外周血間充質(zhì)干細(xì)胞通過(guò)STAT3介導(dǎo)的IL-10信號(hào)調(diào)控巨噬細(xì)胞極化的機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-19 20:53
目的:1、研究IL-10/STAT3信號(hào)通路在大鼠外周血間充質(zhì)干細(xì)胞(PBMSCs)體外調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化中的作用。2、初步探索大鼠外周血間充質(zhì)干細(xì)胞(PBMSCs)與大鼠外周血間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基(P-CM)對(duì)于體外調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化的差異。方法:1、大鼠PBMSCs的分離、培養(yǎng)與鑒定:收集粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)動(dòng)員后的SD大鼠血液,運(yùn)用淋巴細(xì)胞分離液(Ficoll)吸取單核細(xì)胞層,將收集到的細(xì)胞接種、培養(yǎng)并傳代。取P3代細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM;CD29、CD90、CD44、CD45、CD79和CD11b)、免疫細(xì)胞化學(xué)染色(ICC;CD34、CD73、CD105和HLA-DR)及三系分化實(shí)驗(yàn)鑒定分離、培養(yǎng)的PBMSCs。2、大鼠M0型巨噬細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定:(1)采用L929細(xì)胞制備L929條件培養(yǎng)基。(2)收集SD大鼠股骨骨髓腔沖洗液,離心并收集細(xì)胞,使用巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基(含20%L929條件培養(yǎng)基)接種并培養(yǎng)6d,將得到的細(xì)胞經(jīng)FCM(CD68和CD11b)進(jìn)行表型鑒定。3、PBMSCs與M0型巨噬細(xì)胞共培養(yǎng):本次實(shí)驗(yàn)共分為5組:PBMSCs組、巨噬細(xì)胞(M0)...
【文章來(lái)源】:遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
外周血所提原代細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)及三系分化特性
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文楊睿222.2所提外周血細(xì)胞表型特征經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)及免疫細(xì)胞化學(xué)染色分析顯示,外周血所提細(xì)胞高表達(dá)CD29、CD90、CD44、CD73、CD105,不表達(dá)或若表達(dá)CD45、CD79、CD11b、CD34及HLA-DR(圖2、3)。圖2FCM分析外周血所提原代細(xì)胞表型Figure2PhenotypesofthecollectedcellsfromperipheralbloodanalyzedbyFCM
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文楊睿23圖3ICC分析外周血所提原代細(xì)胞表型Figure3PhenotypesofthecollectedcellsfromperipheralbloodanalyzedbyICC2.3所提骨髓細(xì)胞形態(tài)及表型特征由大鼠骨髓所提細(xì)胞,在使用巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)10天后,通過(guò)光鏡可觀察到其大體形態(tài)呈圓形,周?chē)屑?xì)小偽足伸出且貼壁生長(zhǎng)(圖4A)。經(jīng)流式鑒定,所培養(yǎng)細(xì)胞高表達(dá)CD11b與CD68(圖4B)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]白介素-1β的分泌及其影響因素[J]. 袁維卓,劉麗蘭,張睿迪,王健宇,孫雪純,李媛媛,劉良晨,關(guān)寶生. 牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(06)
[2]三種方法提取大鼠原代巨噬細(xì)胞的生物學(xué)特點(diǎn)比較[J]. 禹茜,胡軍濤,賴(lài)潔,王睿之,馬蘭蘭,湯展宏. 中國(guó)組織工程研究. 2018(24)
[3]Stem cells for spinal cord injuries bearing translational potential[J]. Kyriakos Dalamagkas,Magdalini Tsintou,Alexander M.Seifalian. Neural Regeneration Research. 2018(01)
[4]大鼠外周血間充質(zhì)干細(xì)胞的富集及生物學(xué)特性研究[J]. 賈臨瑛,張潛,方寧,陳龍,余麗梅,劉金偉,章濤. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2015(02)
本文編號(hào):2987693
【文章來(lái)源】:遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
外周血所提原代細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)及三系分化特性
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文楊睿222.2所提外周血細(xì)胞表型特征經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)及免疫細(xì)胞化學(xué)染色分析顯示,外周血所提細(xì)胞高表達(dá)CD29、CD90、CD44、CD73、CD105,不表達(dá)或若表達(dá)CD45、CD79、CD11b、CD34及HLA-DR(圖2、3)。圖2FCM分析外周血所提原代細(xì)胞表型Figure2PhenotypesofthecollectedcellsfromperipheralbloodanalyzedbyFCM
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文楊睿23圖3ICC分析外周血所提原代細(xì)胞表型Figure3PhenotypesofthecollectedcellsfromperipheralbloodanalyzedbyICC2.3所提骨髓細(xì)胞形態(tài)及表型特征由大鼠骨髓所提細(xì)胞,在使用巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)10天后,通過(guò)光鏡可觀察到其大體形態(tài)呈圓形,周?chē)屑?xì)小偽足伸出且貼壁生長(zhǎng)(圖4A)。經(jīng)流式鑒定,所培養(yǎng)細(xì)胞高表達(dá)CD11b與CD68(圖4B)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]白介素-1β的分泌及其影響因素[J]. 袁維卓,劉麗蘭,張睿迪,王健宇,孫雪純,李媛媛,劉良晨,關(guān)寶生. 牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(06)
[2]三種方法提取大鼠原代巨噬細(xì)胞的生物學(xué)特點(diǎn)比較[J]. 禹茜,胡軍濤,賴(lài)潔,王睿之,馬蘭蘭,湯展宏. 中國(guó)組織工程研究. 2018(24)
[3]Stem cells for spinal cord injuries bearing translational potential[J]. Kyriakos Dalamagkas,Magdalini Tsintou,Alexander M.Seifalian. Neural Regeneration Research. 2018(01)
[4]大鼠外周血間充質(zhì)干細(xì)胞的富集及生物學(xué)特性研究[J]. 賈臨瑛,張潛,方寧,陳龍,余麗梅,劉金偉,章濤. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2015(02)
本文編號(hào):2987693
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