小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞的過度激活會引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥因子水平失衡并損壞中樞神經(jīng)環(huán)路,這與抑郁癥的發(fā)病相關(guān)。瞬態(tài)受體電位類香草素1型受體（TRPV1）是一種主要介導(dǎo)Ca²⁺內(nèi)流的陽離子通道,而Ca²⁺內(nèi)流可能推動小膠質(zhì)細(xì)胞過度激活。已有的研究表明TRPV1與動物抑郁樣行為相關(guān),然而其具體機(jī)制尚不明確。因此本實驗旨在闡明TRPV1與小膠質(zhì)細(xì)胞激活之間存在的關(guān)聯(lián)性以及其在抑郁樣行為發(fā)生過程中扮演的角色。本實驗分為三個部分:1)為了探究TRPV1在介導(dǎo)小鼠應(yīng)激抵抗性中扮演的角色,本研究采用LPS注射到野生型小鼠與TRPV1基因缺陷(TRPV1^-/-)小鼠并檢測其抑郁樣行為表現(xiàn)。結(jié)果顯示,相比于野生型鼠,TRPV1^-/-鼠在強(qiáng)迫游泳試驗與懸尾測試中均表現(xiàn)出更長的潛伏時間與更短的不動時間,展示出對應(yīng)激的抵抗性。2)為了確定TRPV1在小膠質(zhì)細(xì)胞過度激活過程中發(fā)生的變化,本研究采用免疫熒光染色技術(shù)分析小膠質(zhì)細(xì)胞TRPV1的表達(dá),并進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果顯示,在生理狀態(tài)下,同星形... 

【文章來源】：電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

TRPV1參與LPS誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞NLRP3炎癥小體激活機(jī)制示意圖

電子科技大學(xué)碩士學(xué)位論文12中，生理狀態(tài)下對照組的小鼠在空間探索與運動能力方面的表現(xiàn)均顯著優(yōu)于給予LPS的應(yīng)激小鼠，表明LPS會影響小鼠運動能力。進(jìn)一步地，在2-1(b)圖中，我們統(tǒng)計得出，實驗組小鼠在曠場中心停留時間占比顯著低于對照組小鼠，表明LPS應(yīng)激也引發(fā)了小鼠的焦慮樣行為。而相對于WT+LPS組，TRPV1基因缺陷的TRPV1-/-+LPS組小鼠在曠場中心停留時間占比顯著增高，表明TRPV1的缺失可能涉及到對LPS引發(fā)的焦慮行為的耐受。在(c)圖所示的運動路程方面，生理狀態(tài)下，WT+Saline組與TRPV1-/-+Saline組在曠場中的運動路程方面并沒有表現(xiàn)出差異，表明生理狀態(tài)下TRPV1離子通道對小鼠運動能力不會有影響。實驗組小鼠在遭受LPS應(yīng)激之后運動能力顯著下降，但TRPV1-/-+LPS組與WT+LPS組相比，并沒有在運動路程方面產(chǎn)生顯著性差異，揭示了無論是在生理狀態(tài)還是LPS應(yīng)激狀態(tài)下，TRPV1離子通道的缺失不會對小鼠的運動能力產(chǎn)生改變。綜上結(jié)論，TRPV1離子通道的缺失并不會顯著影響小鼠的運動能力，因此我們在強(qiáng)迫游泳試驗與懸尾測試中進(jìn)行的行為測試是具有客觀性的。(a)(b)(c)圖2-1TRPV1離子通道對于實驗小鼠在曠場測試中的影響(a)野生型（WT）鼠與TRPV1缺陷（TRPV1-/-）鼠分別在生理狀態(tài)與LPS應(yīng)激下于開放場地中的運動軌跡熱度示意圖；(b)各組實驗小鼠在開放場地的中心區(qū)域停留時間占總測試時間的比例；(c)各組實驗小鼠在開放場地中運動總路程統(tǒng)計。Mean±SEM，*P<0.05，****P<0.0001，n=8。在圖2-2中，同給予生理鹽水的對照組小鼠相比，經(jīng)過LPS處理的實驗小鼠在

第二章TRPV1對于小鼠抑郁樣行為的影響13強(qiáng)迫游泳試驗與懸尾測試中均表現(xiàn)出較短的逃避潛伏時間與較長的不動時間。如圖(a)、(c)，在LPS處理的實驗組內(nèi)，相對于WT+LPS組的野生實驗小鼠，TRPV1-/-+LPS組的基因缺陷小鼠在強(qiáng)迫游泳試驗與懸尾測試中則表現(xiàn)出逃避潛伏時間增加，但無顯著性差異。在圖(b)、(d)中，相對于WT+LPS組的野生實驗小鼠，TRPV1-/-+LPS組的基因缺陷小鼠在強(qiáng)迫游泳試驗與懸尾測試中則表現(xiàn)出不動時間顯著降低。以上結(jié)果表明TRPV1-/-鼠在生理狀態(tài)下，與野生型小鼠在抑郁樣行為方面并無差異，而當(dāng)面對應(yīng)激的時候，TRPV1-/-鼠則會表現(xiàn)出一定的應(yīng)激抵抗性，有較高的求生欲望，更不容易產(chǎn)生抑郁樣行為。(a)(b)(c)(d)圖2-2TRPV1離子通道參與對小鼠抑郁樣行為調(diào)控(a)、(c)分別為實驗小鼠在強(qiáng)迫游泳試驗和懸尾測試中的逃避潛伏時間記錄；(b)、(d)分別為實驗小鼠在強(qiáng)迫游泳試驗和懸尾測試中的不動時間記錄。Mean±SEM，*P<0.05，***P<0.001，****P<0.0001，n=8。逃避潛伏時間（latencytime）指實驗動物在強(qiáng)迫游泳試驗與懸尾測試中，從開始實驗計時到第一次停止掙扎逃生所用的時間。不動時間（immobilitytime）指小鼠在強(qiáng)迫游泳試驗與懸尾測試中停止掙扎、靜止不動的時間總和。2.5討論抑郁癥是異質(zhì)性、多因素誘發(fā)的疾病，在心理、生理和行為上都會出現(xiàn)不同程度的癥狀表現(xiàn)。人類的很多抑郁癥狀在小鼠中是難以模擬的，比如我們無法在動物中觀察到悲傷的面部表情，也無法了解動物是否有想要自殺的念頭，因此即使


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