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Galectin-3通過調(diào)控E/N-cadherin和CD44的表達(dá)促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-09 02:02
  研究背景半乳糖凝集素(galectin)是凝集素超級(jí)家族的一個(gè)家族,屬于β-半乳糖苷連接蛋白,對(duì)β-半乳糖苷有高度親和性。迄今為止發(fā)現(xiàn)的半乳糖凝集素共有15種,并且都擁有一個(gè)或兩個(gè)高度保守的糖識(shí)別域(carbohydrate cognition domain,CRD)。半乳糖凝集素-3(galectin-3)是galectin家族中唯一的嵌合型代表,擁有一個(gè)CRD和一個(gè)串聯(lián)重復(fù)結(jié)構(gòu)域。Galectin-3(gal-3)廣泛表達(dá)于正常組織與腫瘤細(xì)胞,在細(xì)胞內(nèi)合成,能夠穿梭于胞漿和胞核,還可以轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜上,能夠調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增值、遷移、凋亡、粘附和血管形成。Gal-3在大多數(shù)腫瘤細(xì)胞內(nèi)呈現(xiàn)高表達(dá),并且其表達(dá)水平與腫瘤的惡性程度存在著密切聯(lián)系。近年來的研究表明,多數(shù)腫瘤患者血清中g(shù)al-3的濃度明顯高于正常人,主要集中在乳腺癌、肺癌、口腔癌、胃癌、胰腺癌和結(jié)腸癌等患者。血清中的gal-3能夠使MUC1極化分布,將細(xì)胞表面的粘附分子(cell adhesion molecules,CAMs)暴露出來,從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘附。也有文獻(xiàn)報(bào)道,gal-3的表達(dá)可誘導(dǎo)整合素的活化,... 

【文章來源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:78 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說明
前言
    1. Galectin-3簡介
        1.1. Galectin家族
        1.2. Galectin-3的結(jié)構(gòu)
        1.3. Galectin-3的表達(dá)
        1.4. Galectin-3的分布與功能
    2. Galectin-3在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)作用
        2.1. Galectin-3與細(xì)胞凋亡
        2.2. Galectin-3與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移
            2.2.1. Galectin-3促進(jìn)血管形成
            2.2.2. Galectin-3促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)
            2.2.3. Galectin-3促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的聚集
            2.2.4. Galectin-3參與免疫調(diào)控
    3. Galectin-3為靶點(diǎn)的抑制劑
        3.1. 糖類抑制劑
        3.2. 非糖類抑制劑
    4. E/N-cadherin和CD44與細(xì)胞間粘附
    5. EGFR的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與腫瘤
    6. 本課題的研究方向
實(shí)驗(yàn)部分
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1. 化合物
        1.2. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑
        1.3. 細(xì)胞株
        1.4. 試劑
        1.5. 試劑配制
        1.6. 儀器設(shè)備
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1. 細(xì)胞的培養(yǎng)(復(fù)蘇和傳代)
        2.2. siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)(方法僅適6孔板)
        2.3. 劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.4. Transwell實(shí)驗(yàn)(侵襲實(shí)驗(yàn))
        2.5. 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞聚集實(shí)驗(yàn)
        2.6. 腫瘤細(xì)胞與HUVECs的粘附實(shí)驗(yàn)
        2.7. Western blotting法檢測相關(guān)蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn)
        2.8. 亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)胞漿和胞核蛋白提取實(shí)驗(yàn)
        2.9. 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
        2.10. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1. 細(xì)胞內(nèi)galectin-3對(duì)粘附分子的調(diào)控及腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的作用
            3.1.1. Galectin-3上調(diào)粘附分子E/N-cadherin和CD44的表達(dá)
            3.1.2. Galectin-3不影響A549細(xì)胞的同型聚集
            3.1.3. Galectin-3通過增加β-catenin入核促進(jìn)A549細(xì)胞與HUVECs間的粘附
            3.1.4. Galectin-3通過增加β-catenin入核上調(diào)N-cadherin和CD44的表達(dá)
            3.1.5. Galectin-3通過增加β-catenin入核促進(jìn)A549細(xì)胞的遷移和侵襲
        3.2. 細(xì)胞外galectin-3對(duì)粘附分子的調(diào)控及腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的作用
            3.2.1. EGF和galectin-3共存對(duì)EGFR磷酸化作用的檢測
            3.2.2. 在EGF存在下,galectin-3通過增加NF-kB入核下調(diào)E-cadherin的表達(dá)
            3.2.3. 在EGF存在下,galectin-3可減少PC3細(xì)胞內(nèi)E-cadherin/β-catenin復(fù)合體的形成
            3.2.4. 在EGF存在下,galectin-3可抑制PC3細(xì)胞的同型聚集
            3.2.5. 細(xì)胞外galectin-3可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)調(diào)控E/N-cadherin和CD44的表達(dá)
            3.2.6. Galectin-3促進(jìn)β-catenin入核
            3.2.7. Galectin-3促進(jìn)腫瘤細(xì)胞與HUVECs間的粘附
            3.2.8. Galectin-3上調(diào)N-cadherin和CD44的表達(dá)來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞與HUVECs之間的粘附
    4. 討論
    5. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]半乳糖凝素-3在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中的表達(dá)及改良柑橘果膠對(duì)其抑制作用[J]. 黃志良,劉海鷹.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(08)



本文編號(hào):3072055

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