研究背景:人牙周膜干細(xì)胞（h PDLSCs）是牙周組織再生中最適宜的種子細(xì)胞之一。在組織工程中,除適宜的種子細(xì)胞以外,生物材料也是必不可少的組成部分。良好的生物材料可以在體外擴(kuò)增或體內(nèi)移植種子細(xì)胞時(shí)與其協(xié)作,發(fā)揮積極作用。來源于間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）最近被證明是培養(yǎng)MSCs的理想表面材料。人尿源性干細(xì)胞（h USCs）具有易收集、采集非侵入性、價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn),使它成為產(chǎn)生干細(xì)胞外基質(zhì)的合適來源。本研究的目的為探究h USCs來源ECM（UECM）的生物學(xué)特點(diǎn),以及對于h PDLSCs增殖、粘附、鋪展和分化的作用。材料和方法:體外實(shí)驗(yàn):從健康成年男性（年齡:20-25歲之間）尿液中提取h USCs。從正畸患者（年齡:12-18歲之間）中收集因?yàn)檎委煻纬慕】登澳パ烙糜谔崛 PDLSCs。流式細(xì)胞儀檢測兩種干細(xì)胞的細(xì)胞表面標(biāo)志物并進(jìn)行多向分化能力鑒定。第4代h USCs和h PDLSCs接種于空白塑料孔板（TCP）,刺激產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)。8天后脫細(xì)胞處理,只留下ECM。利用免疫熒光和掃描電鏡檢測人尿源性干細(xì)胞外基質(zhì)（UECM）的蛋白組成和顯微形態(tài)。將h PDL... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

hUSCs和hPDLSCs的形態(tài)學(xué)觀察Figure1-1ThemorphologyofhPDLSCsandUSCsA：原代hUSCs呈“米粒狀”或梭形，少許傘狀形態(tài)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文18圖1-1hUSCs和hPDLSCs的形態(tài)學(xué)觀察Figure1-1ThemorphologyofhPDLSCsandUSCsA：原代hUSCs呈“米粒狀”或梭形，少許傘狀形態(tài)。B：傳代后hUSCs形態(tài)均一。C：原代hPDLSCs呈長梭形或多角形，放射狀排列。D：傳代后hPDLSCs呈現(xiàn)長梭形。3.2人牙周膜干細(xì)胞和人尿源性干細(xì)胞表面標(biāo)志物鑒定流式細(xì)胞儀檢測顯示，P3代hPDLSCs和hUSCsCD90和CD146表達(dá)呈陽性，CD31，CD43和CD45表達(dá)呈陰性（圖1-2、1-3）。圖1-2hPDLSCs的表面標(biāo)志物檢測Figure1-2FlowcytometricanalysisofhPDLSCs

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19圖1-3hUSCs的表面標(biāo)志物檢測Figure1-3FlowcytometricanalysisofhUSCs3.3人牙周膜干細(xì)胞和人尿源性干細(xì)胞多向分化能力鑒定P3代hPDLSCs和hUSCs在成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)21天，茜素紅染色后倒置顯微鏡下可見紅色鈣結(jié)節(jié)（圖1-4A，C）。P3代hPDLSCs和hUSCs在成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)21天，油紅O然后色倒置顯微鏡下可見紅色脂滴（圖1-4B，D）。圖1-4hPDLSCs和hUSCs的茜素紅染色和油紅O染色Figure1-4AlizarinredSstainingandOilRedOstainingofhPDLSCsandhUSCsA：hPDLSCs茜素紅染色可見紅色鈣結(jié)節(jié)。B：hPDLSCs油紅O染色可見紅色脂滴。C：hUSCs茜素紅染色可見紅色鈣結(jié)節(jié)。D：hUSCs油紅O染色可見紅色脂滴。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]酶解組織塊法原代培養(yǎng)人牙周膜干細(xì)胞和牙髓干細(xì)胞[J]. 李穎,谷子芽,呂秋峰,尤金彪,劉芳菲.  中國組織工程研究. 2012(32)



本文編號：3052633