目的通過(guò)體外分離培養(yǎng)胎鼠神經(jīng)干細(xì)胞(Neural Stem Cells,NSCs),研究生長(zhǎng)分化因子11(Growth Differentiation Factor 11,GDF11)對(duì)其增殖的影響,并通過(guò)對(duì)Smad2/3,Smad4及β-Catenin等蛋白表達(dá)的檢測(cè)探討GDF11對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)/Smads信號(hào)通路和Wnt/β-Catenin信號(hào)通路的調(diào)控作用。方法提取孕14天的CD1胎鼠大腦側(cè)腦室下區(qū)(Subventricular Zone,SVZ)的神經(jīng)干細(xì)胞并傳代培養(yǎng)。采用免疫熒光法檢測(cè)巢蛋白(Nestin)、SOX2蛋白的表達(dá)以及在誘導(dǎo)分化后鑒定Neu N和GFAP蛋白的表達(dá)來(lái)鑒定所提取細(xì)胞。CCK-8法按一定濃度梯度初步研究GDF11對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖的影響并確定后續(xù)實(shí)驗(yàn)濃度。取第三代處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組添加GDF11蛋白(終濃度50ng/ml),對(duì)照組添加等體積培養(yǎng)液。Ed U法檢測(cè)兩組細(xì)胞增殖情況,然后于蛋白添加后1h和6h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)使用蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western Blotting,WB)檢測(cè)Smad2/3...

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
1 前言
2 資料與方法
3 結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3781935