目的:研究金釵石斛生物堿（Dendrobium nobile Lindl.Alkaloids,DNLA）通過表觀修飾機(jī)制改善雌性APP/PS1小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的作用方法:7月齡SPF級(jí)雌性APP/PS1小鼠隨機(jī)分成3組:APP/PS1組（APP/PS1+vehicle）,DNLA低劑量組（10mg/kg）和DNLA高劑量組（20mg/kg）。同源同月齡同性別Wild Type小鼠作為正常對(duì)照組。DNLA組每天一次灌胃1%吐溫80的雙蒸水（v/v）為溶媒配制的金釵石斛生物堿,正常對(duì)照組及APP/PS1組給予同體積溶媒,連續(xù)灌胃4個(gè)月。給藥結(jié)束前,采用新物體識(shí)別和Y迷宮實(shí)驗(yàn)分別評(píng)價(jià)小鼠物體識(shí)別記憶和空間記憶能力;H&E和尼氏染色觀察皮質(zhì)形態(tài)學(xué)變化及神經(jīng)元損傷情況;免疫熒光檢測(cè)小鼠皮層Aβ_1-42沉積情況;Western blot檢測(cè)Aβ_1-42、DNMT1、DNMT3A、HDAC2、HDAC3及HDAC6蛋白水平;ELISA檢測(cè)皮層總DNA甲基化水平。結(jié)果:與正常對(duì)照組相比,APP/PS1組小鼠探索新物體時(shí)間占總時(shí)間百分比下降,Y迷宮自主... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DNLA對(duì)APP/PS1小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的的影響

遵義醫(yī)科大學(xué)研究生論文賀希162.2DNLA對(duì)APP/PS1小鼠皮層形態(tài)學(xué)的影響2.2.1DNLA對(duì)APP/PS1小鼠皮層組織病理形態(tài)的影響采用H&E染色觀察APP/PS1小鼠皮層組織的病理變化。如圖2所示，與WildType小鼠相比，APP/PS1小鼠皮層組織神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生明顯變化，結(jié)構(gòu)紊亂，神經(jīng)元染色異常，核固縮，可見明顯的炎性斑塊；DNLA給藥后4個(gè)月后小鼠皮層異常的神經(jīng)元數(shù)量減少，炎性斑塊面積及數(shù)量減少，提示DNLA能夠改善APP/PS1小鼠皮層神經(jīng)元的病理損傷。圖2DNLA對(duì)APP/PS1小鼠皮層組織神經(jīng)元的影響。（標(biāo)尺=50μm）Fig.2.EffectofDNLAonneuronmorphologychangeincortexofAPP/PS1mice.(scalebar=50μm)2.2.2DNLA對(duì)APP/PS1小鼠皮層神經(jīng)元數(shù)量的影響此外，用尼氏染色觀察APP/PS1小鼠皮層神經(jīng)元丟失情況。尼氏體是神經(jīng)元胞體或樹突內(nèi)較大的嗜堿性團(tuán)塊或顆粒，尼氏體的數(shù)量反應(yīng)神經(jīng)元的功能狀態(tài)。如圖3A所示，APP/PS1小鼠皮層神經(jīng)元排列稀疏不規(guī)則，神經(jīng)元數(shù)量降低（P<0.05）給予DNLA20mg/kg治療后4個(gè)月后神經(jīng)元丟失情況得到改善（P<0.05），提示DNLA具有保護(hù)神經(jīng)元的作用。

遵義醫(yī)科大學(xué)研究生論文賀希17圖3DNLA對(duì)APP/PS1小鼠皮層神經(jīng)元數(shù)量的影響。A：皮層神經(jīng)元尼氏染色情況(標(biāo)尺=50μm)；B：皮質(zhì)神經(jīng)元數(shù)量。（±SD,n=3）與WildType小鼠比，#P<0.05；與APP/PS1小鼠組比，P<0.05。Fig.3.EffectsofDNLAonthenumberofcorticalneuronsinAPP/PS1mice.A:Nisslstainingincortex(scalebar=50μm).B:Numberofneuronsincortex.Datawerepresentedas±SD,n=3.#P<0.05vs.WildTypegroup,P<0.05vs.APP/PS1group.2.3DNLA對(duì)APP/PS1小鼠皮層Aβ1-42水平的影響2.3.1Westernblot檢測(cè)APP/PS1小鼠皮層組織Aβ1-42蛋白水平的變化AD的病理特征之一是淀粉樣斑塊，主要成分為Aβ1-42多肽片段。Westernblot檢測(cè)皮層組織Aβ1-42蛋白水平，如圖4所示，APP/PS1小鼠皮層Aβ1-42蛋白水平升高（P<0.05），DNLA高劑量（20mg/kg）治療4個(gè)月后可降低其蛋白水平（P<0.05），同時(shí)可觀察到Aβ1-42主要以聚合的形式存在。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]金釵石斛總生物堿對(duì)APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶影響及其相關(guān)因素研究[D]. 楊小惠.遵義醫(yī)學(xué)院 2017
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本文編號(hào)：3580049