目的:利用尾加壓素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）受體（即UT）特異性拮抗劑urantide阻斷UⅡ/UT系統(tǒng),研究該信號系統(tǒng)對脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激小鼠原代枯否細(xì)胞（kupffer cell,KC）基因表達(dá)譜變化的影響。方法:采用在體膠原酶原位灌注、Percoll不連續(xù)密度梯度離心和早期細(xì)胞換液等方法分離純化小鼠原代KC,并采用墨汁吞噬實(shí)驗(yàn)對分離培養(yǎng)純化的細(xì)胞進(jìn)行吞噬功能鑒定。采用urantide預(yù)處理后,以LPS體外刺激原代枯否細(xì)胞。OneArry基因芯片檢測urantide預(yù)處理后,LPS刺激枯否細(xì)胞基因表達(dá)譜變化。采用實(shí)時熒光定量PCR法和瓊脂糖凝膠電泳分析對受urantide預(yù)處理后影響最顯著的基因進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:基因芯片結(jié)果顯示,urantide預(yù)處理后,LPS刺激原代KC內(nèi)基因表達(dá)譜發(fā)生了明顯變化。與非預(yù)處理組相比,urantide預(yù)處理組細(xì)胞內(nèi)存在差異性表達(dá)的基因有392個。其中,受urantide預(yù)處理影響而顯著下調(diào)的基因有146個（Tifab、Gna15、Plau、Apobec1、Acss1、Rtn1、Clec4a3、Golm1... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1小鼠原代

第3章結(jié)果16AB圖3.2小鼠原代枯否細(xì)胞吞噬墨汁后的表現(xiàn)注：A：小鼠原代KC細(xì)胞吞噬墨汁6小時后顯微鏡下表現(xiàn)（普通鏡，X200）；B：小鼠原代KC細(xì)胞吞噬墨汁48小時后顯微鏡下表現(xiàn)（普通鏡，X200）。3.3基因芯片分析結(jié)果運(yùn)用OneArray基因芯片對KC基因表達(dá)情況進(jìn)行分析，運(yùn)用Log2進(jìn)行兩組細(xì)胞基因差異倍數(shù)分析,其中Tifab是下調(diào)最明顯的基因。

基因差異性表達(dá)熱圖（Heatmap）


本文編號：3471168