目的:探討在動物模型中,葉酸對宮頸癌裸鼠移植瘤模型中細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白的影響。方法:1.體外培養(yǎng)宮頸癌細(xì)胞Siha細(xì)胞株,取處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,建立裸鼠宮頸癌移植瘤模型。2.將宮頸癌裸鼠模型隨機(jī)分成3組,（1）葉酸缺乏組（葉酸缺乏飼料+蒸餾水灌胃）（2）葉酸補(bǔ)充組（正常飼料+葉酸600ug/kg/d灌胃）（3）正常對照組（正常飼料+蒸餾水灌胃）。每周稱量一次體重,根據(jù)體重調(diào)整灌胃的劑量,干預(yù)4周。3.免疫印跡法（western blot）在蛋白質(zhì)水平檢測宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3、p62表達(dá)變化。熒光定量PCR在mRNA水平檢測宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3、p62的表達(dá)變化。結(jié)果:1.PCR結(jié)果:與對照組相比,宮頸癌裸鼠移植瘤模型中葉酸缺乏組相較對照組LC3的表達(dá)高、P62的表達(dá)低,葉酸補(bǔ)充組相較于對照組LC3表達(dá)低,P62表達(dá)高（P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。2.Western blot結(jié)果:宮頸癌裸鼠移植瘤模型中,葉酸補(bǔ)充組裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3的表達(dá)（0.5565±0.0158）低于對照組（1.0285±0.8623）及葉酸缺乏組（1.4... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：34 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

自噬蛋白LC3在mRNA水平表達(dá)情況

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14采用spss22軟件包，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組均數(shù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)和單因素方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。2結(jié)果2.1熒光定量PCR檢測結(jié)果葉酸干預(yù)宮頸癌裸鼠移植瘤后，熒光定量PCR檢測三組中自噬相關(guān)蛋白LC3、P62在mRNA水平的表達(dá)情況。結(jié)果顯示：與對照組相比，葉酸缺乏組相較對照組宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3的表達(dá)高、P62的表達(dá)低，葉酸補(bǔ)充組相較于對照組宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3表達(dá)低，P62表達(dá)高（P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。（如圖1、2所示）圖1自噬蛋白LC3在mRNA水平表達(dá)情況圖2自噬蛋白P62在mRNA水平的表達(dá)情況2.2Westernblot的檢測結(jié)果通過westernblot法檢測實(shí)驗(yàn)組中自噬相關(guān)蛋白P62、LC3的表達(dá)水平，葉酸補(bǔ)充組宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3的表達(dá)（0.5565±0.0158）低于

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文15對照組（1.0285±0.8623）及葉酸缺乏組（1.4856±0.0823），葉酸缺乏組較對照組組宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3表達(dá)量高。葉酸補(bǔ)充組宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白P62的表達(dá)（2.037±0.0605）高于對照組（1.7302±0.0474）及葉酸缺乏組（1.0410±0.0311），葉酸缺乏組宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白P62的含量較對照組低（P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。（如圖3、4、5所示）LC3P62βactin葉酸補(bǔ)充組葉酸缺乏組對照組圖3葉酸對宮頸癌裸鼠移植瘤細(xì)胞自噬的影響圖4自噬蛋白LC3的表達(dá)情況圖5自噬蛋白P62的表達(dá)情況

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]宮頸癌患者血清葉酸受體-1表達(dá)水平及早期診斷價值[J]. 李九龍,劉林,張湘,李惠惠,張玲琳,劉華,劉欣,鐘曉武,龍璠.  國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2020(01)
[2]Folic acid contributes to peripheral nerve injury repair by promoting Schwann cell proliferation, migration, and secretion of nerve growth factor[J]. Wei-Bo Kang,Yong-Jie Chen,Du-Yi Lu,Jia-Zhi Yan.  Neural Regeneration Research. 2019(01)



本文編號：3005086