目的:利用尾加壓素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）受體（即UT）特異性拮抗劑urantide阻斷UⅡ/UT系統(tǒng),研究該信號系統(tǒng)對脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激小鼠原代枯否細胞（kupffer cell,KC）基因表達譜變化的影響。方法:采用在體膠原酶原位灌注、Percoll不連續(xù)密度梯度離心和早期細胞換液等方法分離純化小鼠原代KC,并采用墨汁吞噬實驗對分離培養(yǎng)純化的細胞進行吞噬功能鑒定。采用urantide預處理后,以LPS體外刺激原代枯否細胞。OneArry基因芯片檢測urantide預處理后,LPS刺激枯否細胞基因表達譜變化。采用實時熒光定量PCR法和瓊脂糖凝膠電泳分析對受urantide預處理后影響最顯著的基因進行驗證。結果:基因芯片結果顯示,urantide預處理后,LPS刺激原代KC內(nèi)基因表達譜發(fā)生了明顯變化。與非預處理組相比,urantide預處理組細胞內(nèi)存在差異性表達的基因有392個。其中,受urantide預處理影響而顯著下調(diào)的基因有146個（Tifab、Gna15、Plau、Apobec1、Acss1、Rtn1、Clec4a3、Golm1... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

1小鼠原代

第3章結果16AB圖3.2小鼠原代枯否細胞吞噬墨汁后的表現(xiàn)注：A：小鼠原代KC細胞吞噬墨汁6小時后顯微鏡下表現(xiàn)（普通鏡，X200）；B：小鼠原代KC細胞吞噬墨汁48小時后顯微鏡下表現(xiàn)（普通鏡，X200）。3.3基因芯片分析結果運用OneArray基因芯片對KC基因表達情況進行分析，運用Log2進行兩組細胞基因差異倍數(shù)分析,其中Tifab是下調(diào)最明顯的基因。

基因差異性表達熱圖（Heatmap）


本文編號：3471168