第一部分Syncytin-1表達(dá)異常對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞功能的影響目的:Syncytin-1在多種惡性腫瘤中發(fā)揮致癌作用,課題組前期已證實(shí)Syncytin-1在非小細(xì)胞肺癌組織中表達(dá)升高,但其具體作用機(jī)制尚不清楚。本研究旨在探討異常升高的Syncytin-1對(duì)非小細(xì)胞肺癌生物學(xué)功能的影響。方法:1.利用RNA干擾技術(shù),敲除和過(guò)表達(dá)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549中Syncytin-1,構(gòu)建 sh-Syncytin-1 和 ov-Syncytin-1 A549 細(xì)胞系。2.通過(guò) CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)、平板克隆實(shí)驗(yàn)、流式分析、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn),觀察Syncytin-1對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。3.轉(zhuǎn)錄因子SP1可以誘導(dǎo)人Syncytin-1啟動(dòng)子活性,對(duì)其細(xì)胞特異性表達(dá)至關(guān)重要,利用RNA干擾技術(shù),敲除非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549中SP1,檢測(cè)Syncytin-1表達(dá)改變。4.通過(guò)CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)、基質(zhì)膠侵襲實(shí)驗(yàn)和流式分析實(shí)驗(yàn)研究過(guò)表達(dá)Syncytin-1在SP1敲除細(xì)胞中的是否發(fā)揮致癌作用。結(jié)果:1.干擾Syncytin-1致使非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞Nusap1、Cycli... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?．?Ｓｙｎｃｙｔｉｎ－１敲低顯著抑制ＮＳＣＬＣ細(xì)胞的增殖

１?ＶＭＨＨｌ??．吾?ＥＳＳ?ｓｈ－Ｓｙｎｃｙｔｉｎ１??｜＞６０－?＊?曰?ｏｖ－Ｓｙｎｃｙｔｉｎ１?Ｎｕｓａｐｌ??ｃ?費(fèi)??１４〇－?，?Ｉ?ｃ〇Ｋ６?ｍｍ??￥?２〇－?＿?Ｉ?■圖?＊?ｉ?ＣＤＫ４??｜?０ｌｌ｜ｌ?Ｉｊｌ?ｌ｜ｊ?ｇａｐｄｈ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ??Ｇ１?Ｓ?Ｇ２??Ｄ?＾＊＃０?？ｈ＊Ｓｙｔｘ：ｙｔｉｆ＞?１?〇ｖ－Ｓｙｎｃｙｔｎ１??＿?Ｅ?Ｆ?Ｇ??ｓ：：ｌｉｉ?！：：ｌ＊ｌ＿?ｋｔｄ－?Ｉ：：ｌｉｌ－??Ｈ?，??圖２．?Ｓｙｎｃｙｔｉｎ－ｌ敲低導(dǎo)致ＮＳＣＬＣ細(xì)胞Ｇ１期阻滯??Ａ和Ｂ，流式細(xì)胞術(shù)分析Ａ５４９細(xì)胞的細(xì)胞周期分布，ｆｌｏｗｊｏ軟件分析顯示：轉(zhuǎn)??染Ｓｙｎｃｙｔｉｎ－ｌ敲低（ｓｈ－Ｓｙｎｃｙｔｉｎ－１）質(zhì)粒后，Ｇ１期細(xì)胞的百分比顯著增加，??（Ｐ＜０．?０５）?；?Ｃ和Ｄ，使用蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞周期相關(guān)基因Ｎｕｓａｐｌ?（Ｄ）、??細(xì)胞周期蛋白Ｄ１?（Ｅ）、ＣＤＫ６?（Ｆ）和ＣＤＫ４?（Ｇ）的蛋白水平，ＩｍａｇｅＪ軟件分析??實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：Ｎｕｓａｐｌ、細(xì)胞周期蛋白Ｄｌ、ＣＤＫ６和ＣＤＫ４表達(dá)降低，（Ｐ?＜０．０５）。??＊?Ｐ?＜０．?０５??２７??

?山東大學(xué)碩士學(xué)位論文???ｒ響??ＮＣ?ｓ＾Ｓｙｎｃｙｔｉｎｌ?〇ｖ３ｙｎｃｙｔｉｎｌ?卜?＾??ｆ：ｌｎ?■??ｔ?麵?＿??ＮＣ?ｓｈ－Ｓｙｎｃｙｔｉｎ１?ｏｖ－Ｓｙｎｃｙｔｉｎ１??圖４．下調(diào)Ｓｙｎｃｙｔｉｎ－１表達(dá)可抑制ＮＳＣＬＣ細(xì)胞的遷移和侵襲??Ａ和Ｂ，劃痕試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞遷移功能，ｓｈ－Ｓｙｎｃｙｔｉｎ－１細(xì)胞遷移面積顯著降低（Ｐ??〈０？?０５）?；?Ｃ和Ｄ，?ｔｒａｎｓｗｅｌｌ實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞的侵襲性，ｓｈ－Ｓｙｎｃｙｔｉｎ－１細(xì)胞侵襲??數(shù)目顯著降低（Ｐ?＜０＿０５）。＊?Ｐ?＜０．?０５??２９??


本文編號(hào)：2960233