目的:通過慢病毒轉染構建過表達CD40L基因THP-1白血病細胞株,并采取尾靜脈注射法構建過表達CD40L基因的裸鼠M5白血病模型,探討過表達CD40L基因?qū)β闶蠊撬杓毎蛲龅挠绊�。方�?1、裸鼠M5白血病模型的建立及鑒定:（1）將18只3-4周齡的雌性NOD/SCID小鼠,隨機分為3組,每組6只,即對照組、模型A組、模型B組。接種前連續(xù)2 d給予每只小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺2 mg/（kg·d）,于預處理后24 h內(nèi)接種細胞。模型組分別經(jīng)尾靜脈接種對數(shù)生長期THP-1細胞懸液1×10⁷/只（A組）、5×10⁶/只（B組）,對照組小鼠采用同樣方法注射等劑量生理鹽水;（2）觀察小鼠一般情況,于預處理前、接種細胞后7、14、21和28 d及處死時檢測血常規(guī)并計數(shù)外周血白細胞分類;（3）瀕死前處死取材,組織切片病理檢查;2、過表達CD40L基因?qū)β闶驧5白血病模型中骨髓細胞凋亡的影響:（1）通過慢病毒轉染方式構建過表達CD40L-THP-1細胞株,用嘌呤霉素進行穩(wěn)轉細胞株篩選,流式細胞術檢測其篩選后純度,采用Q-PCR法驗證是否過表達CD40L基因;（... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各小組A.對照組小鼠代表性圖片；B.模型A組小

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文廖曉敏16圖1各小組小鼠終末期一般情況A.對照組小鼠代表性圖片；B.模型A組小鼠代表性圖片；C.模型B組小鼠代表性圖片。3.2生存時間A組小鼠分別于接種后30和36d各處死2只，32和33d各處死1只，B組小鼠于接種后33和37d各處死1只，35和39d各處死2只。結果見表2。表2三組小鼠處死時間及只數(shù)（只，n=6）3.3血常規(guī)的變化模型A、B組小鼠于建模7d后出現(xiàn)白細胞數(shù)升高，建模14d后與對照組比較，模型組小鼠白細胞數(shù)明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），其中以1×107/只的模型A組最為顯著；此時模型A與模型B組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；21d后血常規(guī)提示各模型組白細胞數(shù)均降低，考慮此時小鼠處于骨髓抑制期或其他原因引起，具體原因值得以后進一步深入研究；在建模28d后模型組小鼠白細胞數(shù)明顯高于對照組（P<0.01），各模型組間差異無顯著性；模型A組在建模第7d、14d、28d與建模前相比，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；模型B組在建模第28d與建模前比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），結果見表3；模型組小鼠與對照組小鼠比較，血紅蛋白變化無明顯統(tǒng)計學意義且各組小鼠之間血紅蛋白隨時間變化也無明顯統(tǒng)計學意義，結果見表4；建模14d后，模型組血小板開始減低，但與對照組比較無統(tǒng)計學意義，第21d模型B組小鼠血小板與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），結果見表5。各組小鼠血常規(guī)各項分組3031323334353637383940對照組———————————模型組A2112模型組B1212

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文廖曉敏17指標變化曲線圖見圖2。表3三組小鼠不同時間白細胞變化（×109個/L，±s，n=6）注：同一時間點與對照組比較，*P<0.05,**P<0.01.�！号c建模前2天比較，P＜0.05；★:與第7天比較，P<0.05；☆：與第14天比較，P<0.05；△：與第21天比較，P<0.05；#：與同一時間點模型組A比較P<0.05。表4三組小鼠不同時間血紅蛋白變化（g/L，±s，n=6）表5三組小鼠不同時間血小板變化（×109個/L，±s，n=6）注：與對照組比較，*P<0.05。圖2各組小鼠血常規(guī)指標變化曲線圖A.各組小鼠白細胞變化曲線圖；B.各組小鼠血紅蛋白變化曲線圖；C.各組小鼠血小板變化曲線圖。分組建模前2天第7天第14天第21天第28天對照組2.71±0.472.92±0.522.38±0.542.54±0.542.38±0.52模型組A2.67±0.634.41±1.82▲4.84±1.13▲*2.46±0.53☆7.01±0.91▲★☆△**模型組B3.06±1.153.96±1.433.71±0.93*#2.12±0.82★☆6.07±1.00▲★☆△**分組建模前2天第7天第14天第21天第28天對照組144.67±7.50131.17±12.57141.50±11.95139.50±8.50139.00±4.98模型組A153.50±12.57126.50±19.72151.67±22.72139.67±13.64142.00±21.42模型組B150.83±17.31142.33±17.50144.17±5.91132.83±21.28150.33±16.27分組建模前2天第7天第14天第21天第28天對照組1478.67±66.321422.50±178.321426.67±90.161453.17±83.491449.50±87.79模型組A1504.00±78.961464.83±84.401326.83±116.321219.00±253.261435.00±300.65模型組B1508.81±202.971478.72±144.311192.50±219.241098.00±147.57*1202.51±189.85

【參考文獻】：
期刊論文
[1]常規(guī)劑量DA方案治療老年急性髓細胞白血病的近期療效及心血管副作用分析[J]. 黃建清,羅必華,游崇登,上官曉輝.  心血管病防治知識(學術版). 2019(21)
[2]柔紅霉素聯(lián)合阿糖胞苷治療急性髓系白血病的臨床價值分析[J]. 李彩霞,馬佳,郭書芳.  四川解剖學雜志. 2019(01)
[3]NOD/SCID免疫缺陷小鼠白血病模型的復制及其鑒定[J]. 葉振策,李淵,韓艷君,周玥,丁繼超.  大理大學學報. 2018(08)
[4]CAG預激方案與常規(guī)化療治療老年初治急性髓性細胞白血�。ˋML）的療效[J]. 王曉娜.  中國醫(yī)藥指南. 2018(06)
[5]不同劑量去甲氧柔紅霉素聯(lián)合阿糖胞苷治療老年初治急性髓系白血病臨床分析[J]. 朱雯雯,胡益鵬.  現(xiàn)代實用醫(yī)學. 2017(09)
[6]嵌合抗原受體T細胞治療的臨床應用[J]. 段軼鋆,李振華.  腫瘤研究與臨床. 2017 (07)
[7]NKT細胞激活劑α-Galcer對小鼠紅白血病的抑制作用[J]. 孫賀軍,王佳驥,王姍,劉遄,陳光,左蓉潔,閆振宇,鄭全輝.  華北理工大學學報(醫(yī)學版). 2017(03)
[8]sCD40L對白血病Kasumi-1細胞的影響及機制[J]. 任明強,陳琦,章瑩.  上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2017(01)
[9]可溶性CD40配體對白血病HL-60細胞Caspase-3及Caspase-8表達的影響[J]. 封忠昕,陳琦,王永倫,閔迅,張振東.  中華腫瘤防治雜志. 2016(19)
[10]CAR-T抗腫瘤研究的現(xiàn)狀及展望[J]. 鄭敏,張嵐.  山東大學學報(醫(yī)學版). 2016(11)



本文編號：3230323