目的:探討轉(zhuǎn)錄激活因子5（Activating transcription factor 5,ATF5）對鼻咽癌細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響及其可能分子機制。方法:以人鼻咽癌CNE2Z細(xì)胞為研究對象,采用慢病毒載體shRNA-ATF5干擾技術(shù)沉默CNE2Z細(xì)胞ATF5表達及實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR）檢測慢病毒shRNA-ATF5載體干擾效率;以未感染慢病毒的CNE2Z細(xì)胞作空白對照（Control組）,慢病毒空載體LV-shRNA-NC感染CNE2Z細(xì)胞作為陰性對照（NC組）,慢病毒載體shRNA-ATF5（LV-shRNA-ATF5）感染CNE2Z細(xì)胞為實驗組（shRNA-ATF5組）;再運用噻唑藍(lán)（Methylthiazolyl Blue Tetrazolium,MTT）法及克隆形成實驗檢測CNE2Z細(xì)胞增殖能力,劃痕實驗、Transwell遷移實驗、侵襲實驗檢測CNE2Z細(xì)胞遷移及侵襲能力;采用Affymetrix人類基因表達譜芯片技術(shù)比較感染shRNA-ATF5慢病毒后... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

慢病毒感染干擾ATF5表達A.慢病毒感染CNE2Z細(xì)胞熒光表達B.CNE2Z細(xì)胞***

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文范爾兮22圖2ATF5沉默對CNE2Z細(xì)胞增殖的影響A.CNE2Z細(xì)胞增殖能力比較B.CNE2Z細(xì)胞克隆形成能力比較(***P<0.001)。Fig.2EffectofsilentATF5ontheproliferationofCNE2ZcellsA.TheproliferationofCNE2ZcellsintheshRNA-ATF5groupissignificantlylowerthanthatintheNCgroup(***P<0.001).3.2ATF5沉默對CNE2Z細(xì)胞侵襲及遷移的影響劃痕實驗結(jié)果顯示，NC組CNE2Z細(xì)胞4h遷移率為（0.52±0.05）,8h遷移率為（0.74±0.07）；shRNA-ATF5組細(xì)胞4h遷移率為（0.17±0.04），8h遷移率為（0.18±0.06），shRNA-ATF5組細(xì)胞遷移能力較NC組顯著降低（P<0.05,圖3）；Transwell遷移實驗結(jié)果也顯示，shRNA-ATF5組遷移細(xì)胞數(shù)量（2±0.23）明顯低于NC組遷移細(xì)胞數(shù)量（111±1.99）（P<0.05,圖4）；Transwell侵襲實驗結(jié)果也顯示，shRNA-ATF5組侵襲細(xì)胞量（4±1.45）明顯低于NC組侵襲細(xì)胞數(shù)量（132±9.79）（P<0.05,圖5）。

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文范爾兮23圖3劃痕實驗檢測ATF5沉默對CNE2Z細(xì)胞遷移的影響Fig.3ScratchtesttodetecttheeffectofATF5silencingonthemigrationabilityofCNE2Zcells

【參考文獻】：
期刊論文
[1]ATF5在復(fù)發(fā)鼻咽癌組織中的表達及意義[J]. 帥煜,馮光勇,吳明娜,何國平,茍小霞,張貴海.  遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2019(02)
[2]ATF5在鼻咽癌組織中的表達及臨床意義[J]. 馮光勇,張瑩瑩,張貴海.  遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2018(02)
[3]鼻咽癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移診斷專家共識[J]. 李金高,陳曉鐘,林少俊,胡超蘇.  中華放射腫瘤學(xué)雜志. 2018 (01)
[4]Macrophage migration inhibitory factor regulates proliferation of gastric cancer cells via the PI3K/Akt pathway[J]. Guo-Qing Li,Juan Xie,Xiao-Yong Lei,Li ZhangDepartment of Gastro-enterology,The Second Affi liated Hospital,University of South China,Hengyang 421001,Hunan Province,China,Institute of Pharmacy and Pharmacology,University of South China,Hengyang 421001,Hunan Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(44)
[5]鼻咽癌組織中轉(zhuǎn)移抑制基因和血管內(nèi)皮生長因子蛋白表達及其臨床意義[J]. 姜武忠,廖遇平,趙素萍,伍海軍.  中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2006(03)
[6]Functional interaction of TCF4 with ATF5 to regulate the Wnt signaling pathway[J]. YE Xiongjun1,3, ZHANG Zhiwen2, ZHANG Xinjun3, LIN Guiting1, XIONG Shiqin3, JIN Guihua3, HAN Liang3, HUANG Shisi3, CHEN Peila3, AI Junkui1, XIN Dianqi1, GUO Yinglu1 & CHANG Zhijie3 1. Urology Department of the First Hospital, Institute of Urology, Peking University, Beijing 100034, China; 2. Physiological Department, Peking University Health Science Center, Beijing 100083, China; 3. Tsinghua Institute of Genome Research, Department of Biological Sciences and Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China.  Chinese Science Bulletin. 2003(07)



本文編號：3549611