目的:探討赭曲霉毒素A（OTA）誘導(dǎo)人腎小管上皮（HK-2）細胞凋亡的過程;齊墩果酸（OA）拮抗OTA誘導(dǎo)HK-2細胞凋亡的作用;以及（腫瘤壞死因子相關(guān)受體1）TRAP1在OA拮抗OTA誘導(dǎo)HK-2細胞凋亡信號傳導(dǎo)的機制。方法:1.本實驗以人腎小管上皮（HK-2）細胞為實驗?zāi)Ｐ?用不同濃度OTA處理細胞24 h后,使用CCK-8方法測定細胞存活率,確定OTA的工作濃度。設(shè)置對照組（C組,0μmol/L OTA處理24 h）、低劑量組（L組,0.2μmol/L OTA處理24 h）、中劑量組（M組,1μmol/L OTA處理24 h）和高劑量組（H組,5μmol/L OTA處理24 h）。使用OTA處理細胞所需時間后,用Annexin V-FITC/PI雙染法測定細胞凋亡率,同時用Western blot方法測定凋亡相關(guān)蛋白TRAP1、Lonp1、CYPD、Cyt-C、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4和CHOP的表達。2.用不同濃度OA預(yù)處理細胞2 h后,使用CCK-8方法測定細... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度OTA對HK-2細胞凋亡率的影響

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士論文李晨26圖4-A不同濃度OTA對凋亡相關(guān)蛋白表達的影響Fig.4-AApoptosis-relatedproteinexpressionsinresponsetodifferentconcentrationsofOTAtreatmentNote：Westernblotanalysisresultsinresponsetothetreatmentof0μmol/LOTAfor24h(controlgroup,groupC);0.2μmol/LOTAfor24h(groupL);1μmol/LOTAfor24h(groupM);5μmol/LOTAfor24h(groupH).mPTP的開放和MOMP可以引起Cyt-C的釋放。CYPD可以調(diào)節(jié)mPTP的開放[44]，而線粒體外膜的透化主要受到Bcl-2蛋白家族的影響[22]�；诖�，通過Westernblot方法檢測OTA對線粒體途徑凋亡相關(guān)蛋白CYPD、胞質(zhì)Cyt-C、Bax、Bcl-2、CleavedCaspase9和CleavedCaspase3表達情況的影響。結(jié)果如圖4-A和圖4-C所示，與C組相比，L組、M組和H組CYPD和胞質(zhì)Cyt-C的表達逐漸增加，其中M組和H組CYPD和胞質(zhì)Cyt-C的表達顯著增加（P＜0.05）。與C組相比，L組、M組和H組Bcl-2的表達顯著降低（P＜0.05）。此外，與C

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士論文李晨32圖7-AOA和OTA處理對HK-2細胞凋亡率的影響Fig.7-AApoptosisrateofHK-2cellsinresponsetoOAand/orOTAtreatmentNote：Cellapoptoticrateinresponsetothetreatmentof0μmol/LOTAfor24h(controlgroup,groupCK);5μmol/LOTAfor24h(groupOT);2μmol/LOAfor2h(groupOA);2μmol/LOApre-treatmentfor2hand5μmol/LOTAfor24h(groupOO).

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3549931