目的:觀察白介素6（IL-6）對谷氨酸（Glu）誘導神經(jīng)細胞凋亡的保護作用并明確信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）乙酰化在其中所發(fā)揮的作用。方法:（1）本研究選用SH-SY5Y（神經(jīng)母細胞瘤）細胞株,分為以下四組:Control組;IL-6（10ng/mL）組;Glu（20mmol/L）組;IL-6+Glu組。各組進行如下檢測:（1）CCK8法檢測細胞存活率;（2）乳酸鹽脫氫酶（LDH）釋放實驗檢測LDH活性;（3）倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài);（4）流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡水平;（5）Real-time PCR法和Western Blot法檢測SH-SY5Y細胞凋亡相關(guān)基因和蛋白的表達水平,包括抗凋亡因子Bcl-xl、促凋亡因子Bax和凋亡關(guān)鍵酶半胱氨酸蛋白酶3（caspase3）的mRNA和蛋白的表達水平;（6）采用Western Blot法檢測STAT3第685位賴氨酸（Lys685）乙酰化水平。（2）進一步確定STAT3乙酰化在IL-6抵抗SH-SY5Y細胞凋亡中的作用,使用去乙�；窼IRT1的激活劑白藜蘆醇（Rev）（12.5μmol/L）抑制STAT3乙酰化,通過Weste... 

【文章來源】： 鐘憶 遵義醫(yī)科大學

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

谷氨酸對SH-SY5Y細胞存活率的影響

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文鐘憶222.2IL-6對谷氨酸誘導SH-SY5Y細胞損傷的影響分別采用CCK8法及LDH釋放實驗檢測SH-SY5Y細胞損傷情況。結(jié)果顯示（表9，圖2），與Control組比，Glu組細胞存活率顯著降低，LDH活性明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；與Glu組相比，IL-6+Glu組細胞存活率明顯升高，LDH活性顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；Control組和IL-6組細胞存活率和LDH活性無明顯差異。表9IL-6對谷氨酸誘導SH-SY5Y細胞損傷的影響分組細胞存活率（%）LDH活性（U/L）Control組100±014.24±4.03IL-6組99.6±1.7713.95±3.12Glu組65.13±3.52*39.15±5.56*IL-6+Glu組75.76±3.82#13.13±4.71#注：數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（x±s,n=3）表示,*p<0.05vsControl組，#p<0.05vsGlu組。圖2IL-6對谷氨酸誘導SH-SY5Y細胞損傷的影響注：A：IL-6對谷氨酸誘導細胞存活率的影響；B:IL-6對谷氨酸誘導細胞LDH釋放活性的影響；數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（x±s,n=3）表示,*p<0.05vsControl組，#p<0.05vsGlu組。

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文鐘憶232.3IL-6對谷氨酸誘導SH-SY5Y細胞形態(tài)的影響圖3示Control組SH-SY5Y細胞呈長梭形，有明顯的細胞突起；谷氨酸組細胞損傷明顯，表現(xiàn)為細胞變圓、皺縮、聚集成團，細胞突起減少或消失；IL-6+Glu組的SH-SY5Y細胞損傷較Glu組減輕，變圓皺縮細胞較Glu組減少，細胞突起較Glu組多；IL-6組細胞形態(tài)同Control組無明顯差異。圖3倒置顯微鏡觀察IL-6對谷氨酸誘導SH-SY5Y細胞形態(tài)的影響（×100）注：a：Control組；b：IL-6組；c:Glu組；d:IL-6+Glu組。

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]白介素-6保護小腦顆粒神經(jīng)元抵抗NMDA的神經(jīng)毒性作用[J]. 王曉春,邱一華,彭聿平.  生理學報. 2007(02)
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本文編號：2964820