目的:建立37℃天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）的改良參考方法（不含磷酸吡哆醛）,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件并對(duì)其最佳測(cè)定模式進(jìn)行探討,對(duì)最終建立的參考方法進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià),探討AST改良參考方法在室間質(zhì)評(píng)靶值中的應(yīng)用。方法:根據(jù)國際臨床化學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)（IFCC）公布的第五部分參考測(cè)量程序,即AST參考測(cè)量程序,建立我室的37℃ AST改良參考方法并對(duì)其實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化;依據(jù)讀點(diǎn)時(shí)間周期及延遲期混勻時(shí)間對(duì)以上建立的AST參考方法設(shè)計(jì)A～I(xiàn)共9種不同的測(cè)定模式,檢測(cè)時(shí)間段均選取延遲反應(yīng)時(shí)間90 s后連續(xù)讀點(diǎn)180 s,對(duì)樣本進(jìn)行測(cè)定,每種模式每天重復(fù)測(cè)定2次,連續(xù)測(cè)定20天,分別計(jì)算不同測(cè)定模式下的AST測(cè)量結(jié)果總不精密度;按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）文件對(duì)上述建立的我室AST改良參考方法進(jìn)行精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍的方法學(xué)性能評(píng)價(jià),其中精密度評(píng)價(jià)參考NCCLS EP-5A文件、準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)參照NCCLS EP-15A文件、線性范圍評(píng)價(jià)參考NCCLS EP-6A文件,判斷是否符合方法學(xué)要求;在建立的參考方法符合方法學(xué)評(píng)價(jià)要求的基礎(chǔ)上,用建立的參考方法對(duì)2017年山西省臨床檢驗(yàn)中心的10... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

升溫曲線圖

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文122結(jié)果2.1AST催化活性的濃度依據(jù)動(dòng)力學(xué)反應(yīng)曲線（見圖2-1）對(duì)每次測(cè)定的吸光度數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄，整理所記錄數(shù)據(jù)后進(jìn)行回歸分析，計(jì)算AST吸光度在每分鐘內(nèi)的變化，通過以下公式計(jì)算AST的測(cè)定結(jié)果。AST催化活性濃度=Kmin(:線性回歸計(jì)算方法）化單位時(shí)間內(nèi)吸光度的變minALvVK610其中：K：酶活性濃度定量系數(shù)；ε：NADH在340nm處的摩爾吸光系數(shù)，為6.22×103L/mol*cm；V：反應(yīng)體系的總體積（ml）；v：所加樣本體積（ml）；L：比色杯光徑距離（cm）。圖2-1AST動(dòng)力學(xué)反應(yīng)曲線2.2不同測(cè)定模式下的精密度9種不同測(cè)定模式下的AST測(cè)定結(jié)果見表2-2。測(cè)定模式B即讀點(diǎn)時(shí)間周期為

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文192.3.2計(jì)算比例誤差（CVr）根據(jù)公式r=[計(jì)算本實(shí)驗(yàn)的CVr為0.68%，符合本實(shí)驗(yàn)的批內(nèi)不精密度要求(1%)，可繼續(xù)進(jìn)行以下多項(xiàng)式回歸分析。2.3.3多項(xiàng)式回歸分析統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見表3-4，可見二次多項(xiàng)式的b2與三次多項(xiàng)式的b2、b3與0均無顯著性差異（P>0.05）,其中三次多項(xiàng)式回歸統(tǒng)計(jì)的回歸標(biāo)準(zhǔn)誤差最小，即三次多項(xiàng)式分析為本線性范圍驗(yàn)證的最適多項(xiàng)式模型。最適多項(xiàng)式在每個(gè)濃度處的不確定度見表3-5，可見最大的偏差比（DLi%）為6.35%，仍在規(guī)定要求范圍內(nèi)。故本實(shí)驗(yàn)所建立的參考方法在所涉及的濃度范圍內(nèi)呈線性。表3-3AST線性范圍的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)稀釋點(diǎn)實(shí)際濃度（U/L）實(shí)測(cè)濃度1（U/L）實(shí)測(cè)濃度2（U/L）實(shí)測(cè)均值（U/L）14.004.204.34.25271.271.4071.371.353138.4138.6138.9138.754205.6205.7205.5205.65272.8272.6272.4272.506340339.00338.70338.85圖3-1實(shí)測(cè)濃度平均值與實(shí)際濃度的散點(diǎn)圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3355773