本文關鍵詞：大鼠肺勻漿上清液體外誘導骨髓間充質(zhì)干細胞分化的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討大鼠肺勻漿上清液誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向肺泡上皮細胞分化的可行性。方法：利用全骨髓貼壁分離法分離、純化大鼠的間充質(zhì)干細胞,觀察細胞的形態(tài),繪制生長曲線,并采用流式細胞術檢測細胞表面抗原CD29、CD90、CD45、CD34、CD49d的表達情況。經(jīng)骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞誘導液誘導后,分別采用茜素紅染色法、油紅O染色法、甲苯胺藍染色法檢測骨髓間充質(zhì)干細胞的誘導分化情況。正常肺組織和博來霉素誘導的損傷肺組織,分別提取勻漿上清液,誘導第3代骨髓間充質(zhì)干細胞。實驗組分為三組：骨髓間充質(zhì)干細胞組,骨髓間充質(zhì)干細胞+正常大鼠肺勻漿上清液組,骨髓間充質(zhì)干細胞+博來霉素損傷大鼠肺勻漿上清液組,持續(xù)誘導10天,通過細胞免疫熒光法和RT-PCR法分別在蛋白水平和基因水平檢測SP-C的表達。結果：骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)到第3代時形成漩渦狀、紡錘形、形態(tài)相對均一的貼壁細胞。流式細胞術檢測結果顯示其表面抗原CD29、CD90呈陽性,CD49d、CD34、CD45呈陰性。骨髓間充質(zhì)干細胞經(jīng)骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞誘導液誘導后,茜素紅染色呈紅色,油紅O染色呈橘紅色,甲苯胺藍呈藍色。經(jīng)肺勻漿上清液誘導后的骨髓間充質(zhì)干細胞,細胞免疫熒光和RT-PCR顯示各干預組均有SP-C蛋白的表達,對照組無SP-C蛋白的表達。統(tǒng)計學分析結果：正常及博來霉素損傷大鼠肺勻漿上清液誘導細胞免疫熒光SP-C蛋白的表達陽性率分別為13.29%及25.27%;RT-PCR檢測顯示博來霉素損傷的肺勻漿上清液陽性率較正常肺勻漿上清液高。結論：全骨髓貼壁分離法可以有效獲得數(shù)量充足、生長狀態(tài)良好并具有分化潛能的間充質(zhì)干細胞。大鼠正常肺勻漿上清液和博來霉素損傷的肺勻漿上清液均可以誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向肺泡上皮細胞分化,博來霉素損傷的肺勻漿上清液比正常的肺勻漿上清液誘導能力更強。
【關鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細胞 肺勻漿上清液 細胞分化 大鼠
【學位授予單位】：東南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R563
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• 英文摘要5-8
• 中英文縮寫詞表8-9
• 前言9-11
• 文獻綜述 骨髓間充質(zhì)干細胞的生物學特性及多向分化潛能11-20
• 第一部分 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定20-31
• 1 實驗材料20-21
• 2 實驗方法21-26
• 3 結果26-28
• 4 討論28-31
• 第二部分 大鼠勻漿上清液體外誘導骨髓間充質(zhì)干細胞分化的實驗研究31-39
• 1 實驗材料31-32
• 2 實驗方法32-36
• 3 結果36-37
• 4 討論37-39
• 第三部分 全文總結39-40
• 1.全文總結39
• 2.問題與展望39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻41-47
• 作者簡介47
• 研究生期間發(fā)表的論文47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 DU Min-qing;HUANG Yue-qin;LU Nai-Sheng;SHU Gang;ZHU Xiao-tong;WANG Li-na;GAO Ping;XI Qian-yun;ZHANG Yong-liang;WANG Song-bo;JIANG Qing-yan;;Characterization and Differentiation into Adipocytes and Myocytes of Porcine Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells[J];Journal of Integrative Agriculture;2014年04期

2 Yuxin Wu;Jinghan Zhang;Xiaoming Ben;;Neuronal-like cell differentiation of non-adherent bone marrow cell-derived mesenchymal stem cells[J];Neural Regeneration Research;2013年22期

3 王衛(wèi)民;丁妍;;BHA誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞分化為神經(jīng)細胞[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2013年02期

4 吉佳佳;阮靜;崔大祥;;熒光磁性納米粒子體外標記骨髓間充質(zhì)干細胞研究[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2011年01期

5 ;Vascular endothelial growth factor/platelet-derived growth factor receptor pathway is involved in bone marrow mesenchymal stem cell differentiation and directional migration toward gliomas[J];Neural Regeneration Research;2010年13期

6 郭振宇;鄭芹;雷俊霞;;不同品系小鼠骨髓間質(zhì)干細胞擴增能力及細胞表型差異的比較[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年47期

7 袁軍,單立冬,楊天明,惠國楨;差速貼壁法分離培養(yǎng)早期人胚骨髓間充質(zhì)干細胞[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2005年04期

  本文關鍵詞：大鼠肺勻漿上清液體外誘導骨髓間充質(zhì)干細胞分化的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：340702