目的:1.觀察放療聯(lián)合吲哚胺-2,3-雙加氧酶（IDO）抑制劑1-甲基色氨酸（1MT）對荷肺癌小鼠的抑瘤效應。2.觀察放療聯(lián)合1MT治療對荷瘤小鼠免疫抑制分子IDO的抑制作用。3.探討放療聯(lián)合1MT治療對荷瘤小鼠抗原提呈細胞樹突狀細胞（DCs）成熟分化、調節(jié)性T細胞分化、CD8+T細胞活化,T細胞耗竭受體（PD-1、TIM3、BTLA）的影響。方法:1.C57BL/C小鼠皮下接種Lewis肺癌（LLC）細胞懸液建立小鼠荷瘤模型后,隨機分為4組:對照組（CON組）、1MT組、放療組（RT組）、聯(lián)合組（1MT+RT組）,分別給予每日兩次生理鹽水,或1MT 400mg/kg灌胃,RT組和1MT+RT組在接瘤第13天單次給與荷瘤小鼠10Gy x射線照射腫瘤表面,聯(lián)合組同時給予1MT治療。每日觀察并測量腫瘤大小繪制腫瘤生長曲線;接瘤第28天處死小鼠,剝離腫瘤組織并稱重。2.取部分腫瘤組織制備病理切片進行HE染色觀察,免疫組織化學染色法觀察各組中Ki-67的表達情況。3.RT-qPCR檢測各組小鼠腫瘤組織中IDO、PD-1、TIM3、BTLA基因表達水平。4.流式細胞分析儀分別檢測各組小鼠脾臟中D... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠放療實物圖（采取單次10Gy的分割模式）

放療聯(lián)合IDO抑制劑治療小鼠肺癌A.第28天處死小鼠剝離腫瘤實物圖；B.腫瘤組織HE染色(×400)；C.腫瘤生長曲線；D.離體腫瘤的重量；n=5，*P＜0.05，**P＜0.01

第3章結果18ABCD圖3.3IDO、PD-1、TIM3、BTLA表達水平A.以分組為橫坐標，IDO的相對表達量為縱坐標；B.以分組為橫坐標，PD-1的相對表達量為縱坐標；C.以分組為橫坐標，TIM3的相對表達量為縱坐標；D.以分組為橫坐標，BTLA的相對表達量為縱坐標；n=5，**P＜0.01。3.3聯(lián)合治療對荷肺癌小鼠脾臟CD4+CD25+Foxp3+Tregs、CD8+INF-γ+T細胞表達的影響Tregs細胞可以抑制抗腫瘤效應細胞如NK細胞、CD8+或CD4+T細胞的功能，抑制Tregs細胞可使效應細胞增多[37]。我們收集荷肺癌小鼠脾臟細胞，與細胞表面抗小鼠熒光抗體FITC-CD4，APC-CD25孵育30min，然后經過固定，透膜處理后，再與胞內抗小鼠熒光抗體PE-FoxP3孵育30min，流式細胞儀檢測荷肺癌小鼠脾臟淋巴細胞中CD4+CD25+Foxp3+Tregs細胞的比例，我們先圈出CD4+T細胞群，再顯示其中CD25+Foxp3+細胞，即為CD4+CD25+Foxp3+Tregs。各組Tregs分別是：CON組（2.58±0.05）%、RT組（1.32±0.1）%、1MT組（1.02±0.1）%、1MT+RT組（0.64±0.07）%。結果顯示：與CON組相比，

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腫瘤免疫治療中免疫檢查點阻斷劑的研究進展[J]. 王雪蕾,馮輝.  免疫學雜志. 2016(06)
[2]樹突狀細胞對調節(jié)性T細胞的調控作用[J]. 劉文婷,姜廣水.  國際免疫學雜志. 2012 (03)



本文編號：3556692