橙黃決明素浸膏對高脂血癥大鼠肝代謝作用研究
發(fā)布時間:2021-03-01 18:56
目的:本研究采用基于超高效液相色譜-飛行時間質譜儀(UPLC-QTOF-MS)分析方法的非靶向代謝組學技術研究橙黃決明素對高脂血癥大鼠的治療效果,運用化學計量學尋找與高脂血癥相關的代謝物,并探討橙黃決明素干預后對潛在代謝物的影響,從而初步闡明橙黃決明素的作用機制,為其在臨床實踐中的合理應用提供理論依據。方法:隨機將大鼠分成2組,對照組(10只):普通飼料喂養(yǎng);高脂血癥模型組(30只):高脂飼料喂養(yǎng)。兩組均于7天后尾靜脈取血檢測其生化指標,確認造模效果。之后將30只高脂血癥模型大鼠隨機分成3組,分別為模型組(10只)、橙黃決明素組(10只)和阿托伐他汀組(10只)。阿托伐他汀組灌胃阿托伐他汀10mg/(kg·d),橙黃決明素組灌胃橙黃決明素3.6mg/(kg·d),模型組和對照組灌胃等量的水,繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)30天后,處理大鼠,收集肝組織和血漿。血漿用于生化指標檢測。對肝組織進行預處理,之后運用UPLC-Q-TOF-MS分析,得到的數據利用儀器自帶軟件進行整合,導入SMICA-P14.1和MATLAB軟件進行主成分分析(PCA)、偏最小二乘判別分析(PLS-DA)以及隨機森林分析,使用變...
【文章來源】:湖南師范大學湖南省 211工程院校
【文章頁數】:53 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2代謝組學分析的流程??Fig.?1-2?procedures?for?the?analysis?of?metabolomics??
3500r/min離心6min,取??血漿和肝組織于-80°C下保存,用于生化指標檢測和UPLC-QTOF-MS檢測(實驗經??過湖南省人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會通過)。??2.2.2生化指標檢測??。保埃埃椋萄獫{樣本,使用BeckmanAU2700全自動生化分析儀進行分析,分別測??出每個樣本的甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、??總膽固醇(TCM直等參數,之后得到結果。??2.2.3樣品前處理??精確稱。叮埃恚绺谓M織樣本后,具體操作如圖2-1所示。??60mg肝組織樣品??加入800叫甲醇水溶液(CH30H:H20v:v=4:l)???4???加入兩個小鋼珠,在-80°C冰箱中放置5?min???4???研磨機中研磨(60?Hz,?2?min)???3E???超聲提取丨0?min,?-20?°d爭置30?min;???4???低溫離心丨Omin?(15000rpm,?4°C),。玻癌枺瑁痰纳锨逡貉b樣分析,??圖2-1樣品預處理流程??Fig.2-1?Preparation?procedures?of?the?sample??5??
?碩士學位論文???圖3-1正(E)和負(F)離子模式下四組大鼠血清的代表性基峰色譜圖(BPC)??Fig.3-1?Representative?base?peak?chromatogram(BPC)?of?serum?obtained?from?four?group?of??rats?in?the?positive(E)?and?negative(F)?ion?mode??A對照組?B模型組?C橙黃決明素組D阿伐他汀組??A?control?group?B?Model?group?C?Aurantio-obtusin?group?D?Atorvastatin?group??3.2.2.2主成分分析(PCA)??對整合過后的數據進行PCA分析,用到的是SMICA-P?14.1軟件。得到如3-2??圖所示結果。從圖中可以看出正負離子模式下對照組和模型組能分開并各自聚??合,QC在一定范圍內聚集。橙黃決明素組相對比與模型組更接近對照組,正離子模??式下的四組對比不是很明顯,還不能分開,負離子模式下可看出橙黃決明素組相比??較于阿托伐他汀組更接近對照組,但四組不能完全分開。由于PCA對離群點較為??敏感,為了能得到較為顯著的組間差異,我們嘗試選用更高要求的化學計量學模式??識別方法。偏最小二乘判別分析斤1^>0人)是_種更為強調組間差異的模式識別??方法,可以篩選出與反應沒有直接關系的變化,使得結果更可靠,更容易理解,判別??能力明顯優(yōu)于PCA_。??PCA-X?#a?PCA-X?#a?PCA-X?#a??■?B?■?B?■?B??▲?QC?M?VC?A?C??15〇〇:?■?^?1500:
【參考文獻】:
期刊論文
[1]高脂血癥相關疾病發(fā)病機制研究進展[J]. 李艷,孫珂煥,白芳,羅煥敏,吳正治. 遼寧中醫(yī)藥大學學報. 2019(04)
[2]多不飽和脂肪酸的來源及生理功能研究[J]. 靳革,李娟,齊悅,楊勇. 飼料博覽. 2018(04)
[3]載脂蛋白E基因多態(tài)性與2型糖尿病腎病相關性的研究進展[J]. 郭佳,柯亭羽. 醫(yī)學綜述. 2018(08)
[4]老年冠心病急性發(fā)作期病人血清同型半胱氨酸與LPL基因多態(tài)性相關分析[J]. 黎才麗,黃勇,許政衡. 中西醫(yī)結合心腦血管病雜志. 2017(21)
[5]過氧化物酶體增殖物激活受體γ對臟器損傷保護作用的研究進展[J]. 丁瑞文,何妹儀,李志鵬,王美容,柳垂亮. 醫(yī)學綜述. 2017(21)
[6]冠心病合并高脂血癥患者血脂水平與主要炎癥因子的相關性[J]. 沈正軍. 心血管康復醫(yī)學雜志. 2017(04)
[7]2型糖尿病伴高脂血癥患者氧化應激反應與血脂代謝紊亂的關系研究[J]. 馬堯,姜維娜,江紅. 臨床和實驗醫(yī)學雜志. 2017(11)
[8]益生菌干預對高脂高糖飲食誘導肥胖小鼠腸道菌群及脂代謝影響的研究[J]. 孫兆男,張衛(wèi)東,楊云竣,尹宇振,張燁,郭艷杰,袁杰利. 中國微生態(tài)學雜志. 2017(02)
[9]高脂飲食喂養(yǎng)建立高脂血癥模型的驗證及規(guī)律探討[J]. 王燕萍,彭丹虹,劉曉琪,謝蓉,李先濤. 中國比較醫(yī)學雜志. 2017(01)
[10]載脂蛋白CⅢ的研究現狀[J]. 靳景璐,李建軍,郭遠林. 中國動脈硬化雜志. 2016(10)
本文編號:3057887
【文章來源】:湖南師范大學湖南省 211工程院校
【文章頁數】:53 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2代謝組學分析的流程??Fig.?1-2?procedures?for?the?analysis?of?metabolomics??
3500r/min離心6min,取??血漿和肝組織于-80°C下保存,用于生化指標檢測和UPLC-QTOF-MS檢測(實驗經??過湖南省人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會通過)。??2.2.2生化指標檢測??。保埃埃椋萄獫{樣本,使用BeckmanAU2700全自動生化分析儀進行分析,分別測??出每個樣本的甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、??總膽固醇(TCM直等參數,之后得到結果。??2.2.3樣品前處理??精確稱。叮埃恚绺谓M織樣本后,具體操作如圖2-1所示。??60mg肝組織樣品??加入800叫甲醇水溶液(CH30H:H20v:v=4:l)???4???加入兩個小鋼珠,在-80°C冰箱中放置5?min???4???研磨機中研磨(60?Hz,?2?min)???3E???超聲提取丨0?min,?-20?°d爭置30?min;???4???低溫離心丨Omin?(15000rpm,?4°C),。玻癌枺瑁痰纳锨逡貉b樣分析,??圖2-1樣品預處理流程??Fig.2-1?Preparation?procedures?of?the?sample??5??
?碩士學位論文???圖3-1正(E)和負(F)離子模式下四組大鼠血清的代表性基峰色譜圖(BPC)??Fig.3-1?Representative?base?peak?chromatogram(BPC)?of?serum?obtained?from?four?group?of??rats?in?the?positive(E)?and?negative(F)?ion?mode??A對照組?B模型組?C橙黃決明素組D阿伐他汀組??A?control?group?B?Model?group?C?Aurantio-obtusin?group?D?Atorvastatin?group??3.2.2.2主成分分析(PCA)??對整合過后的數據進行PCA分析,用到的是SMICA-P?14.1軟件。得到如3-2??圖所示結果。從圖中可以看出正負離子模式下對照組和模型組能分開并各自聚??合,QC在一定范圍內聚集。橙黃決明素組相對比與模型組更接近對照組,正離子模??式下的四組對比不是很明顯,還不能分開,負離子模式下可看出橙黃決明素組相比??較于阿托伐他汀組更接近對照組,但四組不能完全分開。由于PCA對離群點較為??敏感,為了能得到較為顯著的組間差異,我們嘗試選用更高要求的化學計量學模式??識別方法。偏最小二乘判別分析斤1^>0人)是_種更為強調組間差異的模式識別??方法,可以篩選出與反應沒有直接關系的變化,使得結果更可靠,更容易理解,判別??能力明顯優(yōu)于PCA_。??PCA-X?#a?PCA-X?#a?PCA-X?#a??■?B?■?B?■?B??▲?QC?M?VC?A?C??15〇〇:?■?^?1500:
【參考文獻】:
期刊論文
[1]高脂血癥相關疾病發(fā)病機制研究進展[J]. 李艷,孫珂煥,白芳,羅煥敏,吳正治. 遼寧中醫(yī)藥大學學報. 2019(04)
[2]多不飽和脂肪酸的來源及生理功能研究[J]. 靳革,李娟,齊悅,楊勇. 飼料博覽. 2018(04)
[3]載脂蛋白E基因多態(tài)性與2型糖尿病腎病相關性的研究進展[J]. 郭佳,柯亭羽. 醫(yī)學綜述. 2018(08)
[4]老年冠心病急性發(fā)作期病人血清同型半胱氨酸與LPL基因多態(tài)性相關分析[J]. 黎才麗,黃勇,許政衡. 中西醫(yī)結合心腦血管病雜志. 2017(21)
[5]過氧化物酶體增殖物激活受體γ對臟器損傷保護作用的研究進展[J]. 丁瑞文,何妹儀,李志鵬,王美容,柳垂亮. 醫(yī)學綜述. 2017(21)
[6]冠心病合并高脂血癥患者血脂水平與主要炎癥因子的相關性[J]. 沈正軍. 心血管康復醫(yī)學雜志. 2017(04)
[7]2型糖尿病伴高脂血癥患者氧化應激反應與血脂代謝紊亂的關系研究[J]. 馬堯,姜維娜,江紅. 臨床和實驗醫(yī)學雜志. 2017(11)
[8]益生菌干預對高脂高糖飲食誘導肥胖小鼠腸道菌群及脂代謝影響的研究[J]. 孫兆男,張衛(wèi)東,楊云竣,尹宇振,張燁,郭艷杰,袁杰利. 中國微生態(tài)學雜志. 2017(02)
[9]高脂飲食喂養(yǎng)建立高脂血癥模型的驗證及規(guī)律探討[J]. 王燕萍,彭丹虹,劉曉琪,謝蓉,李先濤. 中國比較醫(yī)學雜志. 2017(01)
[10]載脂蛋白CⅢ的研究現狀[J]. 靳景璐,李建軍,郭遠林. 中國動脈硬化雜志. 2016(10)
本文編號:3057887
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