MiR-146a通過TRAF6抑制CRSwNP中HNE誘導(dǎo)的MUC5AC表達(dá)的研究機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2021-12-23 13:38
目的:探討微小RNA-146a(Micro ribo Nucleic acid-146a,MiR-146a)是否通過腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(Tumor necrosis factor receptor-related factor,TRAF6)作用引起慢性鼻竇炎伴鼻息肉(Chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)中人嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(Human neutrophil elastase,HNE)誘導(dǎo)的粘蛋白5AC(Mucin 5AC,MUC5AC)表達(dá)降低及其作用機(jī)制。方法:1免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qRT-PCR)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)CRSwNP組和正常對(duì)照組的鼻腔、鼻竇黏膜中的MUC5AC、MiR-146a和TRAF6的表達(dá);2、體外進(jìn)行鼻黏膜原代上皮細(xì)胞(Human nasal epithel...
【文章來源】: 南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【文章目錄】:
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 CRSwNP患者鼻黏膜組織中MiR-146a、MUC5AC和 TRAF6 的表達(dá)情況
2.1 實(shí)驗(yàn)選材與實(shí)驗(yàn)步驟
2.1.1 采集樣本并將樣本進(jìn)行分組
2.1.2 采集樣品
2.1.3 免疫組化檢測(cè)鼻黏膜組織中MUC5AC、TRAF6 的表達(dá)
2.1.4 qRT-PCR檢測(cè)樣本中MiR-146a、MUC5AC和TRAF6的m RNA表達(dá)
2.1.5 統(tǒng)計(jì)結(jié)果
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.2.1 鼻黏膜組織中MUC5AC、TRAF6的分泌
2.2.2 鼻黏膜組織中MiR-146a、MUC5AC和 TRAF6的mRNA表達(dá)
第3章 體外培養(yǎng)原代上皮細(xì)胞
3.1 實(shí)驗(yàn)選材與步驟
3.1.1 體外培養(yǎng)原代細(xì)胞
3.1.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各分組MiR-146a、MUC5AC、TRAF6 m RNA的表達(dá)
3.1.3 ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)不同組別Muc5AC的表達(dá)
3.1.4 WB檢測(cè)各組細(xì)胞TRAF6蛋白的表達(dá)情況
3.1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 HNECs細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組細(xì)胞MIR-146a、MUC5AC、TRAF6 m RNA的表達(dá)情況
3.2.3 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)定各分組MUC5AC的表達(dá)
3.2.4 WB檢測(cè)每個(gè)細(xì)胞分組中TRAF6 蛋白的表達(dá)
第4章 雙熒光素酶報(bào)告基因鑒定
4.1 實(shí)驗(yàn)器材及試劑
4.1.1 實(shí)驗(yàn)器材
4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
4.1.4 結(jié)果
第5章 討論
第6章 結(jié)論
6.1 結(jié)論
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]pendrin在慢性鼻-鼻竇炎黏膜中的表達(dá)及其與黏蛋白5AC表達(dá)的相關(guān)性[J]. 黃小燕,馮琨,劉丹,金雪玲,張劍,羅慶. 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2015 (14)
[2]慢性鼻-鼻竇炎中缺氧誘導(dǎo)因子1α的表達(dá)及與黏蛋白分泌的關(guān)系[J]. 羅慶,朱恒濤,馮琨,黃小燕,金雪玲,張劍. 中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015 (02)
碩士論文
[1]miR-146a調(diào)控慢性鼻—鼻竇炎中MUC5AC表達(dá)的作用研究[D]. 嚴(yán)丹青.南昌大學(xué). 2017
本文編號(hào):3548581
【文章來源】: 南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【文章目錄】:
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 CRSwNP患者鼻黏膜組織中MiR-146a、MUC5AC和 TRAF6 的表達(dá)情況
2.1 實(shí)驗(yàn)選材與實(shí)驗(yàn)步驟
2.1.1 采集樣本并將樣本進(jìn)行分組
2.1.2 采集樣品
2.1.3 免疫組化檢測(cè)鼻黏膜組織中MUC5AC、TRAF6 的表達(dá)
2.1.4 qRT-PCR檢測(cè)樣本中MiR-146a、MUC5AC和TRAF6的m RNA表達(dá)
2.1.5 統(tǒng)計(jì)結(jié)果
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.2.1 鼻黏膜組織中MUC5AC、TRAF6的分泌
2.2.2 鼻黏膜組織中MiR-146a、MUC5AC和 TRAF6的mRNA表達(dá)
第3章 體外培養(yǎng)原代上皮細(xì)胞
3.1 實(shí)驗(yàn)選材與步驟
3.1.1 體外培養(yǎng)原代細(xì)胞
3.1.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各分組MiR-146a、MUC5AC、TRAF6 m RNA的表達(dá)
3.1.3 ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)不同組別Muc5AC的表達(dá)
3.1.4 WB檢測(cè)各組細(xì)胞TRAF6蛋白的表達(dá)情況
3.1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 HNECs細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組細(xì)胞MIR-146a、MUC5AC、TRAF6 m RNA的表達(dá)情況
3.2.3 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)定各分組MUC5AC的表達(dá)
3.2.4 WB檢測(cè)每個(gè)細(xì)胞分組中TRAF6 蛋白的表達(dá)
第4章 雙熒光素酶報(bào)告基因鑒定
4.1 實(shí)驗(yàn)器材及試劑
4.1.1 實(shí)驗(yàn)器材
4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
4.1.4 結(jié)果
第5章 討論
第6章 結(jié)論
6.1 結(jié)論
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]pendrin在慢性鼻-鼻竇炎黏膜中的表達(dá)及其與黏蛋白5AC表達(dá)的相關(guān)性[J]. 黃小燕,馮琨,劉丹,金雪玲,張劍,羅慶. 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2015 (14)
[2]慢性鼻-鼻竇炎中缺氧誘導(dǎo)因子1α的表達(dá)及與黏蛋白分泌的關(guān)系[J]. 羅慶,朱恒濤,馮琨,黃小燕,金雪玲,張劍. 中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015 (02)
碩士論文
[1]miR-146a調(diào)控慢性鼻—鼻竇炎中MUC5AC表達(dá)的作用研究[D]. 嚴(yán)丹青.南昌大學(xué). 2017
本文編號(hào):3548581
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