目的:針對慢性創(chuàng)面發(fā)生機(jī)制的研究已成為臨床研究的熱點(diǎn)之一,局部組織的缺血缺氧為大多數(shù)慢性創(chuàng)面的這一共同特點(diǎn)被眾多學(xué)者普遍接受;目前在動(dòng)物體表人為進(jìn)行皮瓣的設(shè)計(jì)和切取,改變創(chuàng)面的局部血供模式,已經(jīng)被證實(shí)是制備缺血缺氧創(chuàng)面動(dòng)物模型的經(jīng)典且有效方法。本研究對目前廣泛采用的“大鼠背雙蒂皮瓣模型”進(jìn)行改良,力求探索一種更為突出的缺血缺氧特征,且制備方法更加簡便的大鼠缺血缺氧創(chuàng)面模型,為基于動(dòng)物模型的研究提供多一種選擇。方法:通過對SD雄鼠采用傳統(tǒng)背側(cè)矩形雙蒂皮瓣法建立缺血缺氧創(chuàng)面模型,并完全離斷皮瓣淺筋膜層和由深筋膜層之間所有垂直發(fā)出的血管穿支,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)不同特性隨機(jī)分為4組:A組,經(jīng)典單個(gè)創(chuàng)面且創(chuàng)基淺筋膜保留組;B組,經(jīng)典單個(gè)創(chuàng)面且創(chuàng)基淺筋膜去除組;C組,改良三創(chuàng)面(C_頭、C_中、C_尾)創(chuàng)基淺筋膜保留組;D組,改良三創(chuàng)面(D_頭、D_中、D_尾)創(chuàng)基淺筋膜去除組。觀察各組創(chuàng)面愈合情況;通過HE和Masson染色進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)研究,以及免疫組織化學(xué)法對創(chuàng)面中HIF-1α、C... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠背部皮瓣血供.a.c.示胸背動(dòng)脈，b.示頂支，d,g,示肋間后動(dòng)脈，e,f,示旋髂深動(dòng)脈，這些血管進(jìn)入鼠背部后在深筋膜與淺筋膜間交匯形成毛細(xì)血管網(wǎng)

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文劉梅君12旋髂深動(dòng)脈、雙側(cè)胸背動(dòng)脈發(fā)出的頂支在淺筋膜層內(nèi)的形成的鏈狀鏈接，以及各穿支發(fā)出的深入真皮下形成的終末毛細(xì)血管網(wǎng)（圖2）。圖2：動(dòng)物模型的制備A.離斷皮瓣下方深筋膜層與淺筋膜層間的所有穿支，B.完全抬高皮瓣，持針器夾持為深筋膜。上述操作完成后隨機(jī)將所有實(shí)驗(yàn)大鼠分為4組，每組8只：A組，經(jīng)典單個(gè)全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜保留組，即于皮瓣正中央去除全層皮膚組織，形成直徑為1cm圓形創(chuàng)面，保留創(chuàng)面基底淺筋膜；B組，經(jīng)典單個(gè)全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜去除組，即于皮瓣正中央去除全層皮膚組織，形成直徑為1cm圓形創(chuàng)面，同時(shí)去除創(chuàng)面基底淺筋膜；C組，改良三個(gè)全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜保留組，即在A組的操作基礎(chǔ)上，頭尾兩端，距創(chuàng)面邊緣2cm分別等距離再形成兩個(gè)同樣大小全層皮膚缺損創(chuàng)面，即形成3個(gè)相同直徑為1cm圓形創(chuàng)面，均保留創(chuàng)面基底淺筋膜，從大鼠頭端至尾端分別命名為，C頭、C中、C尾組；D組，改良三創(chuàng)面全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜去除組，在C組的基礎(chǔ)上完成3個(gè)直徑為1cm圓形創(chuàng)面后，均去除各個(gè)創(chuàng)面基底淺筋膜，從大鼠頭端至尾端分別命名為D頭、D中、D尾組。各組模型制備完成后，雙蒂皮瓣長軸邊緣各等間距，予以4-0絲線全層間斷縫合固定（圖3），再次消毒后醫(yī)用紗布覆蓋，做好明顯區(qū)分標(biāo)記。建模完成后為防止大鼠相互搔抓、撕咬，從而對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，故所有實(shí)驗(yàn)大鼠均予以單籠相同條件下獨(dú)立飼養(yǎng)。

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文劉梅君13圖3：四組模型建立完成，依次為A、B、C、D四組，圖C各創(chuàng)面由上至下依次標(biāo)記為C頭、C中、C尾組，圖D各創(chuàng)面由上至下依次標(biāo)記為D頭、D中、D尾組。1.4.2創(chuàng)面愈合情況觀察及評估實(shí)驗(yàn)大鼠模型制備完成后，從術(shù)后第1、5、9、13、17、21天觀察創(chuàng)面愈合情況，并使用直角傷口尺放置于創(chuàng)緣進(jìn)行拍照記錄。實(shí)驗(yàn)采取雙盲設(shè)計(jì)，故由課題組未參與動(dòng)物模型制備的人員測量創(chuàng)面并記錄，使用ImageJ軟件計(jì)算剩余未愈合創(chuàng)面面積，計(jì)算比較不同組別創(chuàng)面愈合率及其愈合快慢趨勢。持續(xù)觀察直至所有創(chuàng)面均完成愈合，并詳細(xì)記錄所有創(chuàng)面愈合所需要的時(shí)間（單位/天）。1.4.3缺血缺氧創(chuàng)面組織取材考慮到各組模型多創(chuàng)面愈合時(shí)間先后順序不同，分別于術(shù)后A組所有創(chuàng)面完全愈合時(shí)（T1）、B組創(chuàng)面完全愈合時(shí)（T2）以及C組所有創(chuàng)面中出現(xiàn)愈合創(chuàng)面時(shí)（T3）三個(gè)特定時(shí)間點(diǎn)，在圓形創(chuàng)面于大鼠長軸平行的3點(diǎn)及9點(diǎn)鐘方向，距離創(chuàng)緣5mm為頂點(diǎn)，楔形切取涵蓋已愈合創(chuàng)面區(qū)域內(nèi)的組織塊（圖4），生理鹽水反復(fù)沖洗，濾紙吸干后，4%中性甲醛內(nèi)固定48h后進(jìn)行石蠟包埋，切片機(jī)切片，全程做好標(biāo)記。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同類型瘢痕中HIF-1α的表達(dá)及其炎性因子的相關(guān)性分析[J]. 張明子,王晨羽,管恩玲,陳志雄,龍飛,俞楠澤,斯樓斌,黃久佐,龍笑,王曉軍.  中國美容整形外科雜志. 2017(06)
[2]大鼠背部穿支體區(qū)間choke血管變化規(guī)律初探[J]. 胡斯旺,莊躍宏,崔懷瑞,黃美賢,唐茂林,徐達(dá)傳.  中國臨床解剖學(xué)雜志. 2014(05)
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