心腦血管疾病是全球死亡率和發(fā)病率最高的疾病之一。腦心通（NXT）是以傳統(tǒng)中醫(yī)理論為基礎配制而成的中藥復方,其已被中國食品、藥品監(jiān)督管理局（CFDA）批準用于治療心、腦血管疾病。但是,腦心通對心肌細胞肥大及LPS介導心肌細胞損傷的影響機制目前尚不清楚。本研究發(fā)現腦心通增強PPARγ表達,顯著促進自噬并抑制mTOR信號通路,從而抑制心肌細胞的肥大,但是這一過程受PPARγshRNA干擾而終止。此外,在脂多糖（LPS）誘導小鼠心肌細胞損傷的過程中,腦心通抑制心肌細胞凋亡并促進自噬,其與增強PPARγ的表達有關。顯著性研究結果如下:1)腦心通增加H9c2心肌細胞自噬,其與腦心通增強自噬相關基因的表達有關;2)腦心通抑制H9c2心肌細胞mTOR信號通路的激活;3)腦心通增強PPARγ轉錄活性;4)腦心通抑制心肌細胞肥大;5)PPARγshRNA干擾終止腦心通抑制心肌細胞肥大效應;6)腦心通預處理小鼠抑制LPS誘導的心肌細胞凋亡;7)腦心通預處理小鼠促進LPS誘導的小鼠心肌細胞自噬,并增強自噬相關基因的表達,其與腦心通增加PPARγ的表達有關。 

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 腦心通
    1.2 心肌肥大
    1.3 心肌細胞損傷
    1.4 凋亡
        1.4.1 凋亡概述
        1.4.2 凋亡與心血管疾病
    1.5 自噬
        1.5.1 自噬概述
        1.5.2 自噬與mTOR信號通路
    1.6 過氧化物酶體增殖物激活受體 γ（PPARγ）與心血管疾病
    1.7 本研究意義
    1.8 本研究主要內容與技術路線
        1.8.1 主要的實驗內容
        1.8.2 技術路線
第二章 腦心通/PPARγ/自噬信號通路抑制心肌細胞肥大
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 腦心通水提物
        2.2.2 培養(yǎng)大鼠心肌細胞
        2.2.3 細胞轉染
        2.2.4 制備細胞總蛋白
        2.2.5 測定細胞總蛋白濃度
        2.2.6 蛋白質免疫印跡法（Western Blot）
        2.2.7 免疫熒光實驗
        2.2.8 基因表達水平
        2.2.9 雙熒光素酶報告基因
        2.2.10 測定心肌細胞形態(tài)
    2.3 實驗結果
        2.3.1 腦心通促進心肌細胞H9c2自噬
        2.3.2 腦心通抑制mTOR信號通路
        2.3.3 腦心通增加PPARγ 的表達
        2.3.4 腦心通/PPARγ 信號介導心肌細胞自噬
        2.3.5 腦心通/PPARγ 信號抑制mTOR信號通路
        2.3.6 腦心通/PPARγ 信號通路抑制心肌細胞肥大
    2.4 本章小結
第三章 腦心通抑制LPS誘導的心肌細胞凋亡
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 實驗儀器
        3.1.3 實驗主要試劑
    3.2 試驗方法
        3.2.1 處理小鼠
        3.2.2 制作冰凍切片
        3.2.3 免疫組織化學染色
        3.2.4 制備小鼠心臟組織總蛋白
        3.2.5 測定小鼠心臟組織總蛋白濃度
        3.2.6 蛋白質免疫印跡法（Western Blot）
        3.2.7 組織切片免疫熒光實驗
        3.2.8 小鼠心臟組織基因表達
    3.3 實驗結果
        3.3.1 腦心通抑制LPS誘導的心肌細胞凋亡
        3.3.2 腦心通抑制凋亡信號通路
        3.3.3 腦心通增強自噬
        3.3.4 腦心通增強PPARγ 的表達
    3.4 本章小結
第四章 總結
參考文獻
致謝
在學期間的學術成果
參加課題


【參考文獻】：
期刊論文
[1]步長腦心通膠囊治療穩(wěn)定型心絞痛的臨床效果[J]. 鄭晰,張永杰.  中國醫(yī)藥導報. 2016(32)
[2]《中國心血管病報告2015》要點解讀[J]. 隋輝,陳偉偉,王文.  中國心血管雜志. 2016(04)
[3]丹紅注射液聯合腦心通治療急性冠脈綜合征療效評價的Meta分析[J]. 唐詠,溫澤淮,侯樂,陳伯鈞,李輝,鄧智武.  廣州中醫(yī)藥大學學報. 2016(01)
[4]原花青素B2對LPS誘導的心肌細胞凋亡的保護作用[J]. 張曉暉,曾繁典,孫智達,楊卓欣,熊益群,徐超英,劉心亮,林堅,穆桂萍,徐紹鋼,劉文赫.  中國藥理學通報. 2015(11)
[5]人參皂苷Rg1對高糖誘導心肌肥大的保護作用[J]. 李鐵成,王洪新.  中藥藥理與臨床. 2014(01)
[6]白藜蘆醇對脂多糖誘導的H9c2心肌細胞損傷的影響[J]. 劉玲,劉新偉,梁燦鑫,何東偉,俞瑩,王萍.  中國醫(yī)科大學學報. 2013(04)
[7]UPLC法同時測定腦心通膠囊中5個成分的含量[J]. 李耿,孟繁蘊,楊洪軍,方婧,劉峰,付梅紅.  藥物分析雜志. 2013(03)
[8]基于數據挖掘和網絡分析的“腦心同治”分子機制研究[J]. 陳迪,盧朋,張方博,唐仕歡,楊洪軍.  中國中藥雜志. 2013(01)
[9]Bax在14-3-3γ對抗脂多糖誘導的心肌細胞損傷中的作用[J]. 劉丹,尹東,孫惦,許旻,何明.  天津醫(yī)藥. 2012(12)
[10]腦心通膠囊對冠狀動脈臨界病變冠心病患者炎癥反應及預后的影響[J]. 李樹仁,王天紅,張寶軍,劉東霞,荀麗穎,胡煒,喬建晶.  中國中西醫(yī)結合雜志. 2012(05)



本文編號：3380481