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生長分化因子11對小鼠神經(jīng)干細胞增殖及TGF-β/Smads和Wnt/β-Catenin信號通路的影響

發(fā)布時間:2023-04-04 10:40
  目的通過體外分離培養(yǎng)胎鼠神經(jīng)干細胞(Neural Stem Cells,NSCs),研究生長分化因子11(Growth Differentiation Factor 11,GDF11)對其增殖的影響,并通過對Smad2/3,Smad4及β-Catenin等蛋白表達的檢測探討GDF11對神經(jīng)干細胞中轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)/Smads信號通路和Wnt/β-Catenin信號通路的調(diào)控作用。方法提取孕14天的CD1胎鼠大腦側(cè)腦室下區(qū)(Subventricular Zone,SVZ)的神經(jīng)干細胞并傳代培養(yǎng)。采用免疫熒光法檢測巢蛋白(Nestin)、SOX2蛋白的表達以及在誘導分化后鑒定Neu N和GFAP蛋白的表達來鑒定所提取細胞。CCK-8法按一定濃度梯度初步研究GDF11對神經(jīng)干細胞增殖的影響并確定后續(xù)實驗濃度。取第三代處于對數(shù)生長期的細胞隨機分為實驗組和對照組,實驗組添加GDF11蛋白(終濃度50ng/ml),對照組添加等體積培養(yǎng)液。Ed U法檢測兩組細胞增殖情況,然后于蛋白添加后1h和6h兩個時間點使用蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western Blotting,WB)檢測Smad2/3...

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學位級別】:碩士

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摘要
Abstract
1 前言
2 資料與方法
3 結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻



本文編號:3781935

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