本文關(guān)鍵詞：人參皂甙Rd對(duì)結(jié)核感染后中性粒細(xì)胞的保護(hù)作用及功能的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：“肺結(jié)核仍是全球最主要的健康問題之一,全球大約有1/3人口感染結(jié)核分枝桿菌,我國(guó)結(jié)核病疫情非常嚴(yán)重,患病人數(shù)位居為僅次于印度的世界第二,WHO將我國(guó)列入全球22個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一,現(xiàn)我國(guó)大約有5億人感染結(jié)核分枝桿菌。我國(guó)每年新發(fā)肺結(jié)核患者約145萬,其中痰涂片陽性肺結(jié)核患者65余萬例。我國(guó)結(jié)核病原發(fā)耐藥率高達(dá)18.6%,是全球高發(fā)區(qū),這些患者治療十分困難”[1],結(jié)核病已成為我國(guó)健康和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要問題。在中國(guó),幾千年來人參作為傳統(tǒng)中草藥被廣泛應(yīng)用,人參皂甙則是人參中最有效成分。分為三類,人參皂甙分別為二醇型,三醇型,齊墩果酸型,其中二醇型與三醇型目前認(rèn)為是人參的主要活性成分[2]。包括了常見的Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rh1及糖苷基PT等。近年的研究表明人參皂甙Rd具有抗凋亡作用、抗炎作用、促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬作用、促進(jìn)學(xué)習(xí)功能及抗氧化應(yīng)激作用。機(jī)體受到炎癥刺激后,中性粒細(xì)胞(neutrophils,PMN)是首批從血液中遷移到微生物感染處的先天免疫細(xì)胞。作為專職吞噬細(xì)胞的中性粒細(xì)胞具有一系列受體可以識(shí)別調(diào)理素作用的微生物和未經(jīng)調(diào)理作用的微生物并促進(jìn)其吞噬。這些被吞噬的微生物,大多數(shù)與中性粒細(xì)胞吞噬體與溶酶體融合后被迅速殺死。除了直接殺滅微生物的作用,中性粒細(xì)胞還會(huì)對(duì)微生物模式識(shí)別受體做出反應(yīng),分泌趨化因子和促炎細(xì)胞因子吸引其他免疫細(xì)胞。之前的研究表明人參皂甙Rd具有抗凋亡、抗炎作用,本課題研究人參皂甙Rd對(duì)正常中性粒細(xì)胞及結(jié)核感染后的中性粒細(xì)胞的凋亡變化的影響及其可能的機(jī)制,以及對(duì)中性粒細(xì)胞功能的影響。實(shí)驗(yàn)一人參皂甙Rd對(duì)結(jié)核感染中性粒細(xì)胞模型中對(duì)中性粒細(xì)胞凋亡水平的影響目的:研究人參皂甙Rd對(duì)健康成年人外周血、結(jié)核感染模型的中性粒細(xì)胞凋亡率的影響。方法:抽取健康成年人外周血,提取中性粒細(xì)胞,分為正常中性粒細(xì)胞組、人型結(jié)核分枝桿菌減毒株(H37Ra)感染中性粒細(xì)胞模型組和人體皮下注射用卡介苗(BCG)感染中性粒細(xì)胞組。采用CCK 8法、流式細(xì)胞術(shù),免疫細(xì)胞化學(xué)染色,檢測(cè)了各組中性粒細(xì)胞的細(xì)胞活力及細(xì)胞凋亡水平。結(jié)果:給予各組中性粒細(xì)胞人參皂甙Rd(100u M),相對(duì)于對(duì)照組細(xì)胞凋亡率顯著降低,細(xì)胞活力明顯提高。結(jié)論:人參皂甙Rd能夠抑制正常和結(jié)核感染模型的中性粒細(xì)胞的凋亡,提高細(xì)胞存活率,延長(zhǎng)細(xì)胞存活時(shí)間。實(shí)驗(yàn)二人參皂甙Rd對(duì)結(jié)核感染后中性粒細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制目的:在人參皂甙Rd對(duì)正常中性粒細(xì)胞和結(jié)核感染模型的中性粒細(xì)胞具有抑制細(xì)胞凋亡、延長(zhǎng)中性粒細(xì)胞壽命作用基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究人參皂甙Rd對(duì)中性粒細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制。方法:抽取健康成年人外周血,提取中性粒細(xì)胞,分為正常中性粒細(xì)胞組和結(jié)核感染中性粒細(xì)胞模型組,加入磷脂酰肌醇-3-羥激酶(phosphatidylinositol3-hydroxy kinase,PI3K)/絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶(serine and threonine protein kinase,AKT)抑制劑LY294002或細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellular signal-regulated kinas1/2,ERK1/2)抑制劑PD98059和人參皂甙Rd,采用流式細(xì)胞術(shù),免疫細(xì)胞化學(xué)染色,檢測(cè)了各組中性粒細(xì)胞的細(xì)胞活力及細(xì)胞凋亡水平。結(jié)果:給予PI3K/AKT抑制劑LY294002或ERK1/2抑制劑PD98059和人參皂甙Rd的中性粒細(xì)胞相對(duì)于單純給予人參皂甙Rd的細(xì)胞凋亡率增高。結(jié)論:人參皂甙Rd抑制正常和結(jié)核感染模型的中性粒細(xì)胞的凋亡可能是通過PI3K/AKT和ERK1/2途徑實(shí)現(xiàn)的。實(shí)驗(yàn)三人參皂甙Rd對(duì)中性粒細(xì)胞功能的作用目的:觀察人參皂甙Rd對(duì)中性粒細(xì)胞對(duì)BCG或H37Ra吞噬作用的影響。方法:用H37Ra/BCG感染中性粒細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)細(xì)胞吞噬率;用改良抗酸染色法測(cè)細(xì)胞吞噬指數(shù)。結(jié)果:人參皂甙Rd組(100u M)中性粒細(xì)胞的吞噬率、吞噬指數(shù)較對(duì)照組明顯升高。結(jié)論:人參皂甙Rd可以提高中性粒細(xì)胞吞噬功能。
【關(guān)鍵詞】：人參皂甙Rd 中性粒細(xì)胞 結(jié)核 凋亡 吞噬
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R52
【目錄】：

• 縮略語表5-8
• 中文摘要8-11
• 英文摘要11-14
• 前言14-16
• 文獻(xiàn)回顧16-24
• 實(shí)驗(yàn)一 人參皂甙RD對(duì)結(jié)核感染中性粒細(xì)胞模型中對(duì)中性粒細(xì)胞凋亡水平的影響24-40
• 引言24
• 1 材料24-26
• 2 方法26-29
• 3 結(jié)果29-38
• 4 討論38-40
• 實(shí)驗(yàn)二 人參皂甙RD對(duì)結(jié)核感染后中性粒細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制40-49
• 引言40
• 1 材料40-42
• 2 方法42-44
• 3 結(jié)果44-47
• 4 討論47-49
• 實(shí)驗(yàn)三 人參皂甙RD對(duì)中性粒細(xì)胞功能的作用49-57
• 引言49
• 1 材料49-51
• 2 方法51-53
• 3 結(jié)果53-55
• 4 討論55-57
• 小結(jié)57-58
• 參考文獻(xiàn)58-67
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果67-68
• 致謝68

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