黃芪甲苷對(duì)胃癌SGC7901/DDP細(xì)胞多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-22 01:34
研究目的:初步探考黃芪甲苷逆轉(zhuǎn)人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/DDP多藥耐藥性的作用以及其可能機(jī)制。研究方法:1.MTT法鑒定SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性;2.MTT法測(cè)定黃芪甲苷和維拉帕米的細(xì)胞毒性,選取兩種藥物的無(wú)毒濃度進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。3.以逆轉(zhuǎn)劑維拉帕米作為陽(yáng)性對(duì)照,MTT法測(cè)定無(wú)毒濃度的黃芪甲苷逆轉(zhuǎn)SGC7901/DDP細(xì)胞多藥耐藥性的作用;4.RT-PCR法檢測(cè)黃芪甲苷對(duì)MDR1基因表達(dá)的影響;5.Western bolt法觀察黃芪甲苷對(duì)MDR1基因編碼產(chǎn)物P-gp表達(dá)的影響,推測(cè)黃芪甲苷逆轉(zhuǎn)耐藥的可能機(jī)制。研究結(jié)果:1.SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性明顯弱于SGC7901細(xì)胞,相對(duì)耐藥指數(shù)為3.26,說(shuō)明該細(xì)胞具有耐藥性。2.黃芪甲苷能抑制SGC7901/DDP耐藥細(xì)胞的增殖,并呈時(shí)效及量效關(guān)系,維拉帕米對(duì)耐藥細(xì)胞有強(qiáng)大的增殖抑制作用,且累積毒性明顯。0.02、0.04、0.08mg/mL黃芪甲苷及1Oμg/mL維拉帕米對(duì)SGC7901/DDP細(xì)胞的抑制率均不超過(guò)10%,可作為無(wú)毒濃度。3.黃芪甲苷能增加SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性而實(shí)現(xiàn)...
【文章來(lái)源】:南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一部分 理論研究
1. 胃癌中醫(yī)的研究進(jìn)展
1.1 病名認(rèn)識(shí)
1.2 病因病機(jī)
1.3 辨證施治
1.4 遣方用藥
2. 中藥單體逆轉(zhuǎn)胃癌多藥耐藥的研究進(jìn)展
2.1 腫瘤多藥耐藥的機(jī)制
2.2 作用于膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白機(jī)制的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.3 作用于腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)制的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.4 作用于與酶系統(tǒng)機(jī)制相關(guān)的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.5 作用于miRNA突變機(jī)制的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.6 展望
3. 黃芪提取物黃芪甲苷的相關(guān)研究
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
1. 實(shí)驗(yàn)一確定SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性
1.1 材料
1.2 方法
1.3 結(jié)果
1.4 討論
2. 實(shí)驗(yàn)二 黃芪甲苷和維拉帕米的細(xì)胞毒性測(cè)定
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結(jié)果
2.4 討論
3. 實(shí)驗(yàn)三 觀察黃芪甲苷對(duì)SGC7901/DDP細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用
3.1 材料
3.2 方法
3.3 結(jié)果
3.4 討論
4. 實(shí)驗(yàn)四 RT-PCR檢測(cè)藥物作用后MDR1基因表達(dá)的變化
4.1 材料
4.2 方法
4.3 結(jié)果
4.4 討論
5. 實(shí)驗(yàn)五 Western-Blot檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞中P-gp表達(dá)的變化
5.1 材料
5.2 方法
5.3 結(jié)果
5.4 討論
第三部分 討論
1. 胃癌MDR與P-gp的表達(dá)
2. 中藥黃芪、提取物黃芪甲苷在腫瘤中的作用
3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
3.1 MTT結(jié)果分析
3.2 RT-PCR和Western-Blot結(jié)果分析
4. 結(jié)論
5. 不足與展望
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝
本文編號(hào):3241847
【文章來(lái)源】:南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一部分 理論研究
1. 胃癌中醫(yī)的研究進(jìn)展
1.1 病名認(rèn)識(shí)
1.2 病因病機(jī)
1.3 辨證施治
1.4 遣方用藥
2. 中藥單體逆轉(zhuǎn)胃癌多藥耐藥的研究進(jìn)展
2.1 腫瘤多藥耐藥的機(jī)制
2.2 作用于膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白機(jī)制的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.3 作用于腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)制的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.4 作用于與酶系統(tǒng)機(jī)制相關(guān)的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.5 作用于miRNA突變機(jī)制的中藥逆轉(zhuǎn)劑
2.6 展望
3. 黃芪提取物黃芪甲苷的相關(guān)研究
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
1. 實(shí)驗(yàn)一確定SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性
1.1 材料
1.2 方法
1.3 結(jié)果
1.4 討論
2. 實(shí)驗(yàn)二 黃芪甲苷和維拉帕米的細(xì)胞毒性測(cè)定
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結(jié)果
2.4 討論
3. 實(shí)驗(yàn)三 觀察黃芪甲苷對(duì)SGC7901/DDP細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用
3.1 材料
3.2 方法
3.3 結(jié)果
3.4 討論
4. 實(shí)驗(yàn)四 RT-PCR檢測(cè)藥物作用后MDR1基因表達(dá)的變化
4.1 材料
4.2 方法
4.3 結(jié)果
4.4 討論
5. 實(shí)驗(yàn)五 Western-Blot檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞中P-gp表達(dá)的變化
5.1 材料
5.2 方法
5.3 結(jié)果
5.4 討論
第三部分 討論
1. 胃癌MDR與P-gp的表達(dá)
2. 中藥黃芪、提取物黃芪甲苷在腫瘤中的作用
3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
3.1 MTT結(jié)果分析
3.2 RT-PCR和Western-Blot結(jié)果分析
4. 結(jié)論
5. 不足與展望
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝
本文編號(hào):3241847
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