目的:研究表明,miRNA參與結(jié)直腸癌增殖、轉(zhuǎn)移等多個(gè)重要生物學(xué)過(guò)程。前期課題組對(duì)結(jié)直腸癌臨床標(biāo)本和細(xì)胞株進(jìn)行了檢測(cè),發(fā)現(xiàn)miR-581在結(jié)直腸細(xì)胞株中差異表達(dá),且在轉(zhuǎn)移性較強(qiáng)的細(xì)胞株（SW620）中的表達(dá)水平明顯低于原位癌細(xì)胞株（SW480）。本研究從動(dòng)物水平出發(fā),構(gòu)建并篩選穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的結(jié)直腸癌細(xì)胞株,建立裸鼠結(jié)直腸癌皮下移植瘤模型及尾靜脈注射轉(zhuǎn)移模型,體內(nèi)驗(yàn)證miR-581對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖能力的影響并通過(guò)活體成像系統(tǒng)間接反映miR-581影響結(jié)直腸癌細(xì)胞株體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移的能力。采用有參考基因組轉(zhuǎn)錄組測(cè)序預(yù)測(cè)并實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-581可能參與調(diào)控結(jié)直腸癌細(xì)胞發(fā)生發(fā)展的信號(hào)通路。方法:1.構(gòu)建熒光素酶標(biāo)記的結(jié)直腸癌穩(wěn)轉(zhuǎn)株SW480（miR-581-NC-Luc,miR-581-KD-Luc）和SW620（miR-581-NC-Luc,miR-581-OE-Luc）:首先用熒光素酶感染慢病毒,穩(wěn)定表達(dá)熒光信號(hào)的病毒在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期感染細(xì)胞SW480和SW620;胰酶消化并完全培養(yǎng),以形成細(xì)胞數(shù)為5×10~4個(gè)/mL癌細(xì)胞懸液,并將相應(yīng)的細(xì)胞數(shù)接種到6孔培養(yǎng)板中繼續(xù)培養(yǎng)。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果... 

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 miR-581對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 熒光活體成像動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)miR-581對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞體內(nèi)轉(zhuǎn)移的影響
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第三部分 miR-581 經(jīng)由ECM/ITGA/PI3K/AKT信號(hào)通路調(diào)控結(jié)直腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制研究
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3721397