發(fā)布時間：2020-12-26 23:57

　　目的:為了完善廣地龍質(zhì)量控制體系,本研究對其質(zhì)量標準進行系統(tǒng)研究。在《中國藥典》2015年版已收載廣地龍性狀、鑒別、檢查等檢測項的基礎(chǔ)上補充廣地龍的DNA條形碼基源鑒別方法;建立廣地龍的含量測定方法與指紋圖譜檢測、分析方法;確定廣地龍標準湯劑的制備工藝,研究廣地龍標準湯劑質(zhì)量標準,為廣地龍相關(guān)質(zhì)量標準研究提供參考。方法:1.采用DNA條形碼技術(shù)對收集到的廣地龍樣品進行基源鑒定,結(jié)合2015年版《中國藥典》中廣地龍性狀、顯微鑒別、薄層鑒別、檢查、浸出物測定,確保用于課題研究、實際生產(chǎn)的廣地龍樣品均為正品。2.采用高效液相色譜(HPLC)法,建立廣地龍中次黃嘌呤、肌苷的含量測定方法,建立廣地龍HPLC指紋圖譜共有模式。3.以出膏率、次黃嘌呤和肌苷含量總量的轉(zhuǎn)移率為評價指標,進行單因素考察,包括加水倍數(shù)、浸泡時間、煎煮時間、煎煮次數(shù)等因素,將最佳因素水平范圍篩選出來;然后進行正交試驗,詳細考察具體參數(shù),通過正交試驗數(shù)據(jù)分析,優(yōu)選出廣地龍標準湯劑最佳制備工藝參數(shù),并進行工藝驗證。4.收集13批次廣地龍樣品,以確定的制備工藝制備廣地龍標準湯劑,測定pH值、總固體、指標成分含量,計算指標成分的轉(zhuǎn)移... 

【文章來源】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

凝膠電泳圖

廣地龍質(zhì)量標準提升及標準湯劑研究13樣品DNA條形碼序列的獲得：使用專業(yè)軟件對測序結(jié)果進行序列拼接，將引物區(qū)去除，獲得樣品相應(yīng)的DNA條形碼序列。結(jié)果判定：在中藥材DNA條形碼鑒定系統(tǒng)或GenBank數(shù)據(jù)庫中應(yīng)用BLAST方法對獲得的序列進行結(jié)果判定。系統(tǒng)鑒定結(jié)果如圖1-4。圖1-4中藥材DNA條形碼鑒定系統(tǒng)鑒定結(jié)果結(jié)果顯示，30批樣品中有12批樣品DNA可在中藥材DNA條形碼鑒定系統(tǒng)中鑒定為Amynthasaspergillus，即參環(huán)毛蚓；其余部分在GenBank數(shù)據(jù)庫中可查詢到接近物種。因此，建立的DNA條形碼基源鑒別方法可用于廣地龍藥材的鑒別。2.3檢查2.3.1水分稱取廣地龍樣品粉末，并平鋪于已干燥至恒重的扁形稱量瓶中，由于地龍粉末質(zhì)地疏松，建議平鋪厚度不超過10mm，按照水分測定法----烘干法（2015年版《中國藥典》通則0832第二法），測定廣地龍樣品中水分的含量。結(jié)果：30批廣地龍樣品水分均小于12.0%，符合藥典要求，結(jié)果見表1-6。

廣地龍質(zhì)量標準提升及標準湯劑研究21甲醇-5mmol/L乙酸銨溶液流動相系統(tǒng)甲醇-10mmol/L乙酸銨溶液流動相系統(tǒng)圖1-6流動相系統(tǒng)的考察結(jié)果：洗脫梯度均為流動相：有機相（B）-水相（A），梯度洗脫：0～10min，A相99％；10～25min，A相99％～90％時，分析圖譜，發(fā)現(xiàn)有機相選擇甲醇更適合分離，水相為5mmol/L乙酸銨溶液或10mmol/L乙酸銨溶液時，對分離度并沒有顯著的優(yōu)化，因此選擇甲醇-水流動相系統(tǒng)。2.5.2.3甲醇-水流動相系統(tǒng)梯度洗脫的優(yōu)化

【參考文獻】：
期刊論文
[1]廣地龍藥材、湯劑及配方顆粒的元素分析[J]. 陳偉韜,畢曉黎,李養(yǎng)學(xué),李素梅,鐘楚云,黃華靖,羅文匯.  中國藥師. 2019(11)
[2]DNA條形碼及ISSR技術(shù)對廣藿香種質(zhì)資源的分析[J]. 胡珊,陳洪毅,鄔龍怡,孟鶴.  現(xiàn)代中藥研究與實踐. 2019(01)
[3]地龍炮制品HPLC指紋圖譜的建立及5種成分測定[J]. 譚玲龍,鐘凌云,宋嬿,張玉蓮,瞿光航.  中成藥. 2018(10)
[4]提高滬地龍藥材質(zhì)量的加工方法研究[J]. 季倩,徐銀霞,張漢明,張磊.  藥學(xué)服務(wù)與研究. 2018(04)
[5]地龍的研究進展[J]. 黃慶,李志武,馬志國,李荷,毛潤乾.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2018(13)
[6]地龍的采收加工、炮制和質(zhì)量標準的研究進展[J]. 熊頌強,鐘凌云,宋嬿,張玉蓮,陳風(fēng)晨.  江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2018(01)
[7]HPLC法測定滬地龍中7個核苷類成分的含量[J]. 周恒,曹依敏,苗水,王少敏,陳銘,蘭嵐,季申.  藥物分析雜志. 2018(01)
[8]不同產(chǎn)地地龍藥材的微性狀鑒別及品質(zhì)研究[J]. 郭利霄,王乾,張丹,鄭開顏,鄭玉光,侯芳潔.  中藥材. 2018(01)
[9]基于UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)的廣地龍化學(xué)成分分析[J]. 張玉,董文婷,霍金海,王偉明.  中草藥. 2017(02)
[10]地龍顆粒劑的制備工藝及質(zhì)量初步評價[J]. 倪妮,馬格非,楊曄.  廣州化工. 2016(19)

博士論文
[1]廣地龍的平喘活性及其機制的研究[D]. 黃傳奇.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2016

碩士論文
[1]采用甘草炮制廣地龍的工藝及其炮制品的質(zhì)量標準研究[D]. 朱啟亮.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[2]地龍平喘有效部位的物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D]. 劉君怡.湖北中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[3]蚯蚓提取物對小鼠燙傷治療效果的研究[D]. 周偉.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]酒地龍、酒牡丹皮的炮制工藝及飲片質(zhì)量標準研究[D]. 別甜甜.廣東藥學(xué)院 2015
[5]地龍對哮喘小鼠氣道重組的作用研究[D]. 唐秋鳳.廣東藥學(xué)院 2014
[6]廣地龍配方顆粒質(zhì)量標準規(guī)范化研究及地龍凝膠劑的研制[D]. 何琳.廣東藥學(xué)院 2007



本文編號：2940688