目的:本研究采用基于超高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（UPLC-QTOF-MS）分析方法的非靶向代謝組學(xué)技術(shù)研究橙黃決明素對(duì)高脂血癥大鼠的治療效果,運(yùn)用化學(xué)計(jì)量學(xué)尋找與高脂血癥相關(guān)的代謝物,并探討橙黃決明素干預(yù)后對(duì)潛在代謝物的影響,從而初步闡明橙黃決明素的作用機(jī)制,為其在臨床實(shí)踐中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法:隨機(jī)將大鼠分成2組,對(duì)照組（10只）:普通飼料喂養(yǎng);高脂血癥模型組（30只）:高脂飼料喂養(yǎng)。兩組均于7天后尾靜脈取血檢測(cè)其生化指標(biāo),確認(rèn)造模效果。之后將30只高脂血癥模型大鼠隨機(jī)分成3組,分別為模型組（10只）、橙黃決明素組（10只）和阿托伐他汀組（10只）。阿托伐他汀組灌胃阿托伐他汀10mg/（kg·d）,橙黃決明素組灌胃橙黃決明素3.6mg/（kg·d）,模型組和對(duì)照組灌胃等量的水,繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)30天后,處理大鼠,收集肝組織和血漿。血漿用于生化指標(biāo)檢測(cè)。對(duì)肝組織進(jìn)行預(yù)處理,之后運(yùn)用UPLC-Q-TOF-MS分析,得到的數(shù)據(jù)利用儀器自帶軟件進(jìn)行整合,導(dǎo)入SMICA-P14.1和MATLAB軟件進(jìn)行主成分分析（PCA）、偏最小二乘判別分析（PLS-DA）以及隨機(jī)森林分析,使用變... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２代謝組學(xué)分析的流程??Ｆｉｇ．?１－２?ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓ??

３５００ｒ／ｍｉｎ離心６ｍｉｎ，取??血漿和肝組織于－８０°Ｃ下保存，用于生化指標(biāo)檢測(cè)和ＵＰＬＣ－ＱＴＯＦ－ＭＳ檢測(cè)（實(shí)驗(yàn)經(jīng)??過(guò)湖南省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)通過(guò)）。??２．２．２生化指標(biāo)檢測(cè)??�。保埃埃椋萄獫{樣本，使用ＢｅｃｋｍａｎＡＵ２７００全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行分析，分別測(cè)??出每個(gè)樣本的甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ－Ｃ）、??總膽固醇（ＴＣＭ直等參數(shù)，之后得到結(jié)果。??２．２．３樣品前處理??精確稱(chēng)�。叮埃恚绺谓M織樣本后，具體操作如圖２－１所示。??６０ｍｇ肝組織樣品??加入８００叫甲醇水溶液（ＣＨ３０Ｈ：Ｈ２０ｖ：ｖ＝４：ｌ）???４???加入兩個(gè)小鋼珠，在－８０°Ｃ冰箱中放置５?ｍｉｎ???４???研磨機(jī)中研磨（６０?Ｈｚ，?２?ｍｉｎ）???３Ｅ???超聲提取丨０?ｍｉｎ，?－２０?°ｄ爭(zhēng)置３０?ｍｉｎ；???４???低溫離心丨Ｏｍｉｎ?（１５０００ｒｐｍ，?４°Ｃ），�。玻癌枺瑁痰纳锨逡貉b樣分析，??圖２－１樣品預(yù)處理流程??Ｆｉｇ．２－１?Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓａｍｐｌｅ??５??

?碩士學(xué)位論文???圖３－１正（Ｅ）和負(fù)（Ｆ）離子模式下四組大鼠血清的代表性基峰色譜圖（ＢＰＣ）??Ｆｉｇ．３－１?Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｂａｓｅ?ｐｅａｋ?ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ（ＢＰＣ）?ｏｆ?ｓｅｒｕｍ?ｏｂｔａｉｎｅｄ?ｆｒｏｍ?ｆｏｕｒ?ｇｒｏｕｐ?ｏｆ??ｒａｔｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ（Ｅ）?ａｎｄ?ｎｅｇａｔｉｖｅ（Ｆ）?ｉｏｎ?ｍｏｄｅ??Ａ對(duì)照組?Ｂ模型組?Ｃ橙黃決明素組Ｄ阿伐他汀組??Ａ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?Ｂ?Ｍｏｄｅｌ?ｇｒｏｕｐ?Ｃ?Ａｕｒａｎｔｉｏ－ｏｂｔｕｓｉｎ?ｇｒｏｕｐ?Ｄ?Ａｔｏｒｖａｓｔａｔｉｎ?ｇｒｏｕｐ??３．２．２．２主成分分析（ＰＣＡ）??對(duì)整合過(guò)后的數(shù)據(jù)進(jìn)行ＰＣＡ分析，用到的是ＳＭＩＣＡ－Ｐ?１４．１軟件。得到如３－２??圖所示結(jié)果。從圖中可以看出正負(fù)離子模式下對(duì)照組和模型組能分開(kāi)并各自聚??合，ＱＣ在一定范圍內(nèi)聚集。橙黃決明素組相對(duì)比與模型組更接近對(duì)照組，正離子模??式下的四組對(duì)比不是很明顯，還不能分開(kāi)，負(fù)離子模式下可看出橙黃決明素組相比??較于阿托伐他汀組更接近對(duì)照組，但四組不能完全分開(kāi)。由于ＰＣＡ對(duì)離群點(diǎn)較為??敏感，為了能得到較為顯著的組間差異，我們嘗試選用更高要求的化學(xué)計(jì)量學(xué)模式??識(shí)別方法。偏最小二乘判別分析斤１＾＞０人）是＿種更為強(qiáng)調(diào)組間差異的模式識(shí)別??方法，可以篩選出與反應(yīng)沒(méi)有直接關(guān)系的變化，使得結(jié)果更可靠，更容易理解，判別??能力明顯優(yōu)于ＰＣＡ＿。??ＰＣＡ－Ｘ?＃ａ?ＰＣＡ－Ｘ?＃ａ?ＰＣＡ－Ｘ?＃ａ??■?Ｂ?■?Ｂ?■?Ｂ??▲?ＱＣ?Ｍ?ＶＣ?Ａ?Ｃ??１５〇〇：?■?＾?１５００：

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高脂血癥相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 李艷,孫珂煥,白芳,羅煥敏,吳正治.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(04)
[2]多不飽和脂肪酸的來(lái)源及生理功能研究[J]. 靳革,李娟,齊悅,楊勇.  飼料博覽. 2018(04)
[3]載脂蛋白E基因多態(tài)性與2型糖尿病腎病相關(guān)性的研究進(jìn)展[J]. 郭佳,柯亭羽.  醫(yī)學(xué)綜述. 2018(08)
[4]老年冠心病急性發(fā)作期病人血清同型半胱氨酸與LPL基因多態(tài)性相關(guān)分析[J]. 黎才麗,黃勇,許政衡.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2017(21)
[5]過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ對(duì)臟器損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J]. 丁瑞文,何妹儀,李志鵬,王美容,柳垂亮.  醫(yī)學(xué)綜述. 2017(21)
[6]冠心病合并高脂血癥患者血脂水平與主要炎癥因子的相關(guān)性[J]. 沈正軍.  心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志. 2017(04)
[7]2型糖尿病伴高脂血癥患者氧化應(yīng)激反應(yīng)與血脂代謝紊亂的關(guān)系研究[J]. 馬堯,姜維娜,江紅.  臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2017(11)
[8]益生菌干預(yù)對(duì)高脂高糖飲食誘導(dǎo)肥胖小鼠腸道菌群及脂代謝影響的研究[J]. 孫兆男,張衛(wèi)東,楊云竣,尹宇振,張燁,郭艷杰,袁杰利.  中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志. 2017(02)
[9]高脂飲食喂養(yǎng)建立高脂血癥模型的驗(yàn)證及規(guī)律探討[J]. 王燕萍,彭丹虹,劉曉琪,謝蓉,李先濤.  中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2017(01)
[10]載脂蛋白CⅢ的研究現(xiàn)狀[J]. 靳景璐,李建軍,郭遠(yuǎn)林.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2016(10)



本文編號(hào)：3057887