目的:探討鞣花酸（Ellagic acid,EA）對(duì)脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）誘導(dǎo)的多巴胺（dopamine,DA）能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。方法:1.在體實(shí)驗(yàn):30只SD大鼠（200-250g）隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組、EA（50 mg/kg）組、LPS（10μg）組、LPS+EA（10 mg/kg）組和LPS+EA（50 mg/kg）組,每組6只。采用單側(cè)中腦黑質(zhì)內(nèi)注射LPS（10μg）誘導(dǎo)DA能神經(jīng)元損傷模型。制模后連續(xù)7天灌胃給予EA。通過轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)分析大鼠行為學(xué)改變;免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)DA能神經(jīng)元特征性標(biāo)記物—酪氨酸羥化酶（TH）的表達(dá);免疫熒光雙標(biāo)法觀察小膠質(zhì)細(xì)胞特征性標(biāo)志物—離子鈣結(jié)合蛋白1（Iba-1）和NLRP3炎癥小體的共定位現(xiàn)象;Western Blot檢測(cè)TH、Iba-1、NLRP3、caspase-1、pro-caspase-1、TNF-α,IL-1β和IL-18的蛋白表達(dá)。2.離體實(shí)驗(yàn):（1）為了觀察EA對(duì)DA能神經(jīng)元有無(wú)直接保護(hù)作用,將MN9D細(xì)胞（DA能神經(jīng)元細(xì)胞株）隨機(jī)分為5組:空白組、EA（1μM）組、6-OHDA... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

EA保護(hù)LPS誘導(dǎo)的DA能神經(jīng)元損傷

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文何雪梅19BCD圖2EA抑制LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞和NLRP3炎癥小體激活。（A）NLRP3和小膠質(zhì)細(xì)胞免疫熒光雙染；（B）大鼠中腦Iba-1的蛋白表達(dá)；（C）大鼠中腦NLRP3炎性小體信號(hào)通路的蛋白表達(dá)；（4）大鼠中腦炎癥介質(zhì)TNF-α、IL-1β和IL-18的蛋白表達(dá)。（x±SEM,n=6）*p<0.05，與假手術(shù)組比較；#p<0.05，與LPS組比較。Fig2.EAamelioratedLPS-elicitedactivationofmicrogliaandNLRP3inflammasomesignalinginvivo.(A)Double-immunofluorescenceofNLRP3andOX-42.(B)TheproteinexpressionofIba-1inratmidbrain.(C)TheproteinexpressionsofNLRP3,caspase-1andpro-caspase-1inratmidbrain.(D)TheproteinexpressionsofTNF-α,IL-1βandIL-18inratmidbrain.Datawerethemean±SEMfrom6ratsandexpressedasapercentageoftheshamgroup.*p<0.05comparedwithshamgroup;#p<0.05comparedwithLPSgroup.

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文何雪梅21BC圖3EA對(duì)DA能神經(jīng)元無(wú)直接保護(hù)作用。（A）MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活；（B）TH陽(yáng)性神經(jīng)元染色和計(jì)數(shù)；（C）TH蛋白質(zhì)表達(dá)。（x±SEM）*p<0.05，與空白組比較；#p<0.05，與6-OHDA組比較。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]線粒體在NLRP3炎性小體活化中的作用[J]. 莊一波,張愛華.  中華腎臟病雜志. 2014 (03)
[2]神經(jīng)炎癥與神經(jīng)退行性疾病的關(guān)系[J]. 邱奧望,劉展,郭軍,彭聿平.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2011(05)



本文編號(hào)：3362174