目的:采用代謝組學研究地榆鞣質(zhì)升高骨髓抑制小鼠白細胞的作用機制。方法:將SPF級KM小鼠隨機分為正常組、模型組、地榆鞣質(zhì)組,每組10只。模型組和地榆鞣質(zhì)組小鼠按100 mg·kg^-1劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺誘導骨髓抑制模型。實驗第1d,地榆鞣質(zhì)組按10 mg·kg^-1劑量灌胃給予地榆鞣質(zhì)水溶液,模型組灌胃等劑量生理鹽水,連續(xù)5d。實驗第6d,各組小鼠眼眶取血,分離骨髓及造血干細胞,檢測各組小鼠外周血液中白細胞數(shù)量,骨髓細胞DNA含量及造血干細胞數(shù)量,并采用LC-MS分析各實驗組小鼠血清代謝譜的變化。結果:與模型組比較,地榆鞣質(zhì)組小鼠白細胞數(shù)量顯著增加（P<0.05）,骨髓細胞DNA含量顯著增加（P<0.05）,造血干細胞數(shù)量顯著增加（P<0.05）,具有統(tǒng)計學意義;經(jīng)血清代謝輪廓分析,從模型組和正常組共篩選出35個差異代謝物,模型組和地榆鞣質(zhì)組共篩選出30個差異代謝物,篩選出VIP>1.0,fold-change≥1.5或≤0.667和p-value≤0.05三者的交集,得到阿糖胞苷、D-葡糖糖-6磷酸、α-酮異戊酸、十二... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫磁珠法分離原理

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文趙蘭蘭122.9統(tǒng)計方法用SPSS17.0軟件統(tǒng)計分析。其中的計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(sx)表示，組間差異進行單因素檢驗，方差齊情況下LSD檢驗，不齊的則進行T2檢驗，以P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。3實驗結果3.1地榆鞣質(zhì)含量干燥得到的純化地榆鞣質(zhì)經(jīng)HPLC含量測定，含量以沒食子酸計為85%。3.2HSCs分離鑒定結果3.2.1骨髓細胞計數(shù)從每個6周齡、重20～25gKM小鼠的脛骨和股骨骨髓可收集約（3.6±0.26）×107個骨髓細胞。3.2.2MACS分選造血干細胞MACS可富集約（1.3±0.3）×105個HSCs。圖2HSCs顯微圖片（×400）3.2.3HSCs純度檢測結果流式細胞儀檢測證實，免疫磁珠純化前，CD34+Scal+陽性細胞純度為（36.54±

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文趙蘭蘭133.28）%，純化后CD34+Scal+陽性細胞純度為（92.54±4.26）%。HSCs流式細胞儀檢測結果見圖3。圖3HSCs流式細胞檢測圖片注：A純化后CD34+Scal+流式細胞檢測圖片B純化前CD34+Scal+流式細胞檢測圖片3.2.4細胞活力測定結果將分離的HSCs經(jīng)臺盼藍染色后在顯微鏡下觀察，結果見圖4，經(jīng)檢測和計算，HSCs的回收率為87.5%，細胞活力為（95.8±5.29）%。圖4HSCs臺盼藍染色圖片（×200）3.3骨髓形態(tài)學觀察結果如圖5所示，正常組小鼠股骨骨髓為紅色，提示造血機能旺盛；模型組小鼠股骨骨髓為白色，提示小鼠被環(huán)磷酰胺作用后，骨髓細胞遭到大量損傷，造血機能嚴重下降。地榆鞣質(zhì)組小鼠股骨骨髓顯示為紅色，與正常組小鼠接近，表明地榆鞣質(zhì)干預后，小鼠骨髓細胞得到保護，骨髓造血機能得到維持。

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：3351598