研究背景及目的:大腸癌（colorectal cancer,CRC）是世界第四大常見(jiàn)腫瘤,致死率世界排名第二,在我國(guó)也是第四大常見(jiàn)腫瘤。由于發(fā)生發(fā)展過(guò)程涉及諸多因素,CRC的預(yù)防和治療一直難以有突破性進(jìn)展。估計(jì)未來(lái)10年CRC的全球負(fù)荷將增加60%。慢性炎癥是現(xiàn)今公認(rèn)的CRC的一種危險(xiǎn)因素,它會(huì)誘發(fā)癌變并促進(jìn)CRC的發(fā)生和發(fā)展。在諸多促癌的炎癥因子中,IL-6起著核心作用。然而臨床上抗IL-6的單抗對(duì)CRC卻沒(méi)有明顯的效果,因此,探討CRC中IL-6誘導(dǎo)大腸癌細(xì)胞增殖的相關(guān)調(diào)節(jié)因素,有利于篩選新的治療靶點(diǎn)。精氨酸特異性單ADP核糖基化酶1（ART1）是炎癥因子的正向調(diào)節(jié)因子,在肺泡II型上皮細(xì)胞中抑制ART1可以減少IL-6的釋放。而我們之前的研究表明,ART1與CRC的多種生物學(xué)行為存在密切關(guān)系,更重要的是ART1敲低后可以減少IL-6信號(hào)通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子gp130啟動(dòng)子的磷酸化水平。然而,ART1對(duì)IL-6誘導(dǎo)的大腸癌腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)影響及機(jī)制尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,本課題擬探討ART1是否能通過(guò)gp130對(duì)IL-6誘導(dǎo)大腸癌CT26細(xì)胞增殖產(chǎn)生影響及可能存在的機(jī)制,為CRC治療找尋潛在的... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ART1與gp130在CRC腫瘤和切緣組織中的表達(dá)（×200）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文35圖2.2IL-6誘導(dǎo)大腸癌CT26細(xì)胞不同時(shí)間后c-myc、CyclinD1和Bcl-xl蛋白水平（*P<0.05，**P<0.01）。Figure2.2Expressionofc-myc,CyclinD1andBcl-xlinCT26cellsafterinductionwithIL-6(25ng/ml)fordifferenttime(*P<0.05，**P<0.01).3.3ART1敲低對(duì)IL-6誘導(dǎo)大腸癌CT26細(xì)胞增殖的影響用0、5、10、20、50、100ng/mlIL-6處理大腸癌CT26細(xì)胞WT、NC和ART1-sh三組細(xì)胞，孵育時(shí)間為48小時(shí)。WT組和NC組細(xì)胞增殖活性隨著IL-6濃度的增加而增加，在20ng/ml后增殖活力無(wú)明顯增加，在50ng/ml達(dá)到最大促增殖效應(yīng)。WT和NC兩組細(xì)胞在IL-6誘導(dǎo)后增殖活力無(wú)明顯差異。IL-6促進(jìn)ART1-sh組增殖的效應(yīng)明顯低于其他兩個(gè)對(duì)照組（P<0.05）（圖2.3）。050100100120140160WT51020CART1-shN(ng/ml)*Cellviability%

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文36圖2.3IL-6（0、5、10、20、50、100ng/ml）孵育48小時(shí)后，大腸癌CT26細(xì)胞WT、NC和ART1-sh細(xì)胞的增殖活性（*P<0.05）。Figure2.3CellviabilityofCT26WT,NCandART1-shcellsafterincubationwithIL-6(5,10,20,50,100ng/ml)for48hours(*P<0.05).3.4ART1敲低對(duì)IL-6誘導(dǎo)大腸癌CT26細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白影響3.4.1ART1敲低組ART1蛋白水平在三組大腸癌CT26細(xì)胞中，ART1敲低組ART1蛋白水平明顯低于WT和NC組（P<0.05）（圖2.4）。WTNCART1-sh0.00.51.01.5*RelativeexpressionlevelofART1/β-actin圖2.4大腸癌CT26細(xì)胞WT、NC和ART1-sh組中ART1蛋白水平檢測(cè)（*P<0.05）。Figure2.4TheproteinlevelofART1inCT26WT,NCandART1-shcells(*P<0.05).3.4.2增殖相關(guān)蛋白水平用25ng/mlIL-6處理三組大腸癌CT26細(xì)胞，24小時(shí)后提取細(xì)胞總蛋白進(jìn)行檢測(cè)。如圖2.5所示，在WT組和NC組中，IL-6誘導(dǎo)后，c-myc、CyclinD1和Bcl-xl水平明顯增高。ART1-sh組在IL-6誘導(dǎo)后，c-my、CyclinD1和Bcl-xl的水平明顯低于WT和NC組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖2.5）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Clinicopathological significance of overexpression of interleukin-6 in colorectal cancer[J]. Jun Zeng,Zhong-Hua Tang,Shuang Liu,Shan-Shan Guo.  World Journal of Gastroenterology. 2017(10)
[2]ART1基因沉默對(duì)小鼠結(jié)腸癌CT26細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能的影響及作用機(jī)制的研究[J]. 宋光林,唐怡,王婭蘭,徐劍俠,熊薇.  腫瘤. 2013(06)



本文編號(hào)：3395853