目的:探討赭曲霉毒素A（OTA）誘導(dǎo)人腎小管上皮（HK-2）細(xì)胞凋亡的過(guò)程;齊墩果酸（OA）拮抗OTA誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞凋亡的作用;以及（腫瘤壞死因子相關(guān)受體1）TRAP1在OA拮抗OTA誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)的機(jī)制。方法:1.本實(shí)驗(yàn)以人腎小管上皮（HK-2）細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?用不同濃度OTA處理細(xì)胞24 h后,使用CCK-8方法測(cè)定細(xì)胞存活率,確定OTA的工作濃度。設(shè)置對(duì)照組（C組,0μmol/L OTA處理24 h）、低劑量組（L組,0.2μmol/L OTA處理24 h）、中劑量組（M組,1μmol/L OTA處理24 h）和高劑量組（H組,5μmol/L OTA處理24 h）。使用OTA處理細(xì)胞所需時(shí)間后,用Annexin V-FITC/PI雙染法測(cè)定細(xì)胞凋亡率,同時(shí)用Western blot方法測(cè)定凋亡相關(guān)蛋白TRAP1、Lonp1、CYPD、Cyt-C、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4和CHOP的表達(dá)。2.用不同濃度OA預(yù)處理細(xì)胞2 h后,使用CCK-8方法測(cè)定細(xì)... 

【文章來(lái)源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度OTA對(duì)HK-2細(xì)胞凋亡率的影響

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士論文李晨26圖4-A不同濃度OTA對(duì)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響Fig.4-AApoptosis-relatedproteinexpressionsinresponsetodifferentconcentrationsofOTAtreatmentNote：Westernblotanalysisresultsinresponsetothetreatmentof0μmol/LOTAfor24h(controlgroup,groupC);0.2μmol/LOTAfor24h(groupL);1μmol/LOTAfor24h(groupM);5μmol/LOTAfor24h(groupH).mPTP的開放和MOMP可以引起Cyt-C的釋放。CYPD可以調(diào)節(jié)mPTP的開放[44]，而線粒體外膜的透化主要受到Bcl-2蛋白家族的影響[22]�；诖�，通過(guò)Westernblot方法檢測(cè)OTA對(duì)線粒體途徑凋亡相關(guān)蛋白CYPD、胞質(zhì)Cyt-C、Bax、Bcl-2、CleavedCaspase9和CleavedCaspase3表達(dá)情況的影響。結(jié)果如圖4-A和圖4-C所示，與C組相比，L組、M組和H組CYPD和胞質(zhì)Cyt-C的表達(dá)逐漸增加，其中M組和H組CYPD和胞質(zhì)Cyt-C的表達(dá)顯著增加（P＜0.05）。與C組相比，L組、M組和H組Bcl-2的表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。此外，與C

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士論文李晨32圖7-AOA和OTA處理對(duì)HK-2細(xì)胞凋亡率的影響Fig.7-AApoptosisrateofHK-2cellsinresponsetoOAand/orOTAtreatmentNote：Cellapoptoticrateinresponsetothetreatmentof0μmol/LOTAfor24h(controlgroup,groupCK);5μmol/LOTAfor24h(groupOT);2μmol/LOAfor2h(groupOA);2μmol/LOApre-treatmentfor2hand5μmol/LOTAfor24h(groupOO).

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3549931