本文關(guān)鍵詞：基于微流控芯片骨質(zhì)疏松模型的建立及治療，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:骨形成的減少和骨吸收增加與骨質(zhì)疏松的發(fā)生發(fā)展密不可分。成骨細(xì)胞作為骨形成的重要基礎(chǔ)細(xì)胞,其凋亡與活性降低與骨質(zhì)疏松的形成息息相關(guān)。糖皮質(zhì)激素作為臨床上常用的抗炎藥物對全身骨骼系統(tǒng)有嚴(yán)重的損傷作用。本實(shí)驗(yàn)以微流控技術(shù)為主要手段,體外構(gòu)建糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松模型并對其進(jìn)行治療。通過實(shí)驗(yàn)觀察找出最適誘導(dǎo)濃度,為臨床研究骨質(zhì)疏松提供重要基礎(chǔ)。方法:芯片的設(shè)計(jì)與制作由大連化學(xué)物理研究采用軟蝕刻方法制作而成。以聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane,PDMS)作為芯片制作材料。通過等離子處理將PDMS(通道面)與玻璃片(細(xì)胞培養(yǎng)面)進(jìn)行不可逆封接。選用小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞系作為基礎(chǔ)細(xì)胞并對其進(jìn)行成骨分化誘導(dǎo),利用灌流裝置對芯片內(nèi)的誘導(dǎo)分化成骨細(xì)胞進(jìn)行時(shí)間為24h、速度為0.1μl/min的藥物灌流處理,以此構(gòu)建骨質(zhì)疏松模型,實(shí)驗(yàn)組設(shè)置:一,地塞米松(Dexamethasone,Dex)單獨(dú)灌流組;二,氯化鋰(Li Cl)單獨(dú)灌流組;三,氯化鋰預(yù)處理,地塞米松和氯化鋰同時(shí)灌流組。并根據(jù)芯片本身濃度梯度產(chǎn)生的特點(diǎn)計(jì)算出各通道內(nèi)藥物濃度。根據(jù)骨質(zhì)疏松發(fā)生機(jī)制,檢測成骨細(xì)胞的凋亡程度及堿性磷酸酶活性。采用熒光染色的方法分析糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞凋亡情況,利用組織染色法檢測成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性。用Image-pro Plus6.0對細(xì)胞進(jìn)行分析,分別分析不同藥物濃度下細(xì)胞的形態(tài)及數(shù)量變化、凋亡情況、堿性磷酸酶活性。并用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:(1)微流控芯片的制備整個(gè)芯片通道包括上面的濃度梯度形成(concentration gradient generator,CGG)部分和下面的細(xì)胞培養(yǎng)部分。濃度梯度的設(shè)計(jì)是根據(jù)Noo Li Jeon等人的研究,當(dāng)兩種液體沿濃度梯度通道下行時(shí),每種液體都將在節(jié)點(diǎn)處分流然后與周圍的液流以層流的方式合并,然后在蜿蜒的通道內(nèi)混合,最后在濃度梯度輸出口形成一系列濃。據(jù)現(xiàn)階段研究,本實(shí)驗(yàn)芯片上兩個(gè)進(jìn)液孔的液體濃度分別是0和10μmol/L,那么根據(jù)公式,這六個(gè)輸出口的濃度將分別是0、2、4、6、8和10μmol/L。細(xì)胞培養(yǎng)部分由六個(gè)培養(yǎng)池組成并與濃度梯度形成部分相結(jié)合,每個(gè)培養(yǎng)池的大小為:長1200μm,寬1200μm,高150μm,容積大約為2μL。成骨細(xì)胞通過進(jìn)液孔和通道到達(dá)培養(yǎng)池,貼壁后用于實(shí)驗(yàn)。(2)地塞米松和Li Cl對成骨細(xì)胞增殖及活性影響地塞米松灌流后通道2-6(C2-C6)內(nèi)成骨細(xì)胞的形態(tài)由原來的梭形或纖維狀逐漸變成圓形或橢圓形,其增殖及活性也有明顯的下降(P0.05),且增殖速率隨地塞米松濃度的增加而減小,到C4通道時(shí)細(xì)胞開始成負(fù)增長。而Li Cl灌流后對細(xì)胞的形態(tài)、數(shù)量、增殖速度及活性均無影響。(3)地塞米松和Li Cl對成骨細(xì)胞凋亡的影響地塞米松灌流后的成骨細(xì)胞出現(xiàn)凋亡狀態(tài),包括線粒體膜電位、細(xì)胞核形態(tài)、質(zhì)膜通透性均有所改變(P0.05)且隨著地塞米松濃度的增加凋亡愈加明顯。而Li Cl灌流后的成骨細(xì)胞則沒有出現(xiàn)凋亡狀況。(4)地塞米松和Li Cl對成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性的影響地塞米松灌流后的成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性出現(xiàn)降低(P0.05),且隨著濃度的增加其活性越來越低。Li Cl灌流后的成骨細(xì)胞則沒有出現(xiàn)上述狀況。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)以微流控技術(shù)為平臺,成骨細(xì)胞為基礎(chǔ),利用糖皮質(zhì)激素體外構(gòu)建骨質(zhì)疏松模型及對其進(jìn)行治療。以此對骨質(zhì)疏松的發(fā)病進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)最佳地塞米松誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松形成濃度,并為臨床更好的研究及治療骨質(zhì)疏松提供新的平臺。目的:對關(guān)節(jié)鏡下治療滑膜軟骨瘤病的臨床療效進(jìn)行分析和探討。方法:隨機(jī)選取我院2010年9月到2013年9月收治的16例膝關(guān)節(jié)滑膜軟骨瘤病患者,于關(guān)節(jié)鏡下探查、切除病變滑膜、取出游離體和清理退行性病變。比較術(shù)前和術(shù)后關(guān)節(jié)鏡治療的治療效果。結(jié)果:術(shù)后切口均為I期愈合,所有患者均得到隨訪,時(shí)間12-24個(gè)月,平均(16.75±3.6)個(gè)月,術(shù)后疼痛、絞索及關(guān)節(jié)腫脹癥狀消失,關(guān)節(jié)功能恢復(fù)良好,關(guān)節(jié)活動(dòng)度得到明顯改善。膝關(guān)節(jié)Lysholm評分由術(shù)前(49.18±8.79)分提高至(83.75±4.9)分(P0.05)。且其中治愈15例,痊愈率為93.75%,好轉(zhuǎn)患者1例,好轉(zhuǎn)率6.25%,總有效率100%,術(shù)后未出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥,術(shù)后隨訪期間影像學(xué)檢查均無復(fù)發(fā)。結(jié)論:關(guān)節(jié)鏡治療膝關(guān)節(jié)滑膜軟骨瘤病是臨床治療滑膜軟骨瘤病的有效方法,具有恢復(fù)快、創(chuàng)傷小、切除徹底、復(fù)發(fā)少等優(yōu)點(diǎn),值得臨床推廣應(yīng)用。
【關(guān)鍵詞】：骨質(zhì)疏松 糖皮質(zhì)激素 成骨細(xì)胞 微流控芯片 滑膜軟骨瘤病 膝關(guān)節(jié) 關(guān)節(jié)鏡 療效
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R580
【目錄】：

• 論文一 基于微流控芯片骨質(zhì)疏松模型的建立及治療7-31
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• （一）前言11-13
• （二）材料和方法13-17
• 1. 材料13-15
• 2. 方法15-17
• （三）結(jié)果17-26
• （四）討論26-27
• （五）結(jié)論27-28
• （六）參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述31-44
• 參考文獻(xiàn)38-44
• 論文二 關(guān)節(jié)鏡下治療膝關(guān)節(jié)滑膜軟骨瘤病的臨床療效觀察44-51
• 中文摘要44-45
• 英文摘要45-46
• 前言46
• 資料和方法46-48
• 結(jié)果48
• 討論48-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-51
• 致謝51-52

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4 趙瑩瑩;李勤;葛洋;胡曉明;李曉瓊;鄧玉林;;微流控芯片在血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用及航天醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景分析[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2012年04期

5 馬新華;歐國榮;劉楠;襲著革;高志賢;;水質(zhì)檢測微流控芯片的快速加工技術(shù)[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2013年04期

6 叢輝,王惠民,王躍國;微流控芯片技術(shù)及應(yīng)用展望[J];現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2005年01期

7 張國豪;馬波;秦建華;林炳承;;集成藥物代謝微流控芯片的研制[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報(bào);2008年07期

8 劉妍如;黃榮清;肖炳坤;楊建云;;微流控芯片技術(shù)及其在天然產(chǎn)物活性成分篩選中的應(yīng)用[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2010年03期

9 盧斯媛;蔡紹皙;蔣稼歡;;微流控芯片在細(xì)胞微環(huán)境研究中的應(yīng)用[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2010年03期

10 汪耀;李穎;徐波;馮曉均;劉筆鋒;;微流控芯片藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[J];中國科學(xué):化學(xué);2011年10期

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1 李卓榮;徐濤;岳婉晴;楊夢u&;;高通量細(xì)胞分析微流控芯片的設(shè)計(jì),建模,制備及應(yīng)用[A];中國化學(xué)會(huì)第27屆學(xué)術(shù)年會(huì)第03分會(huì)場摘要集[C];2010年

2 劉文明;李立;任麗;王雪琴;涂琴;張艷榮;王建春;許娟;王進(jìn)義;;基于微流控芯片技術(shù)的生命分析方法研究[A];中國化學(xué)會(huì)第十屆全國發(fā)光分析學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

3 涂琴;王建春;任麗;李立;劉文明;許娟;王進(jìn)義;;微流控芯片細(xì)胞分析方法研究[A];中國化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第9分會(huì)場摘要集[C];2012年

4 溫慧;秦建華;;基于微流控芯片平臺的秀麗隱桿線蟲衰老研究[A];全國生物醫(yī)藥色譜及相關(guān)技術(shù)學(xué)術(shù)交流會(huì)（2012）會(huì)議手冊[C];2012年

5 黃和鳴;蔣稼歡;李遠(yuǎn);賈月飛;蔡紹皙;K.-L.Paul Sung;;一種新穎的磁微流控芯片[A];2008年全國生物流變學(xué)與生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2008年

6 韓建華;李少華;張建平;江龍;;一種微流控芯片的封接方法及其應(yīng)用[A];中國化學(xué)會(huì)第十二屆膠體與界面化學(xué)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

7 童艷麗;陳纘光;;微流控芯片非接觸電導(dǎo)檢測在手性藥物拆分檢測中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會(huì)第十五屆全國有機(jī)分析及生物分析學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

8 岳婉晴;徐濤;李卓榮;楊夢蘇;;基于傳統(tǒng)絲印技術(shù)快速制備低成本微流控芯片方法的研究[A];中國化學(xué)會(huì)第27屆學(xué)術(shù)年會(huì)第09分會(huì)場摘要集[C];2010年

9 周瑩;申潔;鄭春紅;龐玉宏;黃巖誼;;高通量集成細(xì)胞培養(yǎng)微流控芯片[A];第一屆全國生物物理化學(xué)會(huì)議暨生物物理化學(xué)發(fā)展戰(zhàn)略研討會(huì)論文摘要集[C];2010年

10 傅新;謝海波;楊華勇;;集成微泵式微流控芯片的設(shè)計(jì)與測試[A];全球化、信息化、綠色化提升中國制造業(yè)——2003年中國機(jī)械工程學(xué)會(huì)年會(huì)論文集（微納制造技術(shù)應(yīng)用專題）[C];2003年

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1 慧聰;體檢只需“一滴血”測試芯片研制成功[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

2 大學(xué)生記者團(tuán) 安薪竹 記者 任晶惠;體檢有望只需“一滴血”[N];大連日報(bào);2006年

3 記者 羅冰 通訊員 胡永峰;微流控芯片可測出SARS病毒[N];科技日報(bào);2003年

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1 史綿紅;用于疾病診斷及環(huán)境毒物檢測的微陣列及微流控芯片新方法研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

2 周圍;基于微流控芯片的細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測及細(xì)胞驅(qū)動(dòng)技術(shù)的研究[D];河北工業(yè)大學(xué);2010年

3 魏慧斌;微流控芯片—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)用于細(xì)胞代謝及相互作用研究[D];清華大學(xué);2011年

4 徐濤;多功能微流控芯片在懸浮細(xì)胞通訊研究中的應(yīng)用[D];清華大學(xué);2010年

5 汪志芳;生化樣品的微流控芯片在線富集及檢測研究[D];華東師范大學(xué);2012年

6 吳元慶;基于流式細(xì)胞技術(shù)的微流控芯片的研究[D];天津大學(xué);2012年

7 柳葆;用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測的微流控芯片關(guān)鍵技術(shù)與實(shí)驗(yàn)研究[D];河北工業(yè)大學(xué);2012年

8 王桐;干細(xì)胞微流控芯片的設(shè)計(jì)、制備、檢測與應(yīng)用研究[D];北京工業(yè)大學(xué);2013年

9 張瑞巧;基于磁場集成微流控芯片的禽流感病毒熒光檢測[D];武漢大學(xué);2013年

10 李志勇;基于微流控芯片的微納光纖傳感器研究[D];浙江大學(xué);2015年

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1 申瑞霞;基于透氣鋼的微流控芯片氣動(dòng)吸脫模系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2009年

2 于虹;集成化混合和驅(qū)動(dòng)單元的微流控芯片研究[D];湖南大學(xué);2010年

3 蔡秋蓮;環(huán)烯烴共聚物微流控芯片的功能化及應(yīng)用[D];蘭州大學(xué);2011年

4 陳斌;固定化酶陣列微流控芯片應(yīng)用于藥物代謝篩選的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

5 富景林;微流控芯片高靈敏度激光誘導(dǎo)熒光檢測系統(tǒng)的研究及其在集成生化分析系統(tǒng)中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2006年

6 李麗瀟;微流控芯片細(xì)胞培養(yǎng)和藥物誘導(dǎo)凋亡的研究[D];東北大學(xué);2008年

7 何艷;微流控芯片中功能化器件的制備研究[D];吉林大學(xué);2012年

8 李紹前;面向雙顆粒捕捉的介電電泳微流控芯片研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2012年

9 任玉敏;微流控芯片技術(shù)在電泳及微球制備中的研究和應(yīng)用[D];青島大學(xué);2013年

10 王艷;層粘連蛋白/巖藻聚糖類基膜微環(huán)境的構(gòu)建及微流控芯片內(nèi)應(yīng)用[D];西南交通大學(xué);2015年

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本文編號：302127