EV-A71中和表位鑒定及武漢地區(qū)手足口病腸道病毒病原譜研究
發(fā)布時(shí)間:2021-02-25 14:37
手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是一種由多種腸道病毒感染引起的丙類傳染病,多發(fā)于嬰幼兒,能夠引起多種臨床癥狀,如發(fā)燒、口腔皰疹或手、足、臀等部位皮膚出疹等癥狀。通常,手足口病多發(fā)于5歲以下兒童,癥狀輕微,少數(shù)情況下會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥,甚至造成死亡。腸道病毒A組71型(Enterovirus 71,EV-A71)和柯薩奇病毒A組16型(Coxsackievirus A16,CV-A16)是引起手足口病的兩種主要病原體。而近幾年的文獻(xiàn)報(bào)道中,在中國大陸的部分地區(qū)CV-A6和CV-A10已經(jīng)取代EV-A71和CV-A16成為引起手足口病的主要病原體。EV-A71的感染會(huì)導(dǎo)致高熱、神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥和與腦干腦炎相關(guān)的致死性肺水腫癥狀的出現(xiàn),目前對(duì)于EV-A71的治療并沒有有效的特異性抗病毒藥物。感染EV-A71重癥患者的病情快速進(jìn)展和高死亡率對(duì)于EV-A71的特異性診斷和治療帶來了嚴(yán)重的挑戰(zhàn),因此迫切需要EV-A71特異性的單克隆抗體用來檢測(cè)患者感染早期拭子樣本的EV-A71抗原和重癥患者的治療。此外闡明病毒的中和表位將有助于疾病的靶向治療和疫苗...
【文章來源】:武漢生物制品研究所湖北省
【文章頁數(shù)】:102 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
EV-A71中和表位鑒定技術(shù)路線
手足口病腸道病毒病原譜研究技術(shù)路線
中英文縮寫表
前言
第一章 材料與方法
第二章 EV-A71中和表位鑒定
1 結(jié)果
1.1 單克隆抗體8A4的篩選
1.2 純化后腹水的純度鑒定、蛋白含量及效價(jià)測(cè)定
1.3 單抗8A4的間接免疫熒光鑒定
1.4 單抗8A4的Western blot鑒定
1.5 純化后腹水單抗8A4的中和效價(jià)測(cè)定
1.6 逃逸突變株的篩選
1.7 針對(duì)逃逸突變株單抗8A4中和效價(jià)的測(cè)定
1.8 單抗8A4免疫逃逸突變株間接免疫熒光鑒定
1.9 EV-A71 各基因亞型VP2和VP3 同源分析
1.10 免疫逃逸突變前后毒株感染性cDNA的構(gòu)建及拯救
1.11 反向遺傳學(xué)拯救后毒株中和滴度的檢測(cè)
1.12 突變位點(diǎn)三維蛋白結(jié)構(gòu)分析
2 小結(jié)
第三章 2018年武漢地區(qū)手足口病腸道病毒病原譜研究
1 結(jié)果
1.1 HFMD相關(guān)腸道病毒病原譜
1.2 時(shí)間和年齡分布
1.3 腸道病毒的分離培養(yǎng)
1.4 CV-A6VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.5 CV-A10VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.6 CV-A16VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.7 CV-A2VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.8 CV-A4VP1區(qū)進(jìn)化分析
2 小結(jié)
第四章 總結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
附錄
碩士研究生在讀期間發(fā)表論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]湖南省2009—2015年手足口病重癥病例流行病學(xué)分析[J]. 曾舸,羅塏煒,胡世雄,鄧志紅,孫倩萊,楊浩,張恒嬌,張斯鈺,趙善露,高立冬. 中國熱帶醫(yī)學(xué). 2017(02)
[2]北京發(fā)現(xiàn)由CoxA16病毒引致的一次手足口病[J]. 舒建癡,唐耀武,王德生,朱紅,劉海林,曹逸云,陽選祥,薛桂玲,鄭新華,陸桂秋. 北京醫(yī)學(xué). 1986(04)
本文編號(hào):3051115
【文章來源】:武漢生物制品研究所湖北省
【文章頁數(shù)】:102 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
EV-A71中和表位鑒定技術(shù)路線
手足口病腸道病毒病原譜研究技術(shù)路線
中英文縮寫表
前言
第一章 材料與方法
第二章 EV-A71中和表位鑒定
1 結(jié)果
1.1 單克隆抗體8A4的篩選
1.2 純化后腹水的純度鑒定、蛋白含量及效價(jià)測(cè)定
1.3 單抗8A4的間接免疫熒光鑒定
1.4 單抗8A4的Western blot鑒定
1.5 純化后腹水單抗8A4的中和效價(jià)測(cè)定
1.6 逃逸突變株的篩選
1.7 針對(duì)逃逸突變株單抗8A4中和效價(jià)的測(cè)定
1.8 單抗8A4免疫逃逸突變株間接免疫熒光鑒定
1.9 EV-A71 各基因亞型VP2和VP3 同源分析
1.10 免疫逃逸突變前后毒株感染性cDNA的構(gòu)建及拯救
1.11 反向遺傳學(xué)拯救后毒株中和滴度的檢測(cè)
1.12 突變位點(diǎn)三維蛋白結(jié)構(gòu)分析
2 小結(jié)
第三章 2018年武漢地區(qū)手足口病腸道病毒病原譜研究
1 結(jié)果
1.1 HFMD相關(guān)腸道病毒病原譜
1.2 時(shí)間和年齡分布
1.3 腸道病毒的分離培養(yǎng)
1.4 CV-A6VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.5 CV-A10VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.6 CV-A16VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.7 CV-A2VP1區(qū)進(jìn)化分析
1.8 CV-A4VP1區(qū)進(jìn)化分析
2 小結(jié)
第四章 總結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
附錄
碩士研究生在讀期間發(fā)表論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]湖南省2009—2015年手足口病重癥病例流行病學(xué)分析[J]. 曾舸,羅塏煒,胡世雄,鄧志紅,孫倩萊,楊浩,張恒嬌,張斯鈺,趙善露,高立冬. 中國熱帶醫(yī)學(xué). 2017(02)
[2]北京發(fā)現(xiàn)由CoxA16病毒引致的一次手足口病[J]. 舒建癡,唐耀武,王德生,朱紅,劉海林,曹逸云,陽選祥,薛桂玲,鄭新華,陸桂秋. 北京醫(yī)學(xué). 1986(04)
本文編號(hào):3051115
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