目的:探討ACTN-4在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織表達(dá)及抑制其表達(dá)對(duì)癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響。方法:qPCR檢測(cè)ACTN-4在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中的mRNA表達(dá);免疫組化檢測(cè)ACTN-4在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織蛋白表達(dá)情況;將口腔鱗狀細(xì)胞癌SCC15細(xì)胞分為空白組（細(xì)胞無特殊的處理）、NC組（細(xì)胞中轉(zhuǎn)染脂質(zhì)體2000及NC siRNA）及si-ACTN-4（細(xì)胞中轉(zhuǎn)染脂質(zhì)體2000及設(shè)計(jì)合成的ACTN-4特異性siRNA）,Western blotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA 48h后細(xì)胞ACTN-4、Bcl-2、Bax、AKT和p-AKT表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA 24h、48h和72h的細(xì)胞增殖情況。結(jié)果:（1）ACTN-4在口腔鱗癌組織mRNA表達(dá)明顯高于癌旁組織（P<0.05）。（2）ACTN-4定位于口腔癌細(xì)胞的胞漿或胞膜,以胞漿或胞膜中呈現(xiàn)出明顯的黃色或棕褐色的陽性細(xì)胞,其陽性細(xì)胞表現(xiàn)出彌漫性分布;（3）ACTN-4特異性siRNA轉(zhuǎn)染SCC15細(xì)胞48h后,si-ACTN-4組ACTN-4蛋白表達(dá)明顯低于空白組（P<0.05）。（4）si-AC... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

口腔癌組織中ACTN-4mRNA相對(duì)表達(dá)量

山西醫(yī)科大學(xué)（博）碩士學(xué)位論文14圖2口腔癌組織HE染色結(jié)果注：1A：口底中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；1B：口底中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200；2A：舌高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；2B：舌高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200；3A：左頰中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；3B：左頰中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200；4A：牙齦高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；4B：牙齦高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200圖3ACTN-4蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)注：A：口底中分化鱗狀細(xì)胞癌×400；B：右舌高分化鱗狀細(xì)胞癌×400；C：左頰中分化鱗狀細(xì)胞癌×400；D：牙齦高分化鱗狀細(xì)胞癌×4002.2ACTN-4對(duì)SCC15細(xì)胞的影響2.2.1轉(zhuǎn)染效果合成ACTN-4特異性siRNA，將其轉(zhuǎn)染口腔鱗癌細(xì)胞，同時(shí)轉(zhuǎn)染陰性siRNA及空白細(xì)胞作為對(duì)照，采用Westernblotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA后的細(xì)胞中ACTN-4表達(dá)情況，結(jié)果表1和圖4所示，與空白組相比，NC組ACTN-4蛋白表達(dá)無顯著差異，si-ACTN-4組ACTN-4蛋白表達(dá)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明ACTN-4的抑制表達(dá)載體轉(zhuǎn)染人口腔鱗癌SCC15細(xì)胞成功。

山西醫(yī)科大學(xué)（博）碩士學(xué)位論文14圖2口腔癌組織HE染色結(jié)果注：1A：口底中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；1B：口底中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200；2A：舌高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；2B：舌高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200；3A：左頰中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；3B：左頰中分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200；4A：牙齦高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×100；4B：牙齦高分化鱗狀細(xì)胞癌HE染色×200圖3ACTN-4蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)注：A：口底中分化鱗狀細(xì)胞癌×400；B：右舌高分化鱗狀細(xì)胞癌×400；C：左頰中分化鱗狀細(xì)胞癌×400；D：牙齦高分化鱗狀細(xì)胞癌×4002.2ACTN-4對(duì)SCC15細(xì)胞的影響2.2.1轉(zhuǎn)染效果合成ACTN-4特異性siRNA，將其轉(zhuǎn)染口腔鱗癌細(xì)胞，同時(shí)轉(zhuǎn)染陰性siRNA及空白細(xì)胞作為對(duì)照，采用Westernblotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA后的細(xì)胞中ACTN-4表達(dá)情況，結(jié)果表1和圖4所示，與空白組相比，NC組ACTN-4蛋白表達(dá)無顯著差異，si-ACTN-4組ACTN-4蛋白表達(dá)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明ACTN-4的抑制表達(dá)載體轉(zhuǎn)染人口腔鱗癌SCC15細(xì)胞成功。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3419370