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辣椒素影響神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自噬的機(jī)制及意義研究

發(fā)布時間:2021-04-08 08:47
  目的:探討神經(jīng)膠質(zhì)瘤中辣椒素與自噬的作用及關(guān)系及其作用機(jī)制和臨床意義。方法:1.應(yīng)用免疫組化ElivisionTMplus法檢測151例人不同級別神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織(實驗組)和20例水腫腦組織(對照組)中的自噬相關(guān)蛋白SQSTM1/p62、LC3B和mTOR蛋白的表達(dá)情況;并分析上述因子與膠質(zhì)瘤患者與臨床病理參數(shù)及預(yù)后(整體生存期、無瘤生存期)之間的關(guān)系。2.實驗分組1:分別用自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素(對照組)、辣椒素及雷帕霉素+辣椒素聯(lián)合處理人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤T98G和人星形細(xì)胞瘤U373細(xì)胞株,觀察自噬相關(guān)蛋白SQSTM1/p62和Beclin1在各組中表達(dá)水平的差異。3.實驗分組2:構(gòu)建抑制自噬的mTOR表達(dá)質(zhì)粒,將實驗分為(1)空白對照組(2)空載體組(3)mTOR過表達(dá)組(4)辣椒素組(5)mTOR過表達(dá)+辣椒素組。運(yùn)用Lipofectamin3000試劑盒瞬時轉(zhuǎn)染T98G和U373細(xì)胞株,CCK-8試劑盒檢測上述各組細(xì)胞的增殖情況的差異;qRT-PCR檢測上述各組細(xì)胞的mRNA水平差異;WB檢測上述各組中自噬相關(guān)蛋白SQSTM1/p62、LC3B、ATG5和Becl... 

【文章來源】:蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】:68 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

辣椒素影響神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自噬的機(jī)制及意義研究


星形細(xì)胞瘤Ⅰ-Ⅳ級HE鏡下圖像

膠質(zhì),神經(jīng),蛋白,情況


25圖2:各級別神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中mTOR、LC3B、SQSTM1/p62的蛋白表達(dá)情況(×100)。A:Ⅰ級高表達(dá),強(qiáng)陽性;B:Ⅱ級中等陽性;C:Ⅲ級弱表達(dá);D:Ⅳ級陰性表達(dá);E:Ⅰ級中呈弱表達(dá);F:Ⅱ級中呈中等陽性;G:Ⅲ級中呈中等陽性;H:Ⅳ級中呈高表達(dá);I:Ⅰ級中呈弱表達(dá);J:Ⅱ級中呈弱陽性;K:Ⅲ級中呈中等陽性;L:Ⅳ級中呈中等強(qiáng)度表達(dá)。Figure2:ExpressionofmTOR,LC3B,andSQSTM1/p62proteiningliomatissuesofvariousgrades(×100).A:GradeⅠhighexpression,strongpositive;B:GradeⅡmediumpositive;C:GradeⅢweakexpression;D:GradeⅣnegativeexpression;E:WeakexpressioningradeⅠ;F:ModeratepositiveingradeⅡ;G:ModeratepositiveingradeⅢ;H:HighexpressioningradeⅣ;I:WeakexpressioningradeⅠ;J:weaklypositiveingradeⅡ;K:moderatelypositiveingradeⅢ;L:moderatelystrongexpressioningradeⅣ.3.2LC3B、SQSTM1/p62、mTOR的表達(dá)水平與神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者臨床病理參數(shù)的相關(guān)性分析151例神經(jīng)膠質(zhì)瘤病例中,LC3B高表達(dá)者為107例(70.90%)。在性別、腫瘤大孝KPS評分、有無復(fù)發(fā)等分組中,LC3B的表達(dá)在各組之間均不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);而在年齡、分級分組中LC3B的表達(dá)在這兩組中均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。其中,在年齡分組中,<50歲組77例中有41例LC3B高

曲線圖,生存率,相關(guān)性,膠質(zhì)


31圖3:LC3B、SQSTM1/p62、mTOR與總生存率和無瘤生存率之間的相關(guān)性。A.LC3B表達(dá)水平膠質(zhì)瘤患者的無瘤生存曲線圖(Log-rank=18.319,P<0.001);B.LC3B不同表達(dá)水平膠質(zhì)瘤患者的總體生存曲線圖(Log-rank=51.197,P<0.001);C.SQSTM1/p62不同表達(dá)水平膠質(zhì)瘤患者的無瘤生存曲線圖(Log-rank=15.304,P<0.001);D.SQSTM1/p62不同表達(dá)水平膠質(zhì)瘤患者的總體生存曲線圖(Log-rank=51.526,P<0.001);E.mTOR不同表達(dá)水平

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MEG3和腺苷對HepG2細(xì)胞自噬和增殖的影響[J]. 蒲澤錦,李國平,詹浩煉,周小濤,郭益添,項夢琦,劉麗璇,譚輝,吳靈飛.  中國病理生理雜志. 2018(09)
[2]MicroRNA和雪旺細(xì)胞自噬與周圍神經(jīng)再生修復(fù)的研究進(jìn)展[J]. 高群,寧昕杰,王輝.  中國病理生理雜志. 2018(08)
[3]辣椒素通過抑制自噬活性抑制實驗性自身免疫性神經(jīng)炎[J]. 周壽紅,薛瑞瑞,郭瀟瀟,盛思敏,杜倩,夏嘉輝,肖婷,林芬.  中國藥理學(xué)通報. 2018(02)
[4]雷帕霉素減輕氧糖剝奪對SH-SY5Y細(xì)胞的損傷[J]. 盧娜,魏林郁,王寶英,李璐,楊坤麗,李東亮.  中國病理生理雜志. 2017(01)
[5]辣椒素及二氫辣椒素對神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞和骨肉瘤ROS 17/2.8細(xì)胞的抑制作用[J]. 謝樂,周慎,伍大華,劉冬,向光紅,唐濤,唐勁天.  湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2014(10)
[6]自噬與膠質(zhì)瘤治療研究[J]. 崔磊,陳忠平.  中國神經(jīng)腫瘤雜志. 2009(02)

博士論文
[1]ARPP-19,LC3B,P62在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)和意義[D]. 江濤.安徽醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號:3125248

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