目的:通過3D打印技術(shù)制備聚己內(nèi)脂/β-磷酸三鈣/硫酸鈣（polycaprolactone/β-tricalcium phosphate/calciumsulfate,PCL/β-TCP/CS）復(fù)合人工骨支架,對其形態(tài)、性能及體內(nèi)外的生物安全性進(jìn)行研究;通過兩步法制備磁性殼聚糖和磁性脂質(zhì)體,探索其在骨缺損基因治療中的潛力。方法:1.通過3D打印技術(shù)制備PCL/β-TCP/CS復(fù)合人工骨支架（PCL:β-TCP:CS比例為80:5:15,80:10:10,80:15:5,分別簡稱為P/T/S5,P/T/S10,P/T/S15）,并對其微觀形態(tài)、孔隙結(jié)構(gòu)、孔隙率及力學(xué)強度進(jìn)行表征。2.按照0.1g/ml濃度制備支架浸提液。采用CCK-8法檢測復(fù)合支架材料的細(xì)胞毒性,應(yīng)用堿性磷酸酶（ALP）染色和茜素紅染色檢測其誘導(dǎo)C3H10細(xì)胞成骨分化的能力。3.選取健康的新西蘭大白兔4只,分為P/T/S5,P/T/S10,P/T/S15三組及空白對照組,隨機將每組復(fù)合支架植入大白兔雙側(cè)股四頭肌肌肉深處,對照組行相同外科手術(shù)。于植入后1月取出標(biāo)本,肝腎臟及骨支架周圍肌肉行HE染色,評價復(fù)合支架的組織相容性... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

骨支架模型圖及大體觀Fig1.1Themodelandgeneralviewofbonescaffolds

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文20徑排列整齊，孔徑大小均勻，精確度較復(fù)合支架稍高。單純的聚己內(nèi)脂支架表面光滑，疏水性強，而β-磷酸三鈣及硫酸鈣的加入，增加了支架表面粗糙程度，可以看到有明顯的磷酸三鈣及硫酸鈣顆粒暴露在支架表面及孔隙中（圖1.2D）。豐富的孔隙結(jié)構(gòu)提高了支架的表面積，方便細(xì)胞在支架內(nèi)部粘附生長，而孔隙之間相互連通，有利于營養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的滲入，增加了養(yǎng)分和代謝廢物的替換，促進(jìn)細(xì)胞的遷移與橋接，防止支架植入早期由于血管還未生成影響支架內(nèi)部營養(yǎng)物質(zhì)供給導(dǎo)致細(xì)胞死亡。通過對支架材料進(jìn)行質(zhì)譜分析，如表一可知,隨著磷酸三鈣比例的增加，磷的比例也在增加，這與實際的β-TCP及CS的比例相符合。圖1.2PCL/PCL／β-TCP／CS復(fù)合支架微觀結(jié)構(gòu)圖（A、B）PCL支架,A:X30,B:X1000;（C、D）PCL／β-TCP／CS復(fù)合支架,C:X30,D:X1000Fig1.2ThemicrocosmicstructureofPCL/PCL／β-TCP／CScompositescaffold（A、B）PCLscaffolds,A:X30,B:X1000;（C、D）PCL／β-TCP／CScompositebonescaffolds,C:X30,D:X1000表1.1復(fù)合支架的化學(xué)成分及能譜分析Tab1.1ChemicalcompositionandenergyspectrumanalysisofcompositescaffoldNo.PCL：β-TCP：CSP(at%)S(at%)1100:0:0//280:5:150.792.99380:10:102.022.65480:15:53.630.78

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文212.2聚己內(nèi)脂/β-磷酸三鈣/硫酸鈣復(fù)合人工骨的親水性圖1.3復(fù)合支架與水滴的接觸角測量Fig1.3Watercontactangleofcompositescaffolds圖1.3為各組支架的親水性實驗。PCL支架的接觸角約為107°，顯示出較強的疏水表面特性。而添加了β-TCP和CS之后接觸角稍有增大，其原因主要是β-TCP和CS均為疏水性材料，因此接觸角較PCL支架有所增大。此外，β-TCP和CS的添加使PCL支架表面變得粗糙，按照微觀結(jié)構(gòu)表面接觸角模型[77]可知，粗糙程度使疏水表面更加疏水，故此接觸角也相應(yīng)增大。而β-TCP：CS=10：10時接觸角最大約為123°，可能原因與此比例下顆粒團(tuán)聚較低，粗糙程度較大有關(guān)。2.3聚己內(nèi)脂/β-磷酸三鈣/硫酸鈣復(fù)合人工骨孔隙率及彈性模量支架的孔隙率是支架內(nèi)外營養(yǎng)物質(zhì)交換的關(guān)鍵，較高的孔隙率保證支架內(nèi)部細(xì)胞在支架植入早期血循環(huán)尚未形成之前能夠從周圍組織液中獲取足夠的氧氣及營養(yǎng)成分。如圖1.4A所示，PCL支架由于塑形性好，孔隙率與設(shè)計的相差無幾，為（62.39±1.34）%，在60%左右較小的波動，而增加了β-TCP和CS后，支架孔隙率稍有降低，三組復(fù)合支架孔隙率分別為：P/T/S5：（57.34±4.75）%；P/T/S10：（56.88±3.84）%；P/T/S15：（57.3±3.81）%，其主要原因可能為生物擠壓導(dǎo)致支架材料整體孔隙的容積降低，從而減少了其孔隙率。此外，β-TCP和CS的加

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3347226