發(fā)布時間：2023-04-26 19:32

　　目的:以無柄靈芝菌液體發(fā)酵黨參水提物以期產(chǎn)生黨參中原來沒有的具有抗腫瘤活性的化合物,分離該化合物,提取該菌的胞內(nèi)、胞外酶驗證該生物催化反應,并檢測化合物對腫瘤細胞的增殖抑制活性,探索其可能的作用機制,評估該化合物的急性毒性,為研發(fā)具有抗腫瘤活性的先導化合物提供一定的實驗依據(jù)。方法:采用無柄靈芝菌對黨參水提物發(fā)酵7天,超高效液相色譜(UPLC)檢測發(fā)酵前后黨參水提物的成分變化,超高效制備液相色譜分離(Pre-UPLC)該變化組分,UPLC檢測分離到的化合物純度,利用質譜、核磁共振氫譜、核磁共振碳譜鑒定化合物的結構;發(fā)酵液離心得到的上清液作為胞外酶液,采用低溫超聲結合勻漿的方法提取無柄靈芝菌的胞內(nèi)酶,以發(fā)酵前的化合物為底物進行生物催化;通過對催化時間,底物量,酶量的優(yōu)化,得到最適的轉化條件;通過細胞計數(shù)-8試劑盒(CCK-8)和噻唑藍(MTT)法檢測化合物對人神經(jīng)母細胞瘤(SH-SY5Y)、人結直腸癌細胞(HCT-8)、人肺癌細胞(A549)和人胃癌細胞(SGC-7901)細胞的增殖抑制作用,篩選出半抑制濃度(IC₅₀)最低的化合物和敏感細胞系;利用流式細胞儀檢測化合...

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 無柄靈芝菌發(fā)酵黨參成分變化
    材料與方法
    結果
    討論
    小結
第二章 無柄靈芝菌粗酶液催化5-羥甲基糠醛生成2,5-二甲醇呋喃
    材料與方法
    結果
    討論
    小結
第三章 2,5-二甲醇呋喃對SH-SY5Y細胞增殖和凋亡影響
    材料與方法
    結果
    討論
    小結
第四章 5-羥甲基糠醛和2,5-二甲醇呋喃的急性毒性
    材料與方法
    結果
    討論
    小結
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
致謝
作者簡介



本文編號：3802089