要調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細胞M1極化,而非M2極化。


圖4GO分析與KEGG分析OxyHb組與OxyHb+BM-MSCs組差異表達基因

圖4GO分析與KEGG分析OxyHb組與OxyHb+BM-MSCs組差異表達基因

西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文-31-結(jié)果1BM-MSCs共培養(yǎng)對OxyHb刺激的BV2小膠質(zhì)細胞內(nèi)炎癥反應(yīng)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄組表達的影響本研究進一步采用RNA-seq測序方法,深入探索BM-MSCs調(diào)節(jié)OxyHb誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細胞活化的潛在機制,進而確定OxyHb組和OxyHb+BM-M....



本文編號:3896693

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