背景:N6-甲基腺苷（m6A）修飾是真核mRNA中最常見的化學(xué)修飾,在調(diào)節(jié)mRNA穩(wěn)定性,剪接和翻譯中發(fā)揮重要作用。據(jù)報道,METTL3（甲基轉(zhuǎn)移酶3）是一種主要的RNA N6-腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶,參與許多癌癥的進展。然而,METTL3在結(jié)直腸癌（CRC）中的作用和機制仍不清楚。方法:采用實時定量PCR（qRT-PCR）,蛋白質(zhì)免疫印跡（WB）和免疫組化（IHC）實驗探討了METTL3在結(jié)直腸癌組織中的差異表達并利用統(tǒng)計軟件GraphPad Prism 5分析了METTL3的表達與病人臨床病理特征的關(guān)系。使用慢病毒表達載體構(gòu)建shRNA干擾質(zhì)粒和PCDH過表達質(zhì)粒,并建立穩(wěn)定的細胞系。采用CCK-8實驗,克隆形成實驗,流式細胞術(shù),transwell實驗和裸鼠皮下成瘤實驗研究了METTL3在體內(nèi)外對結(jié)直腸癌細胞細胞功能的影響。使用qRT-PCR和Western blotting篩選METTL3的下游靶標(biāo)。進行了m6A ELISA實驗和RNA免疫共沉淀（RIP）實驗來探索METTL3調(diào)控下游靶標(biāo)表達的潛在機制。結(jié)果:在本研究中,我們發(fā)現(xiàn)METTL3在結(jié)直腸癌中的表達顯著上調(diào),而METTL3的上... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

結(jié)直腸癌組織中METTL3的mRNA表達水平顯著高于鄰近正常組織

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19圖2.METTL3在結(jié)直腸癌組織和細胞中的表達水平Figure2.TheexpressionlevelofMETTL3incolorectalcancertissuesandcells

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文312實驗結(jié)果敲低METTL3的表達抑制結(jié)直腸癌細胞的增殖和周期進展圖3.敲低METTL3的表達對結(jié)直腸癌細胞增殖和細胞周期進展的影響Figure3.EffectofMETTL3knockdownonCRCcellproliferationandcellcycleprogressioninvitro


本文編號：3386992