目的明確咔唑類生物堿衍生物CZ-7對中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘損傷的神經(jīng)保護(hù)作用,探究CZ-7對髓鞘損傷中清除髓鞘碎片及促進(jìn)髓鞘再生作用的影響及相關(guān)機(jī)制,闡明CZ-7在中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘損傷中的保護(hù)作用,為治療髓鞘損傷的藥物開發(fā)和基于黃皮的咔唑類生物堿衍生物的藥物開發(fā)提供有力的理論依據(jù)。方法1.將6-8周齡雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為空白對照組（Control組）、模型組（CPZ組）、給藥組（CPZ+CZ-7組）。每天CPZ灌胃（給藥劑量為300mg/kg）進(jìn)行髓鞘損傷造模,造模同時(shí)CZ-7灌胃給藥（給藥劑量為20mg/kg）。造模4周后,對小鼠進(jìn)行爬桿、抓力和平衡木行為學(xué)檢測,隨后對動物進(jìn)行取材。2.用LFB染色和MBP免疫組化染色檢測髓鞘的脫失情況;用QPCR檢測與髓鞘形成相關(guān)的基因（MBP、MOG、PLP1和MOBP）的mRNA表達(dá)水平。3.通過dMBP免疫熒光染色和油紅O染色檢測CZ-7對髓鞘損傷特異部位胼胝體脫落的髓鞘碎片的清除作用。4.通過Iba1免疫熒光染色檢測各組小鼠胼胝體中小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)和數(shù)量,通過QPCR以及Iba1和MBP免疫熒光共染驗(yàn)證小膠質(zhì)細(xì)胞對髓鞘碎片的吞噬作用。5... 

【文章來源】：山西中醫(yī)藥大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞表
引言
第一節(jié) 咔唑類生物堿衍生物CZ-7對髓鞘損傷的藥效評價(jià)
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 藥物的配制
        2.2 溶液的配制
        2.3 動物分組、造模及給藥
        2.4 行為學(xué)檢測
        2.5 組織制備
        2.6 固藍(lán)(Luxol Fast Blue, LFB)染色
        2.7 免疫組化染色
        2.8 熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(Quantitative Polymerase Chain Reaction, QPCR)
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 CZ-7 可以顯著改善CPZ誘導(dǎo)的體重減輕和行為學(xué)障礙
        3.2 CZ-7 可明顯改善CPZ誘導(dǎo)的髓鞘損傷
    4 小結(jié)
    5 討論
第二節(jié) 咔唑類生物堿衍生物CZ-7對髓鞘損傷的機(jī)制研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 藥物的配制
        2.2 溶液的配制
        2.3 免疫熒光染色
        2.4 油紅O染色
        2.5 熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(Quantitative Polymerase Chain Reaction, QPCR)
        2.6 原代少突膠質(zhì)前體細(xì)胞分離培養(yǎng)、給藥及檢測
        2.7 CCK-8 法檢測細(xì)胞活力
        2.8 Western blot
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 CZ-7 促進(jìn)脫落的髓鞘碎片清除
        3.2 CZ-7 增強(qiáng)小膠質(zhì)細(xì)胞對髓鞘碎片的吞噬
        3.3 CZ-7 促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2 型轉(zhuǎn)變
        3.4 CZ-7 促進(jìn)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的招募
        3.5 CZ-7 促進(jìn)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的分化成熟
    4 小結(jié)
    5 討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄 文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號：3490117