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改良大鼠缺血缺氧創(chuàng)面模型的實驗研究

發(fā)布時間:2022-01-21 16:48
  目的:針對慢性創(chuàng)面發(fā)生機制的研究已成為臨床研究的熱點之一,局部組織的缺血缺氧為大多數(shù)慢性創(chuàng)面的這一共同特點被眾多學者普遍接受;目前在動物體表人為進行皮瓣的設計和切取,改變創(chuàng)面的局部血供模式,已經被證實是制備缺血缺氧創(chuàng)面動物模型的經典且有效方法。本研究對目前廣泛采用的“大鼠背雙蒂皮瓣模型”進行改良,力求探索一種更為突出的缺血缺氧特征,且制備方法更加簡便的大鼠缺血缺氧創(chuàng)面模型,為基于動物模型的研究提供多一種選擇。方法:通過對SD雄鼠采用傳統(tǒng)背側矩形雙蒂皮瓣法建立缺血缺氧創(chuàng)面模型,并完全離斷皮瓣淺筋膜層和由深筋膜層之間所有垂直發(fā)出的血管穿支,并根據(jù)實驗不同特性隨機分為4組:A組,經典單個創(chuàng)面且創(chuàng)基淺筋膜保留組;B組,經典單個創(chuàng)面且創(chuàng)基淺筋膜去除組;C組,改良三創(chuàng)面(C頭、C中、C)創(chuàng)基淺筋膜保留組;D組,改良三創(chuàng)面(D頭、D中、D)創(chuàng)基淺筋膜去除組。觀察各組創(chuàng)面愈合情況;通過HE和Masson染色進行組織形態(tài)學研究,以及免疫組織化學法對創(chuàng)面中HIF-1α、C... 

【文章來源】:遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

改良大鼠缺血缺氧創(chuàng)面模型的實驗研究


大鼠背部皮瓣血供.a.c.示胸背動脈,b.示頂支,d,g,示肋間后動脈,e,f,示旋髂深動脈,這些血管進入鼠背部后在深筋膜與淺筋膜間交匯形成毛細血管網(wǎng)

筋膜,穿支,深筋膜,皮瓣


遵義醫(yī)科大學碩士學位論文劉梅君12旋髂深動脈、雙側胸背動脈發(fā)出的頂支在淺筋膜層內的形成的鏈狀鏈接,以及各穿支發(fā)出的深入真皮下形成的終末毛細血管網(wǎng)(圖2)。圖2:動物模型的制備A.離斷皮瓣下方深筋膜層與淺筋膜層間的所有穿支,B.完全抬高皮瓣,持針器夾持為深筋膜。上述操作完成后隨機將所有實驗大鼠分為4組,每組8只:A組,經典單個全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜保留組,即于皮瓣正中央去除全層皮膚組織,形成直徑為1cm圓形創(chuàng)面,保留創(chuàng)面基底淺筋膜;B組,經典單個全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜去除組,即于皮瓣正中央去除全層皮膚組織,形成直徑為1cm圓形創(chuàng)面,同時去除創(chuàng)面基底淺筋膜;C組,改良三個全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜保留組,即在A組的操作基礎上,頭尾兩端,距創(chuàng)面邊緣2cm分別等距離再形成兩個同樣大小全層皮膚缺損創(chuàng)面,即形成3個相同直徑為1cm圓形創(chuàng)面,均保留創(chuàng)面基底淺筋膜,從大鼠頭端至尾端分別命名為,C頭、C中、C尾組;D組,改良三創(chuàng)面全層皮膚缺損創(chuàng)面淺筋膜去除組,在C組的基礎上完成3個直徑為1cm圓形創(chuàng)面后,均去除各個創(chuàng)面基底淺筋膜,從大鼠頭端至尾端分別命名為D頭、D中、D尾組。各組模型制備完成后,雙蒂皮瓣長軸邊緣各等間距,予以4-0絲線全層間斷縫合固定(圖3),再次消毒后醫(yī)用紗布覆蓋,做好明顯區(qū)分標記。建模完成后為防止大鼠相互搔抓、撕咬,從而對實驗結果產生影響,故所有實驗大鼠均予以單籠相同條件下獨立飼養(yǎng)。

創(chuàng)面,模型建立


遵義醫(yī)科大學碩士學位論文劉梅君13圖3:四組模型建立完成,依次為A、B、C、D四組,圖C各創(chuàng)面由上至下依次標記為C頭、C中、C尾組,圖D各創(chuàng)面由上至下依次標記為D頭、D中、D尾組。1.4.2創(chuàng)面愈合情況觀察及評估實驗大鼠模型制備完成后,從術后第1、5、9、13、17、21天觀察創(chuàng)面愈合情況,并使用直角傷口尺放置于創(chuàng)緣進行拍照記錄。實驗采取雙盲設計,故由課題組未參與動物模型制備的人員測量創(chuàng)面并記錄,使用ImageJ軟件計算剩余未愈合創(chuàng)面面積,計算比較不同組別創(chuàng)面愈合率及其愈合快慢趨勢。持續(xù)觀察直至所有創(chuàng)面均完成愈合,并詳細記錄所有創(chuàng)面愈合所需要的時間(單位/天)。1.4.3缺血缺氧創(chuàng)面組織取材考慮到各組模型多創(chuàng)面愈合時間先后順序不同,分別于術后A組所有創(chuàng)面完全愈合時(T1)、B組創(chuàng)面完全愈合時(T2)以及C組所有創(chuàng)面中出現(xiàn)愈合創(chuàng)面時(T3)三個特定時間點,在圓形創(chuàng)面于大鼠長軸平行的3點及9點鐘方向,距離創(chuàng)緣5mm為頂點,楔形切取涵蓋已愈合創(chuàng)面區(qū)域內的組織塊(圖4),生理鹽水反復沖洗,濾紙吸干后,4%中性甲醛內固定48h后進行石蠟包埋,切片機切片,全程做好標記。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]不同類型瘢痕中HIF-1α的表達及其炎性因子的相關性分析[J]. 張明子,王晨羽,管恩玲,陳志雄,龍飛,俞楠澤,斯樓斌,黃久佐,龍笑,王曉軍.  中國美容整形外科雜志. 2017(06)
[2]大鼠背部穿支體區(qū)間choke血管變化規(guī)律初探[J]. 胡斯旺,莊躍宏,崔懷瑞,黃美賢,唐茂林,徐達傳.  中國臨床解剖學雜志. 2014(05)
[3]醫(yī)學科學研究中實驗動物的選擇和應用[J]. 施新猷.  上海實驗動物科學. 1984(01)



本文編號:3600625

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