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Omentin-1對H 2 O 2 誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-22 14:50
  背景:缺血性腦損傷是由于局部腦組織血供受阻,導(dǎo)致不可逆性的神經(jīng)功能缺損甚至死亡的疾病。在全世界,它是成人第一大致殘?jiān)蚝偷诙笾滤涝。國?nèi)外學(xué)者每年都投入了大量的人力和物力來研究其防治及改善預(yù)后的方法,但及時(shí)有效的防治及預(yù)后的方法仍然有限。腦缺血缺氧可引起氧化應(yīng)激(OS),OS可破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)及DNA,Caspase-3被激活,從而促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,并參與缺血性腦損傷的發(fā)病機(jī)制中。因此,預(yù)防氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞凋亡是治療缺血性腦損傷的重要策略。Omentin-1是一種新發(fā)現(xiàn)的脂肪因子,很多研究發(fā)現(xiàn)循環(huán)omentin-1在各種疾病的病理生理過程中發(fā)揮重要調(diào)控作用,并具有抗炎、抗氧化、抗凋亡等作用。Omentin-1可能成為判斷急性缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)及嚴(yán)重程度的生物指標(biāo),近來體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)omentin-1不僅能夠抑制缺血后心肌細(xì)胞凋亡,還能抑制缺血后神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡。但是omentin-1對缺血性腦損傷中氧化應(yīng)激誘導(dǎo)凋亡的影響尚不清楚,因此本研究探討了omentin-1對H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響。將為本課題的下一步... 

【文章來源】:延安大學(xué)陜西省

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 主要細(xì)胞
    2.2 主要試劑
    2.3 主要儀器
    2.4 主要試劑的配制
第二章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 PC12細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.1 PC12細(xì)胞的復(fù)蘇
        3.1.2 細(xì)胞換液
        3.1.3 細(xì)胞傳代
        3.1.4 細(xì)胞凍存
    3.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)法
        3.2.1 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.2.2 計(jì)算公式
    3.3 過氧化氫損傷PC12細(xì)胞模型的構(gòu)建
        3.3.1 CCK-8的實(shí)驗(yàn)原理
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)步驟
    3.4 CCK-8法檢測不同濃度梯度omentin-1對PC12細(xì)胞生存的影響
    3.5 不同濃度omentin-1預(yù)處理1 h對過氧化氫H_2O_2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷后的影響
        3.5.1 CCK-8法檢測各組細(xì)胞活力
        3.5.2 TUNEL法檢測各組細(xì)胞凋亡情況
    3.6 活性氧ROS的檢測
    3.7 提取各組細(xì)胞總蛋白
    3.8 Western blotting 法檢測各組Bcl-2、Caspase-3、Bax蛋白的表達(dá)水平
        3.8.1 實(shí)驗(yàn)原理
        3.8.2 實(shí)驗(yàn)步驟
    3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
    4.1 H_2O_2損傷PC12細(xì)胞模型的建立
        4.1.1 過氧化氫對PC12細(xì)胞形態(tài)的影響
        4.1.2 不同濃度H_2O_2對PC12細(xì)胞存活率的影響
    4.2 不同濃度omentin-1預(yù)處理對H_2O_2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷后細(xì)胞活力的影響
        4.2.1 不同濃度omentin-1預(yù)處理對H_2O_2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷后細(xì)胞形態(tài)的變化
        4.2.2 不同濃度omentin-1處理不同時(shí)間對PC12的細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用
        4.2.3 CCK-8法檢測不同濃度omentin-1預(yù)處理對H_2O_2損傷的PC12細(xì)胞生存的影響
        4.2.4 TUNEL法檢測不同濃度omentin-1預(yù)處理對H_2O_2損傷PC12細(xì)胞凋亡的影響
    4.4 各組細(xì)胞活性氧ROS的檢測
    4.5 Omentin-1處理后各組Bcl-2、Caspase-3、Bax凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)量
        4.5.1 Omentin-1 對 H_2O_2 損傷 PC12 細(xì)胞后 Bcl-2、Caspase-3、Bax 凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)。
        4.5.2 Omentin-1對PC12細(xì)胞Bcl-2、Caspase-3、Bax凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]阿爾茨海默病與氧化應(yīng)激的研究進(jìn)展[J]. 方威,胡國章,劉乃杰.  中國老年學(xué)雜志. 2017(20)
[4]網(wǎng)膜素改善氧化應(yīng)激對人動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞Ⅰ、Ⅳ型膠原表達(dá)的抑制作用[J]. 鄭輝,劉慧娟,葛煥琦,張春風(fēng),胡睿,李雪粉.  中國動(dòng)脈硬化雜志. 2016(02)
[5]常見缺血性卒中發(fā)病機(jī)制和病理學(xué)特點(diǎn)[J]. 盧德宏,付永娟.  中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志. 2015(02)
[6]丙酮酸對過氧化氫誘發(fā)PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 安麗榮,郭艷芹,金連弘,傅松斌.  中國老年學(xué)雜志. 2009(13)
[7]缺氧缺血性腦損傷的發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 謝集建.  國外醫(yī)學(xué).婦幼保健分冊. 2002(01)



本文編號:3639668

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