研究背景半乳糖凝集素（galectin）是凝集素超級家族的一個家族,屬于β-半乳糖苷連接蛋白,對β-半乳糖苷有高度親和性。迄今為止發(fā)現(xiàn)的半乳糖凝集素共有15種,并且都擁有一個或兩個高度保守的糖識別域（carbohydrate cognition domain,CRD）。半乳糖凝集素-3（galectin-3）是galectin家族中唯一的嵌合型代表,擁有一個CRD和一個串聯(lián)重復結構域。Galectin-3（gal-3）廣泛表達于正常組織與腫瘤細胞,在細胞內合成,能夠穿梭于胞漿和胞核,還可以轉運到細胞膜上,能夠調節(jié)腫瘤細胞的增值、遷移、凋亡、粘附和血管形成。Gal-3在大多數(shù)腫瘤細胞內呈現(xiàn)高表達,并且其表達水平與腫瘤的惡性程度存在著密切聯(lián)系。近年來的研究表明,多數(shù)腫瘤患者血清中gal-3的濃度明顯高于正常人,主要集中在乳腺癌、肺癌、口腔癌、胃癌、胰腺癌和結腸癌等患者。血清中的gal-3能夠使MUC1極化分布,將細胞表面的粘附分子（cell adhesion molecules,CAMs）暴露出來,從而促進腫瘤細胞和血管內皮細胞之間的粘附。也有文獻報道,gal-3的表達可誘導整合素的活化,... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
    1. Galectin-3簡介
        1.1. Galectin家族
        1.2. Galectin-3的結構
        1.3. Galectin-3的表達
        1.4. Galectin-3的分布與功能
    2. Galectin-3在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的生物學作用
        2.1. Galectin-3與細胞凋亡
        2.2. Galectin-3與腫瘤侵襲轉移
            2.2.1. Galectin-3促進血管形成
            2.2.2. Galectin-3促進腫瘤細胞的運動
            2.2.3. Galectin-3促進腫瘤細胞的聚集
            2.2.4. Galectin-3參與免疫調控
    3. Galectin-3為靶點的抑制劑
        3.1. 糖類抑制劑
        3.2. 非糖類抑制劑
    4. E/N-cadherin和CD44與細胞間粘附
    5. EGFR的信號轉導通路與腫瘤
    6. 本課題的研究方向
實驗部分
    1. 實驗材料
        1.1. 化合物
        1.2. 細胞轉染試劑
        1.3. 細胞株
        1.4. 試劑
        1.5. 試劑配制
        1.6. 儀器設備
    2. 實驗方法
        2.1. 細胞的培養(yǎng)（復蘇和傳代）
        2.2. siRNA轉染實驗（方法僅適6孔板）
        2.3. 劃痕實驗
        2.4. Transwell實驗（侵襲實驗）
        2.5. 流式細胞儀檢測細胞聚集實驗
        2.6. 腫瘤細胞與HUVECs的粘附實驗
        2.7. Western blotting法檢測相關蛋白表達實驗
        2.8. 亞細胞結構胞漿和胞核蛋白提取實驗
        2.9. 免疫共沉淀實驗
        2.10. 統(tǒng)計學方法
    3. 實驗結果
        3.1. 細胞內galectin-3對粘附分子的調控及腫瘤細胞侵襲轉移的作用
            3.1.1. Galectin-3上調粘附分子E/N-cadherin和CD44的表達
            3.1.2. Galectin-3不影響A549細胞的同型聚集
            3.1.3. Galectin-3通過增加β-catenin入核促進A549細胞與HUVECs間的粘附
            3.1.4. Galectin-3通過增加β-catenin入核上調N-cadherin和CD44的表達
            3.1.5. Galectin-3通過增加β-catenin入核促進A549細胞的遷移和侵襲
        3.2. 細胞外galectin-3對粘附分子的調控及腫瘤細胞侵襲轉移的作用
            3.2.1. EGF和galectin-3共存對EGFR磷酸化作用的檢測
            3.2.2. 在EGF存在下,galectin-3通過增加NF-kB入核下調E-cadherin的表達
            3.2.3. 在EGF存在下,galectin-3可減少PC3細胞內E-cadherin/β-catenin復合體的形成
            3.2.4. 在EGF存在下,galectin-3可抑制PC3細胞的同型聚集
            3.2.5. 細胞外galectin-3可進入細胞內調控E/N-cadherin和CD44的表達
            3.2.6. Galectin-3促進β-catenin入核
            3.2.7. Galectin-3促進腫瘤細胞與HUVECs間的粘附
            3.2.8. Galectin-3上調N-cadherin和CD44的表達來誘導腫瘤細胞與HUVECs之間的粘附
    4. 討論
    5. 結論
參考文獻
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文
學位論文評閱及答辯情況表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]半乳糖凝素-3在結腸癌肝轉移中的表達及改良柑橘果膠對其抑制作用[J]. 黃志良,劉海鷹.  南方醫(yī)科大學學報. 2008(08)



本文編號：3072055