發(fā)布時(shí)間：2021-10-23 23:30

　　目的:制備陽和湯含藥血清,干預(yù)乳腺癌MCF-7細(xì)胞,進(jìn)而觀測(cè)MCF-7細(xì)胞的增殖情況。通過有絲分裂原激活蛋白激酶（p38）/信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）信號(hào)通路,探索陽和湯治療乳腺癌的作用機(jī)制,為后續(xù)研究奠定前期基礎(chǔ),為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.制備陽和湯藥液:將按照陽和湯處方購買的藥材熬制成1 g·m L-1的陽和湯藥液。2.制備陽和湯含藥血清:將20只雌性SPF級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為空白組（蒸餾水）,陽和湯低、中、高劑量組（6 g·kg-1、12 g·kg-1、24 g·kg-1）。灌胃三天后腹主動(dòng)脈取血,離心,制備含藥血清。3.細(xì)胞培養(yǎng):將MCF-7細(xì)胞復(fù)蘇,加入含胎牛血清及雙抗的DMEM培養(yǎng)基,放置于37℃,CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。4.細(xì)胞干預(yù):取對(duì)數(shù)期生長的細(xì)胞,分為空白組,陽和湯低、中、高劑量組,分別加入相對(duì)應(yīng)的含藥血清進(jìn)行干預(yù)。通過細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)（CCK-8）,檢測(cè)陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的影響;通過細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn),檢測(cè)陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞周期的影響;通過DAPI染色,檢測(cè)陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞核形態(tài)的影響;通過流式細(xì)胞術(shù)（Ann... 

【文章來源】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的影響（x±s，n=3）

陽和湯含藥血清通過p38/STAT3信號(hào)通路對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的影響22圖2陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞周期的影響（x±s，n=3）注：（a）流式細(xì)胞儀測(cè)得細(xì)胞周期圖。（b）細(xì)胞周期中不同時(shí)期所占的比例。（c）S期所占比例。各組與Control組相比較*p<0.05。3.3陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞核形態(tài)的影響用陽和湯含藥血清分別干預(yù)各組細(xì)胞48h后，與Control組相比，YHDL組可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核出現(xiàn)核固縮，YHDH組可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核開始碎裂，YHDM組可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核完全碎裂。結(jié)果表明，陽和湯含藥血清能誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞和碎裂，且與劑量密切相關(guān)。見圖3。圖3陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞核形態(tài)的影響

陽和湯含藥血清通過p38/STAT3信號(hào)通路對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的影響22圖2陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞周期的影響（x±s，n=3）注：（a）流式細(xì)胞儀測(cè)得細(xì)胞周期圖。（b）細(xì)胞周期中不同時(shí)期所占的比例。（c）S期所占比例。各組與Control組相比較*p<0.05。3.3陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞核形態(tài)的影響用陽和湯含藥血清分別干預(yù)各組細(xì)胞48h后，與Control組相比，YHDL組可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核出現(xiàn)核固縮，YHDH組可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核開始碎裂，YHDM組可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核完全碎裂。結(jié)果表明，陽和湯含藥血清能誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞和碎裂，且與劑量密切相關(guān)。見圖3。圖3陽和湯含藥血清對(duì)MCF-7細(xì)胞核形態(tài)的影響


本文編號(hào)：3454128