目的:本研究應(yīng)用五子衍宗丸（WYP）干預(yù)MPTP誘導(dǎo)的帕金森�。≒D）小鼠模型,觀察WYP對PD的治療效果及其可能的作用機制,為今后應(yīng)用WYP治療PD提供科學(xué)的理論依據(jù)。方法:C57BL/6雄性小鼠隨機分為正常組、模型組和WYP治療組。腹腔注射MPTP（d1:15mg/kg,d2:20mg/kg,d3-d7:30mg/kg）一周誘導(dǎo)建立經(jīng)典小鼠PD模型。同時,正常組和模型組給予生理鹽水50mL/kg/d灌胃,WYP治療組給予WYP藥液16g/kg/d灌胃,2次/d,持續(xù)兩周。于每次注射MPTP后觀察各組動物的一般行為學(xué)表現(xiàn)。實驗周期第15天,采用步態(tài)實驗、爬桿實驗、膠布移除實驗和曠場實驗評價動物的運動功能、探索行為及焦慮情緒。通過免疫組化觀察中腦黑質(zhì)TH神經(jīng)元,計數(shù)TH陽性細胞數(shù)。微量酶標法檢測腦組織GSH、MDA含量。蛋白印跡檢測腦組織中SOD和CAT的表達量;檢測UPR信號傳導(dǎo)通路相關(guān)蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4、p-IRE1α、XBP1、ATF6的變化以及ERS介導(dǎo)的凋亡途徑相關(guān)蛋白CHOP、ASK1、p-JNK、Caspase-12、Caspase-9、Caspa... 

【文章來源】：山西中醫(yī)藥大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ERS應(yīng)答啟動機制膠質(zhì)細胞的活化等作用改善PD小鼠運動功能，減少黑質(zhì)DA能神經(jīng)元的丟失，增加紋狀體DA含量，對PD具有一定的防治作用

山西中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文10顯著延長（P<0.001）；與模型組比較，WYP治療組移除膠布用時明顯縮短（P<0.01），前肢更加協(xié)調(diào)靈活。表4各組小鼠膠布移除時間比較（x±s；n=8）組別膠布移除時間（s）正常組9.42±0.10模型組19.79±1.58***WYP治療組14.49±0.74△△注：與正常組比較，***P<0.001；與模型組比較，△△P<0.01。3.1.5WYP對PD模型小鼠曠場行為學(xué)表現(xiàn)的影響由系統(tǒng)最終生成的活動軌跡圖可以看出，在新異環(huán)境中，正常小鼠（圖2A）行動路線復(fù)雜多變且活動量多，遍布整個箱底，中央?yún)^(qū)活動量大，探究行為明顯；與正常小鼠相比，模型組動物行動路線簡單明了（圖2B），活動量少且多沿敞箱底部四周貼壁運動，中央?yún)^(qū)運動路線清晰了然，探究行為亦明顯減少，提示有明顯的焦慮情緒；WYP治療后小鼠活動量相比模型組增加，箱底軌運動跡分布較為均勻，中央?yún)^(qū)的自主活動和探究行為明顯增多，焦慮情緒得到緩解，見圖2C。圖2各組小鼠曠場運動軌跡圖差異用Smart3.0軟件對上述自主活動行為做進一步的量化分析。如表5結(jié)果，與正常組比較，模型組小鼠移動總距離顯著縮短（P<0.01），穿格次數(shù)減少、平均速度減慢、休息時間延長，差異明顯（均P<0.05）；與模型組比較，WYP治療組移動總距離顯著增加（P<0.01），穿格次數(shù)增多、平均速度提高、休息時間減少，差異明顯（均P<0.05）。提示W(wǎng)YP可增強小鼠自發(fā)活動能力。

五子衍宗丸對帕金森病模型小鼠的防治作用及機制研究11表5各組小鼠運動總距離、平均速度、休息時間、穿格次數(shù)比較（x±s，n=8）組別總距離（cm）平均速度（cm/s）休息時間（s）穿格次數(shù)（次）正常組1135±45.973.314±0.1539.83±3.12127±15.48模型組838.70±35.35**2.58±0.17*55.76±5.28*80.94±10.33*WYP治療組1082±73.04△△3.07±0.14△42.74±2.96△109.6±7.41△注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01。3.2WYP對PD模型小鼠中腦黑質(zhì)TH表達的影響圖3A示，正常腦組織中，黑質(zhì)區(qū)TH陽性神經(jīng)元排列緊密，胞漿被染成棕黃色，顏色較深且染色均勻，MPTP損傷后，神經(jīng)元呈散在排列，胞質(zhì)染色較淺且顏色深淺不一；與模型組比較，WYP治療有效改善了這一現(xiàn)象，其神經(jīng)元排列相對整齊，胞漿染色亦變深。圖3B結(jié)果中，與正常組比較，模型組TH陽性細胞數(shù)顯著減少（P<0.001），神經(jīng)元缺失嚴重，模型制備成功；與模型組比較，WYP治療組TH陽性細胞數(shù)明顯增多（P<0.01）。提示W(wǎng)YP治療可明顯減少或延緩PD小鼠黑質(zhì)DA的丟失，可在一定程度上起到保護DA能神經(jīng)元的作用。圖3各組小鼠中腦黑質(zhì)TH的表達差異注：（A）小鼠中腦黑質(zhì)TH免疫組織化學(xué)染色（50×）。（B）中腦黑質(zhì)TH陽性細胞計數(shù)。（與正常組比較，***P<0.001；與模型組比較，△△P<0.01；x±s；n=3）


本文編號：3324933