目的:研究脂肪干細胞（Adipose-derived stem cells,ADSCs）聯(lián)合緩釋轉(zhuǎn)化生長因子-β₁（Transforming growth factor-beta1,TGF-β₁）的羥基磷灰石（Hydroxyapatite,HA）納米微球/明膠海綿復合支架構建ADSCs-HA納米微球復合物修復兔膝關節(jié)創(chuàng)傷性軟骨缺損的效果。方法:（1）制備載有細胞因子TGF-β₁的HA納米微球,電鏡分析其微觀形貌,通過模擬體液的浸泡實驗檢測TGF-β₁的緩釋濃度及持續(xù)時間。（2）從3月齡新西蘭大白兔的脂肪組織提取ADSCs,傳代培養(yǎng),觀察細胞形態(tài)及流式細胞儀鑒定。（3）將HA納米微球附著可吸收明膠海綿內(nèi)構建HA納米微球/明膠海綿復合支架,取第3代ADSCs以1×10⁵個細胞/mL的濃度接種HA納米微球/明膠海綿復合支架共培養(yǎng),構建ADSCs-HA納米微球復合物,行MTT檢測及電鏡觀察。（4）選用18只3月齡的雌性新西蘭大白兔制作兔膝關節(jié)創(chuàng)傷性軟骨缺損動物模型:用電鉆在股骨髁間滑車... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

納米微球掃描電鏡結果

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文王哲203.1.2納米微球體外緩釋將TGF-β1放于二氯甲烷，充分攪拌至完全溶解配制成標品溶液中，把上文提到的5個梯度用酶標儀，在450nm波長處測定其吸光度值，OD值(Y)與濃度(X)呈良好線性關系（見圖2）。求得回歸方程為：Y=0.11+0.0019X,R2=0.999。圖2TGF-β1濃度與吸光度值的標準曲線將待測定的上清液加到ELISA檢測板中，測定其450nm處OD值，代入上述回歸方程，得出樣品中釋放的TGF-β1濃度。由圖3可見，TGF-β1僅在第1天內(nèi)出現(xiàn)一過性釋放量大，考慮為微球表面的生長因子快速溶解所致。3天之后微球內(nèi)TGF-β1進入緩釋狀態(tài)，到15天后釋藥速度逐漸趨于平穩(wěn)，緩釋時間至少可持續(xù)29天。圖3HA納米微球體外釋放TGF-β1濃度曲線

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文王哲203.1.2納米微球體外緩釋將TGF-β1放于二氯甲烷，充分攪拌至完全溶解配制成標品溶液中，把上文提到的5個梯度用酶標儀，在450nm波長處測定其吸光度值，OD值(Y)與濃度(X)呈良好線性關系（見圖2）。求得回歸方程為：Y=0.11+0.0019X,R2=0.999。圖2TGF-β1濃度與吸光度值的標準曲線將待測定的上清液加到ELISA檢測板中，測定其450nm處OD值，代入上述回歸方程，得出樣品中釋放的TGF-β1濃度。由圖3可見，TGF-β1僅在第1天內(nèi)出現(xiàn)一過性釋放量大，考慮為微球表面的生長因子快速溶解所致。3天之后微球內(nèi)TGF-β1進入緩釋狀態(tài)，到15天后釋藥速度逐漸趨于平穩(wěn)，緩釋時間至少可持續(xù)29天。圖3HA納米微球體外釋放TGF-β1濃度曲線

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3596601