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機(jī)械敏感性通道蛋白Piezo1在大鼠肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的表達(dá)及功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-06-20 16:12
  [研究背景]肺動(dòng)脈高壓是嚴(yán)重的不可逆的致死性疾病,而血管重塑是肺動(dòng)脈高壓發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的重要病理生理過(guò)程——肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)的增殖和遷移可導(dǎo)致肺動(dòng)脈中層肌層增厚以及平滑肌向非肌性毛細(xì)血管內(nèi)延伸。細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)在肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的收縮、增殖和遷移中有重要意義[31][32]。Piezo1機(jī)械敏感性通道作為非選擇性陽(yáng)離子通道蛋白之一,對(duì)Ca2+有透過(guò)性,而Ca2+在血管的生理病理中有著非常關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。同時(shí)已有研究證實(shí),Piezo1參與血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的生理病理過(guò)程,現(xiàn)如今對(duì)Piezo1與血管的研究大多聚焦在血管內(nèi)皮上,在動(dòng)脈平滑肌方面,已有證實(shí)其參與小動(dòng)脈的結(jié)構(gòu)重塑。除此以外,Piezo1還參與了壓力感受反射過(guò)程,直接參與人體血壓的調(diào)控[7]。另外,在高血壓患者中,Piezo1開(kāi)放增加對(duì)動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖作用,進(jìn)而影響其直徑和血管壁厚度。既往有學(xué)者認(rèn)為,肺動(dòng)脈高壓的重塑僅在中小動(dòng)脈顯著,是因?yàn)镾OCC及ROCC在近心和末梢肺動(dòng)脈動(dòng)脈平滑肌上的表達(dá)有差異,進(jìn)而對(duì)鈣離子調(diào)控的能力有差異,特... 

【文章來(lái)源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

機(jī)械敏感性通道蛋白Piezo1在大鼠肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的表達(dá)及功能研究


圖2.1.7^07基因在肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌層及原代平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)情況柱狀圖

柱狀圖,平滑肌,動(dòng)脈,蛋白


達(dá)???2.大鼠肺動(dòng)脈平滑肌層及原代平滑肌細(xì)胞Piezol的表達(dá)??2.1.大鼠肺動(dòng)脈平滑肌層及原代平滑肌細(xì)胞mRNA的表達(dá)??為確定肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌層及原代細(xì)胞戶(hù)iezo?基因表達(dá)情況,首先在體式顯微??鏡下將大鼠肺動(dòng)脈肺剝離,取平滑肌層,分別進(jìn)行組織mRNA提取及原代細(xì)胞培養(yǎng)后??的細(xì)胞mRNA提取,而后利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肺內(nèi)、肺外動(dòng)脈平滑肌層及??肺內(nèi)、肺外動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Piezoi基因表達(dá)水平,結(jié)果顯示肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌層??Piezoi基因表達(dá)無(wú)顯著差異(圖2.1A),原代平滑肌細(xì)胞結(jié)果亦類(lèi)似(圖2.1B)。??A?B??mRNA?of?Piezol?in?PA?mRNA?of?Piezol?in?PASMCs??0.00001?〇1??1.5x1〇-?-,?——??>?m?0.000008-????a>?"v)?■????-i?〇??」。1x1〇t?^?0.000006-?——?1?^??|i?冬?■丨丨■??E?|?????^???0.000004-?11??o?1?5,107-???S?i?-r?-?—??li?^?i0000002-?_??0?-I??.???1??〇.〇〇〇〇〇〇?-I??1????1?1???圖2.1.7^07基因在肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌層及原代平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)情況柱狀圖。??EP:Extra?pulmonary;?IP:?Intra?pulmonary.??(A)肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌組織P/mi?mRNA相對(duì)表達(dá)情況(n=6);??(B)肺內(nèi)外動(dòng)脈原代平滑肌細(xì)胞P/ezoJmRNA相對(duì)表達(dá)

柱狀圖,平滑肌,動(dòng)脈,蛋白


?廣州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文???EP:Extra?pulmonary;?IP:?Intra?pulmonary.肺內(nèi)外動(dòng)脈平滑肌層Piezol蛋白表達(dá)情況(A)及灰度分??析柱狀圖(B),n=4,叩<0.05。??2.3.大鼠肺動(dòng)脈原代平滑肌細(xì)胞Piezol蛋白的表達(dá)??在血管組織上確定Piezol蛋白在肺內(nèi)動(dòng)脈平滑肌層表達(dá)高于肺外,現(xiàn)確定在離??體細(xì)胞上兩者表達(dá)是否也具有差異性,為此,首先在體式顯微鏡下將大鼠肺動(dòng)脈剝??離,取平滑肌層進(jìn)行肺動(dòng)脈原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng),提取細(xì)胞總蛋白后,利用免疫印??跡實(shí)驗(yàn)定量肺內(nèi)、肺外原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Piezol蛋白表達(dá)量,結(jié)果顯示肺內(nèi)動(dòng)脈??原代平滑肌細(xì)胞Piezol蛋白表達(dá)高于肺外。??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]機(jī)械敏感離子通道Piezo1在心血管系統(tǒng)中的作用[J]. 黃鵬,尚畫(huà)雨,李順昌,蘇全生.  生命的化學(xué). 2020(03)
[2]Piezo機(jī)械敏感性離子通道研究現(xiàn)狀及其在骨與關(guān)節(jié)組織的研究進(jìn)展[J]. 閆亮,姜金,萬(wàn)浪,馬崇文,楊信信,夏亞一.  中國(guó)醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志. 2018(08)
[3]Piezo機(jī)械敏感性離子通道研究進(jìn)展[J]. 宋朋飛,蔣詩(shī)超,程艷彬,林志剛,張昊,房敏.  中華中醫(yī)藥雜志. 2017(04)



本文編號(hào):3239521

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