Pds5b上調(diào)Ptch2抑制胰腺癌細(xì)胞增殖和侵襲的研究
發(fā)布時(shí)間：2021-07-09 03:14
背景:胰腺癌是一種惡性程度很高的腫瘤,該病早期癥狀隱匿,不易察覺,易發(fā)生轉(zhuǎn)移,生存率低。近年來,Pds5b被認(rèn)為與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān),但在胰腺癌中的報(bào)道不多。此外,大量的研究認(rèn)為癌癥的進(jìn)展與Hedgehog信號(hào)通路相關(guān),Ptch2是Hedgehog信號(hào)通路里的關(guān)鍵分子,但Ptch2目前在胰腺癌中的作用尚不明確。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)miR-223可通過下調(diào)Pds5b進(jìn)而促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞增殖的作用,但Pds5b在胰腺癌中的功能仍不明確。因此,本文擬進(jìn)一步探討Pds5b在胰腺癌中的作用,以及可否通過調(diào)控Ptch2抑制人胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,進(jìn)而為臨床胰腺癌分子靶向治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的:探討Pds5b可否通過調(diào)控Ptch2抑制人胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。方法:以人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)anc-1和PaTu-8988為研究對(duì)象,轉(zhuǎn)染Pds5b質(zhì)粒和小干擾片段,通過蛋白免疫印記驗(yàn)證Pds5b過表達(dá)和敲除的效果,利用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)觀察轉(zhuǎn)染后胰腺癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的變化。利用免疫組化檢測(cè)人胰腺癌組織中Pds5b表達(dá)及與臨床預(yù)后的關(guān)系。蛋白免疫印記和qRT-...
【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
Westernblot檢測(cè)Pds5b表達(dá)水平（A：Westernblot檢測(cè)轉(zhuǎn)染Pds5b干擾片段后胰腺癌
fragment. B: Western blot detected the expression of Pds5b protein after transfected Pds5b plasmid. C, D: Quantitative analysis for A and B; ***P<0.001, compared with control; **P<0.01, compared with control) 2. Pds5b 抑制人胰腺癌細(xì)胞的增殖 為了明確 Pds5b 對(duì)胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，MTT 檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞增殖的變化。結(jié)果表明：在 PANC-1 和 Patu-8988 細(xì)胞導(dǎo)入 Pds5b 質(zhì)粒后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞增長(zhǎng)顯著降低（圖 2A）；而敲除 Pds5b 后細(xì)胞增長(zhǎng)明顯升高（圖 2B）。
24細(xì)胞轉(zhuǎn)染Pds5b質(zhì)粒后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞凋亡率明顯增加（見圖3A）；圖3.Pds5b誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞的凋亡（A.B：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)過表達(dá)Pds5b誘導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞凋亡C：對(duì)A.B圖的定量分析；*表示與對(duì)照組相比，P<0.05；**表示與對(duì)照組相比，P<0.01；***表示與對(duì)照組相比，P<0.001）Figure3.Pds5breducedPCcellsapoptosis.(A.B:FlowcytometryshowsPds5breducedPCcellsapoptosisafteroverexpressionC:QuantitativeresultsareshownforAandB.*P<0.05,comparedwithcontrol,**P<0.01,comparedwithcontrol***P<0.001,comparedwithcontrol)（二）Pds5b抑制胰腺癌細(xì)胞的遷移與侵襲利用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：PANC-1和Patu-8988細(xì)胞導(dǎo)入Pds5b質(zhì)粒后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞創(chuàng)傷愈合速度明顯降低；當(dāng)導(dǎo)入Pds5b干擾片段后，細(xì)胞遷移能力明顯升高（見圖4A和圖4B）。為了進(jìn)一步明確Pds5b的功能，Transwell顯示，PANC-1和Patu-8988細(xì)胞導(dǎo)入Pds5b質(zhì)粒后，細(xì)胞遷移及侵襲能力降低；當(dāng)導(dǎo)入Pds5b干擾片段后，細(xì)胞遷移及侵襲能力明顯增強(qiáng)（見圖4C和4D）。
本文編號(hào)：3272901
【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
Westernblot檢測(cè)Pds5b表達(dá)水平（A：Westernblot檢測(cè)轉(zhuǎn)染Pds5b干擾片段后胰腺癌
fragment. B: Western blot detected the expression of Pds5b protein after transfected Pds5b plasmid. C, D: Quantitative analysis for A and B; ***P<0.001, compared with control; **P<0.01, compared with control) 2. Pds5b 抑制人胰腺癌細(xì)胞的增殖 為了明確 Pds5b 對(duì)胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，MTT 檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞增殖的變化。結(jié)果表明：在 PANC-1 和 Patu-8988 細(xì)胞導(dǎo)入 Pds5b 質(zhì)粒后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞增長(zhǎng)顯著降低（圖 2A）；而敲除 Pds5b 后細(xì)胞增長(zhǎng)明顯升高（圖 2B）。
24細(xì)胞轉(zhuǎn)染Pds5b質(zhì)粒后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞凋亡率明顯增加（見圖3A）；圖3.Pds5b誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞的凋亡（A.B：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)過表達(dá)Pds5b誘導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞凋亡C：對(duì)A.B圖的定量分析；*表示與對(duì)照組相比，P<0.05；**表示與對(duì)照組相比，P<0.01；***表示與對(duì)照組相比，P<0.001）Figure3.Pds5breducedPCcellsapoptosis.(A.B:FlowcytometryshowsPds5breducedPCcellsapoptosisafteroverexpressionC:QuantitativeresultsareshownforAandB.*P<0.05,comparedwithcontrol,**P<0.01,comparedwithcontrol***P<0.001,comparedwithcontrol)（二）Pds5b抑制胰腺癌細(xì)胞的遷移與侵襲利用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：PANC-1和Patu-8988細(xì)胞導(dǎo)入Pds5b質(zhì)粒后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞創(chuàng)傷愈合速度明顯降低；當(dāng)導(dǎo)入Pds5b干擾片段后，細(xì)胞遷移能力明顯升高（見圖4A和圖4B）。為了進(jìn)一步明確Pds5b的功能，Transwell顯示，PANC-1和Patu-8988細(xì)胞導(dǎo)入Pds5b質(zhì)粒后，細(xì)胞遷移及侵襲能力降低；當(dāng)導(dǎo)入Pds5b干擾片段后，細(xì)胞遷移及侵襲能力明顯增強(qiáng)（見圖4C和4D）。
本文編號(hào)：3272901
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