目的:建立37℃天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）的改良參考方法（不含磷酸吡哆醛）,優(yōu)化實驗條件并對其最佳測定模式進行探討,對最終建立的參考方法進行方法學評價,探討AST改良參考方法在室間質(zhì)評靶值中的應用。方法:根據(jù)國際臨床化學與檢驗醫(yī)學聯(lián)合會（IFCC）公布的第五部分參考測量程序,即AST參考測量程序,建立我室的37℃ AST改良參考方法并對其實驗條件進行優(yōu)化;依據(jù)讀點時間周期及延遲期混勻時間對以上建立的AST參考方法設計A～I共9種不同的測定模式,檢測時間段均選取延遲反應時間90 s后連續(xù)讀點180 s,對樣本進行測定,每種模式每天重復測定2次,連續(xù)測定20天,分別計算不同測定模式下的AST測量結(jié)果總不精密度;按照美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）文件對上述建立的我室AST改良參考方法進行精密度、準確度、線性范圍的方法學性能評價,其中精密度評價參考NCCLS EP-5A文件、準確度評價參照NCCLS EP-15A文件、線性范圍評價參考NCCLS EP-6A文件,判斷是否符合方法學要求;在建立的參考方法符合方法學評價要求的基礎上,用建立的參考方法對2017年山西省臨床檢驗中心的10... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

升溫曲線圖

山西醫(yī)科大學碩士學位論文122結(jié)果2.1AST催化活性的濃度依據(jù)動力學反應曲線（見圖2-1）對每次測定的吸光度數(shù)據(jù)進行記錄，整理所記錄數(shù)據(jù)后進行回歸分析，計算AST吸光度在每分鐘內(nèi)的變化，通過以下公式計算AST的測定結(jié)果。AST催化活性濃度=Kmin(:線性回歸計算方法）化單位時間內(nèi)吸光度的變minALvVK610其中：K：酶活性濃度定量系數(shù)；ε：NADH在340nm處的摩爾吸光系數(shù)，為6.22×103L/mol*cm；V：反應體系的總體積（ml）；v：所加樣本體積（ml）；L：比色杯光徑距離（cm）。圖2-1AST動力學反應曲線2.2不同測定模式下的精密度9種不同測定模式下的AST測定結(jié)果見表2-2。測定模式B即讀點時間周期為

山西醫(yī)科大學碩士學位論文192.3.2計算比例誤差（CVr）根據(jù)公式r=[計算本實驗的CVr為0.68%，符合本實驗的批內(nèi)不精密度要求(1%)，可繼續(xù)進行以下多項式回歸分析。2.3.3多項式回歸分析統(tǒng)計分析結(jié)果見表3-4，可見二次多項式的b2與三次多項式的b2、b3與0均無顯著性差異（P>0.05）,其中三次多項式回歸統(tǒng)計的回歸標準誤差最小，即三次多項式分析為本線性范圍驗證的最適多項式模型。最適多項式在每個濃度處的不確定度見表3-5，可見最大的偏差比（DLi%）為6.35%，仍在規(guī)定要求范圍內(nèi)。故本實驗所建立的參考方法在所涉及的濃度范圍內(nèi)呈線性。表3-3AST線性范圍的實驗數(shù)據(jù)稀釋點實際濃度（U/L）實測濃度1（U/L）實測濃度2（U/L）實測均值（U/L）14.004.204.34.25271.271.4071.371.353138.4138.6138.9138.754205.6205.7205.5205.65272.8272.6272.4272.506340339.00338.70338.85圖3-1實測濃度平均值與實際濃度的散點圖

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3355773