研究目的:探討microRNA-199a-3p（miR-199a-3p）通過調(diào)控PI3K/Akt/m TOR信號通路參與Human Embryonic Lung Fibroblasts（HELF）細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化。研究方法:1.實(shí)驗(yàn)分Control組和TGF-β1組,TGF-β1組單獨(dú)使用TGF-β1誘導(dǎo)HELF細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化模型,Control組給予等量含10%FBS（fetal bovine serum）的DMEM培養(yǎng)基。Western Blot檢測α-SMA蛋白在兩組細(xì)胞中表達(dá)的變化。2.對HELF細(xì)胞表型轉(zhuǎn)染mi R-199a-3p inhibitors NC及miR-199a-3p inhibitors。實(shí)驗(yàn)分6組:空白對照（control）組、TGF-β1組、miR-199a-3p inhibitors NC組、miR-199a-3p inhibitors NC+TGF-β1組、miR-199a-3p inhibitors組、miR-199a-3p inhibitors+TGF-β1組。3.qRT-PCR技術(shù)檢測以上6組細(xì)胞中miR-199a-3p的表達(dá)。4.Western Bl... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

WesternBlot檢測α-SMA在2組HELF細(xì)胞中的表達(dá)（*為P值縮寫）

第3章結(jié)果16細(xì)胞中mi-199a-3p表達(dá)升高。見圖3.2。圖3.2qRT-PCR檢測6組HELF細(xì)胞中miR-199a-3p的表達(dá)（*為P值縮寫）3.3WesternBlot法檢測6組HELF細(xì)胞中目標(biāo)蛋白的表達(dá)經(jīng)TGF-β1處理后HELF細(xì)胞的α-SMA、CollagnI蛋白與正常對照組相比表達(dá)明顯增加，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（分別為P＜0.01，P＜0.001），再次證明HELF細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化模型成功建立。miR-199a-3pinhibitors+TGF-β1組的HELF細(xì)胞α-SMA、CollagnI蛋白表達(dá)較miR-199a-3pinhibitorsNC+TGF-β1組明顯減低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（分別為P＜0.05，P＜0.001）。見圖3.3。表明：轉(zhuǎn)染miR-199a-3pinhibitors能逆轉(zhuǎn)TGF-β1的促α-SMA、CollagenI蛋白表達(dá)作用，miR-199a-3p參與HELF細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化并發(fā)揮重要作用。miR-199a-3p能通過調(diào)節(jié)TGF-β1誘導(dǎo)作用調(diào)節(jié)HELF細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化。

WesternBlot法檢測6組HELF細(xì)胞中α-SMA、CollagnI蛋白的表達(dá)（*為P值縮寫）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TGF-β信號通路與肺纖維化治療的研究進(jìn)展[J]. 李俸敏,王火.  武警后勤學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(02)

博士論文
[1]基于自噬相關(guān)PTEN/mTOR信號通路探討補(bǔ)陽還五湯對博來霉素所致小鼠肺纖維化干預(yù)機(jī)制研究[D]. 潘怡.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2019

碩士論文
[1]脂多糖誘導(dǎo)的ALI/ARDS小鼠肺組織microRNA表達(dá)譜的初步研究[D]. 卿娣.南方醫(yī)科大學(xué) 2013



本文編號：3311989