發(fā)布時(shí)間：2021-09-06 07:06

　　背景:N6-甲基腺苷（m6A）修飾是真核mRNA中最常見(jiàn)的化學(xué)修飾,在調(diào)節(jié)mRNA穩(wěn)定性,剪接和翻譯中發(fā)揮重要作用。據(jù)報(bào)道,METTL3（甲基轉(zhuǎn)移酶3）是一種主要的RNA N6-腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶,參與許多癌癥的進(jìn)展。然而,METTL3在結(jié)直腸癌（CRC）中的作用和機(jī)制仍不清楚。方法:采用實(shí)時(shí)定量PCR（qRT-PCR）,蛋白質(zhì)免疫印跡（WB）和免疫組化（IHC）實(shí)驗(yàn)探討了METTL3在結(jié)直腸癌組織中的差異表達(dá)并利用統(tǒng)計(jì)軟件GraphPad Prism 5分析了METTL3的表達(dá)與病人臨床病理特征的關(guān)系。使用慢病毒表達(dá)載體構(gòu)建shRNA干擾質(zhì)粒和PCDH過(guò)表達(dá)質(zhì)粒,并建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。采用CCK-8實(shí)驗(yàn),克隆形成實(shí)驗(yàn),流式細(xì)胞術(shù),transwell實(shí)驗(yàn)和裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)研究了METTL3在體內(nèi)外對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞細(xì)胞功能的影響。使用qRT-PCR和Western blotting篩選METTL3的下游靶標(biāo)。進(jìn)行了m6A ELISA實(shí)驗(yàn)和RNA免疫共沉淀（RIP）實(shí)驗(yàn)來(lái)探索METTL3調(diào)控下游靶標(biāo)表達(dá)的潛在機(jī)制。結(jié)果:在本研究中,我們發(fā)現(xiàn)METTL3在結(jié)直腸癌中的表達(dá)顯著上調(diào),而METTL3的上... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

結(jié)直腸癌組織中METTL3的mRNA表達(dá)水平顯著高于鄰近正常組織

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19圖2.METTL3在結(jié)直腸癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)水平Figure2.TheexpressionlevelofMETTL3incolorectalcancertissuesandcells

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文312實(shí)驗(yàn)結(jié)果敲低METTL3的表達(dá)抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖和周期進(jìn)展圖3.敲低METTL3的表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期進(jìn)展的影響Figure3.EffectofMETTL3knockdownonCRCcellproliferationandcellcycleprogressioninvitro


本文編號(hào)：3386992