目的:制備陽和湯含藥血清,干預乳腺癌MCF-7細胞,進而觀測MCF-7細胞的增殖情況。通過有絲分裂原激活蛋白激酶（p38）/信號傳導與轉錄激活因子3（STAT3）信號通路,探索陽和湯治療乳腺癌的作用機制,為后續(xù)研究奠定前期基礎,為臨床應用提供實驗依據。方法:1.制備陽和湯藥液:將按照陽和湯處方購買的藥材熬制成1 g·m L-1的陽和湯藥液。2.制備陽和湯含藥血清:將20只雌性SPF級SD大鼠隨機分為空白組（蒸餾水）,陽和湯低、中、高劑量組（6 g·kg-1、12 g·kg-1、24 g·kg-1）。灌胃三天后腹主動脈取血,離心,制備含藥血清。3.細胞培養(yǎng):將MCF-7細胞復蘇,加入含胎牛血清及雙抗的DMEM培養(yǎng)基,放置于37℃,CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。4.細胞干預:取對數(shù)期生長的細胞,分為空白組,陽和湯低、中、高劑量組,分別加入相對應的含藥血清進行干預。通過細胞增殖及細胞毒性實驗（CCK-8）,檢測陽和湯含藥血清對MCF-7細胞增殖的影響;通過細胞周期實驗,檢測陽和湯含藥血清對MCF-7細胞周期的影響;通過DAPI染色,檢測陽和湯含藥血清對MCF-7細胞核形態(tài)的影響;通過流式細胞術（Ann... 

【文章來源】：甘肅中醫(yī)藥大學甘肅省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

陽和湯含藥血清對MCF-7細胞增殖的影響（x±s，n=3）

陽和湯含藥血清通過p38/STAT3信號通路對乳腺癌MCF-7細胞增殖的影響22圖2陽和湯含藥血清對MCF-7細胞周期的影響（x±s，n=3）注：（a）流式細胞儀測得細胞周期圖。（b）細胞周期中不同時期所占的比例。（c）S期所占比例。各組與Control組相比較*p<0.05。3.3陽和湯含藥血清對MCF-7細胞核形態(tài)的影響用陽和湯含藥血清分別干預各組細胞48h后，與Control組相比，YHDL組可發(fā)現(xiàn)細胞核出現(xiàn)核固縮，YHDH組可發(fā)現(xiàn)細胞核開始碎裂，YHDM組可發(fā)現(xiàn)細胞核完全碎裂。結果表明，陽和湯含藥血清能誘導MCF-7細胞和碎裂，且與劑量密切相關。見圖3。圖3陽和湯含藥血清對MCF-7細胞核形態(tài)的影響

陽和湯含藥血清通過p38/STAT3信號通路對乳腺癌MCF-7細胞增殖的影響22圖2陽和湯含藥血清對MCF-7細胞周期的影響（x±s，n=3）注：（a）流式細胞儀測得細胞周期圖。（b）細胞周期中不同時期所占的比例。（c）S期所占比例。各組與Control組相比較*p<0.05。3.3陽和湯含藥血清對MCF-7細胞核形態(tài)的影響用陽和湯含藥血清分別干預各組細胞48h后，與Control組相比，YHDL組可發(fā)現(xiàn)細胞核出現(xiàn)核固縮，YHDH組可發(fā)現(xiàn)細胞核開始碎裂，YHDM組可發(fā)現(xiàn)細胞核完全碎裂。結果表明，陽和湯含藥血清能誘導MCF-7細胞和碎裂，且與劑量密切相關。見圖3。圖3陽和湯含藥血清對MCF-7細胞核形態(tài)的影響


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