目的:探討過表達(dá)hnRNPAB亞型(A2/B1)對(duì)人結(jié)直腸癌“干性”及部分惡性生物學(xué)行為的影響,并探討其分子機(jī)制。方法:利用過表達(dá)hnRNPAB亞型(A2/B1)基因的慢病毒載體hnRNPA2/B1-GFP-LV以及陰性對(duì)照病毒NC-GFP-LV轉(zhuǎn)染人結(jié)直腸癌細(xì)胞株SW480和HT29細(xì)胞,從而建立實(shí)驗(yàn)組(既SW480/hnRNPA2/B1、HT29/hnRNPA2/B1)與對(duì)照組(SW480-NC、HT29-NC)。將各組細(xì)胞進(jìn)行作以下4個(gè)方面的檢測(cè):(1)驗(yàn)證兩組細(xì)胞中hnRNPA2/B1過表達(dá)效果:(1)通過RT-qPCR技術(shù)檢測(cè)hnRNPA2/B1 mRNA相對(duì)表達(dá)量;(2)Western blot技術(shù)檢測(cè)hnRNPAB亞型(A2/B1)蛋白的表達(dá);(2)腫瘤干細(xì)胞特性檢測(cè):(1)平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤克隆形成能力。(2)裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤體內(nèi)成瘤能力。(3)流式技術(shù)檢測(cè)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133、CD44。(3)其他惡性生物學(xué)行為的檢測(cè):(1)Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤侵襲能力(2)劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤遷移能力(3)CCK8法檢測(cè)腫瘤增殖能力。(4)Western blo...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

圖1SW480轉(zhuǎn)染過表達(dá)病毒組，明視野（100×）

圖2HT29轉(zhuǎn)染過表達(dá)病毒組，明視野（100×）

圖3RT-qPCR檢測(cè)兩組細(xì)胞hnRNPA2/B1mRNA表達(dá)水平；與SW480-NC、HT29-NC組比較，**P<0.01

圖4westernblot檢測(cè)兩組hnRNPA2/B1蛋白表達(dá)；與對(duì)照組組比較，**P<0.01

本文編號(hào)：3883760