目的:以無(wú)柄靈芝菌液體發(fā)酵黨參水提物以期產(chǎn)生黨參中原來(lái)沒(méi)有的具有抗腫瘤活性的化合物,分離該化合物,提取該菌的胞內(nèi)、胞外酶驗(yàn)證該生物催化反應(yīng),并檢測(cè)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖抑制活性,探索其可能的作用機(jī)制,評(píng)估該化合物的急性毒性,為研發(fā)具有抗腫瘤活性的先導(dǎo)化合物提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:采用無(wú)柄靈芝菌對(duì)黨參水提物發(fā)酵7天,超高效液相色譜(UPLC)檢測(cè)發(fā)酵前后黨參水提物的成分變化,超高效制備液相色譜分離(Pre-UPLC)該變化組分,UPLC檢測(cè)分離到的化合物純度,利用質(zhì)譜、核磁共振氫譜、核磁共振碳譜鑒定化合物的結(jié)構(gòu);發(fā)酵液離心得到的上清液作為胞外酶液,采用低溫超聲結(jié)合勻漿的方法提取無(wú)柄靈芝菌的胞內(nèi)酶,以發(fā)酵前的化合物為底物進(jìn)行生物催化;通過(guò)對(duì)催化時(shí)間,底物量,酶量的優(yōu)化,得到最適的轉(zhuǎn)化條件;通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)-8試劑盒(CCK-8)和噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)化合物對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤(SH-SY5Y)、人結(jié)直腸癌細(xì)胞(HCT-8)、人肺癌細(xì)胞(A549)和人胃癌細(xì)胞(SGC-7901)細(xì)胞的增殖抑制作用,篩選出半抑制濃度(IC₅₀)最低的化合物和敏感細(xì)胞系;利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)化合...

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 無(wú)柄靈芝菌發(fā)酵黨參成分變化
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
第二章 無(wú)柄靈芝菌粗酶液催化5-羥甲基糠醛生成2,5-二甲醇呋喃
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
第三章 2,5-二甲醇呋喃對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞增殖和凋亡影響
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
第四章 5-羥甲基糠醛和2,5-二甲醇呋喃的急性毒性
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3802089